摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
第一章 引言 | 第16-40页 |
1 端粒酶逆转录酶启动子的研究进展 | 第16-23页 |
1.1 端粒酶逆转录酶基因的结构与功能 | 第17-19页 |
1.2 hTERT启动子与mTERT启动子区域的比对 | 第19-22页 |
1.3 TERT启动子在肿瘤治疗中的应用 | 第22-23页 |
2 酪氨酸酶启动子的研究进展 | 第23-32页 |
2.1 酪氨酸、酪氨酸酶基因的结构与功能 | 第24-30页 |
2.2 Tyrosinase启动子在肿瘤治疗中的应用 | 第30-32页 |
3 新城疫病毒HN蛋白的抑瘤机制及其研究进展 | 第32-37页 |
3.1 NDV的HN蛋白的结构和功能 | 第35-36页 |
3.2 HN蛋白的抑瘤活性及其机制 | 第36-37页 |
4 腺病毒载体在基因治疗中的研究进展 | 第37-40页 |
4.1 腺病毒载体的概述 | 第37-38页 |
4.2 重组腺病毒的构建思路 | 第38-40页 |
第二章 mTERTp基因、mTyrp基因和HN基因的克隆与序列分析 | 第40-56页 |
1 材料和方法 | 第40-53页 |
1.1 材料 | 第40-44页 |
1.2 方法 | 第44-53页 |
2 结果 | 第53-55页 |
2.1 mTERTp基因、mTyrp基因和HN基因PCR/RT-PCR扩增结果 | 第53-54页 |
2.2 pMD-mTERTp、pMD-mTyrp和pMD-HN双酶切鉴定结果 | 第54页 |
2.3 pMD-mTERTp、pMD-mTyrp和pMD-HN测序结果 | 第54-55页 |
3 小结 | 第55-56页 |
第三章 双启动子调控HN基因的重组腺病毒的构建 | 第56-74页 |
1 材料和方法 | 第56-68页 |
1.1 材料 | 第56页 |
1.2 方法 | 第56-68页 |
2 结果 | 第68-73页 |
2.1 亚克隆穿梭质粒pShuttle-HN、pShuttle-m TERTp-HN,pShuttle-m Tyrp-HN 和pShuttle-m TERTp-m Tyrp-HN的PCR结果 | 第68-69页 |
2.2 亚克隆穿梭质粒pShuttle-HN、pShuttle-m TERTp-HN,pShuttle-m Tyrp-HN和pShuttle-m TERTp-m Tyrp-HN的双酶切结果 | 第69-70页 |
2.3 重组腺病毒质粒的电泳图 | 第70页 |
2.4 重组腺病毒质粒的PCR鉴定结果 | 第70-71页 |
2.5 重组腺病毒质粒的PacⅠ单酶切结果 | 第71-73页 |
3 小结 | 第73-74页 |
第四章 重组腺病毒的包装与鉴定 | 第74-89页 |
1 材料和方法 | 第74-84页 |
1.1 材料 | 第74-76页 |
1.2 方法 | 第76-84页 |
2 结果 | 第84-88页 |
2.1 重组腺病毒质粒转染HEK293细胞结果 | 第84-86页 |
2.2 重组腺病毒感染HEK293细胞后RT-PCR的检测结果 | 第86-87页 |
2.3 Westernblotting检测HN蛋白的表达 | 第87页 |
2.4 重组腺病毒的滴度测定结果 | 第87-88页 |
3 小结 | 第88-89页 |
第五章 重组腺病毒的体外抑瘤作用研究 | 第89-100页 |
1 材料和方法 | 第89-91页 |
1.1 材料 | 第89-90页 |
1.2 方法 | 第90-91页 |
2 结果 | 第91-99页 |
2.1 重组腺病毒感染小鼠黑素瘤B16细胞系的荧光检测 | 第91-93页 |
2.2 重组腺病毒对B16细胞的细胞活力影响研究 | 第93-94页 |
2.3 RT-PCR重组腺病毒在B16细胞中的表达情况检测 | 第94-95页 |
2.4 Westernblotting检测HN蛋白的表达 | 第95-96页 |
2.5 荧光检测B16凋亡的情况 | 第96-97页 |
2.6 重组腺病毒对B16细胞的凋亡作用研究 | 第97-99页 |
3 小结 | 第99-100页 |
第六章 结论与讨论 | 第100-103页 |
1 结论 | 第100-101页 |
2 讨论 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-114页 |
附录一 英文缩略词表 | 第114-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第117页 |