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mTERT和mTyr双启动子联合调控HN基因重组腺病毒的构建及其对小鼠黑色素瘤细胞的作用研究

摘要第11-13页
Abstract第13-15页
第一章 引言第16-40页
    1 端粒酶逆转录酶启动子的研究进展第16-23页
        1.1 端粒酶逆转录酶基因的结构与功能第17-19页
        1.2 hTERT启动子与mTERT启动子区域的比对第19-22页
        1.3 TERT启动子在肿瘤治疗中的应用第22-23页
    2 酪氨酸酶启动子的研究进展第23-32页
        2.1 酪氨酸、酪氨酸酶基因的结构与功能第24-30页
        2.2 Tyrosinase启动子在肿瘤治疗中的应用第30-32页
    3 新城疫病毒HN蛋白的抑瘤机制及其研究进展第32-37页
        3.1 NDV的HN蛋白的结构和功能第35-36页
        3.2 HN蛋白的抑瘤活性及其机制第36-37页
    4 腺病毒载体在基因治疗中的研究进展第37-40页
        4.1 腺病毒载体的概述第37-38页
        4.2 重组腺病毒的构建思路第38-40页
第二章 mTERTp基因、mTyrp基因和HN基因的克隆与序列分析第40-56页
    1 材料和方法第40-53页
        1.1 材料第40-44页
        1.2 方法第44-53页
    2 结果第53-55页
        2.1 mTERTp基因、mTyrp基因和HN基因PCR/RT-PCR扩增结果第53-54页
        2.2 pMD-mTERTp、pMD-mTyrp和pMD-HN双酶切鉴定结果第54页
        2.3 pMD-mTERTp、pMD-mTyrp和pMD-HN测序结果第54-55页
    3 小结第55-56页
第三章 双启动子调控HN基因的重组腺病毒的构建第56-74页
    1 材料和方法第56-68页
        1.1 材料第56页
        1.2 方法第56-68页
    2 结果第68-73页
        2.1 亚克隆穿梭质粒pShuttle-HN、pShuttle-m TERTp-HN,pShuttle-m Tyrp-HN 和pShuttle-m TERTp-m Tyrp-HN的PCR结果第68-69页
        2.2 亚克隆穿梭质粒pShuttle-HN、pShuttle-m TERTp-HN,pShuttle-m Tyrp-HN和pShuttle-m TERTp-m Tyrp-HN的双酶切结果第69-70页
        2.3 重组腺病毒质粒的电泳图第70页
        2.4 重组腺病毒质粒的PCR鉴定结果第70-71页
        2.5 重组腺病毒质粒的PacⅠ单酶切结果第71-73页
    3 小结第73-74页
第四章 重组腺病毒的包装与鉴定第74-89页
    1 材料和方法第74-84页
        1.1 材料第74-76页
        1.2 方法第76-84页
    2 结果第84-88页
        2.1 重组腺病毒质粒转染HEK293细胞结果第84-86页
        2.2 重组腺病毒感染HEK293细胞后RT-PCR的检测结果第86-87页
        2.3 Westernblotting检测HN蛋白的表达第87页
        2.4 重组腺病毒的滴度测定结果第87-88页
    3 小结第88-89页
第五章 重组腺病毒的体外抑瘤作用研究第89-100页
    1 材料和方法第89-91页
        1.1 材料第89-90页
        1.2 方法第90-91页
    2 结果第91-99页
        2.1 重组腺病毒感染小鼠黑素瘤B16细胞系的荧光检测第91-93页
        2.2 重组腺病毒对B16细胞的细胞活力影响研究第93-94页
        2.3 RT-PCR重组腺病毒在B16细胞中的表达情况检测第94-95页
        2.4 Westernblotting检测HN蛋白的表达第95-96页
        2.5 荧光检测B16凋亡的情况第96-97页
        2.6 重组腺病毒对B16细胞的凋亡作用研究第97-99页
    3 小结第99-100页
第六章 结论与讨论第100-103页
    1 结论第100-101页
    2 讨论第101-103页
参考文献第103-114页
附录一 英文缩略词表第114-116页
致谢第116-117页
攻读硕士学位期间发表的论文第117页

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