| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-21页 |
| 1.1 课题背景和研究目的及意义 | 第9-10页 |
| 1.1.1 课题背景及来源 | 第9页 |
| 1.1.2 研究目的及意义 | 第9-10页 |
| 1.2 Pde4d的研究进展 | 第10-14页 |
| 1.2.1 Pde4d的表达调控 | 第10-11页 |
| 1.2.2 Pde4d的功能 | 第11-13页 |
| 1.2.3 Pde4d与癌症 | 第13-14页 |
| 1.3 miRNA研究进展 | 第14-19页 |
| 1.3.1 miRNA概述 | 第14-16页 |
| 1.3.2 内含子miRNA特点及作用机制 | 第16页 |
| 1.3.3 miRNA在癌症中的作用 | 第16-18页 |
| 1.3.4 miRNA在肝癌中的作用 | 第18-19页 |
| 1.4 主要研究内容及技术路线 | 第19-21页 |
| 1.4.1 主要研究内容 | 第19-20页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第20-21页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第21-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 实验动物、细胞系、菌株及载体 | 第21页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.4 生物信息学网站与软件 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-34页 |
| 2.2.1 Hepa1-6细胞的培养与转染 | 第22-23页 |
| 2.2.2 RNA的提取、反转录和定量PCR | 第23-26页 |
| 2.2.3 Pde4d过表达载体的构建 | 第26-28页 |
| 2.2.4 WesternBlot实验 | 第28-29页 |
| 2.2.5 突变载体的构建 | 第29-30页 |
| 2.2.6 双荧光素酶报告实验 | 第30页 |
| 2.2.7 MTT细胞增殖实验 | 第30-31页 |
| 2.2.8 细胞周期实验 | 第31页 |
| 2.2.9 细胞凋亡实验 | 第31-32页 |
| 2.2.10 细胞克隆形成实验 | 第32页 |
| 2.2.11 细胞划痕实验 | 第32页 |
| 2.2.12 裸鼠成瘤实验 | 第32-34页 |
| 第3章 miR-1904对Pde4d靶向关系的验证 | 第34-41页 |
| 3.1 引言 | 第34页 |
| 3.2 miR-1904靶基因的预测 | 第34-35页 |
| 3.3 miR-1904对Pde4d表达的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.1 过表达miR-1904对Pde4d的影响 | 第35页 |
| 3.3.2 抑制miR-1904对Pde4d的影响 | 第35-36页 |
| 3.4 Pde4d是miR-1904的靶基因 | 第36-39页 |
| 3.4.1 双荧光素酶报告实验验证Pde4d是miR-1904的靶基因 | 第36-37页 |
| 3.4.2 挽救实验验证Pde4d是miR-1904的靶基因 | 第37-39页 |
| 3.5 讨论 | 第39-40页 |
| 3.6 本章小结 | 第40-41页 |
| 第4章 miR-1904对Hepa1-6细胞生物学行为的影响 | 第41-55页 |
| 4.1 引言 | 第41页 |
| 4.2 miR-1904对Hepa1-6细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
| 4.3 miR-1904对Hepa1-6细胞周期影响 | 第42-44页 |
| 4.4 miR-1904对Hepa1-6细胞凋亡的影响 | 第44-45页 |
| 4.5 miR-1904对Hepa1-6细胞克隆形成能力的影响 | 第45-47页 |
| 4.6 miR-1904对Hepa1-6细胞迁移和侵袭的影响 | 第47-50页 |
| 4.6.1 miR-1904对Hepa1-6细胞迁移的影响 | 第47-48页 |
| 4.6.2 miR-1904对Hepa1-6细胞迁移和侵袭的影响 | 第48-50页 |
| 4.7 miR-1904对裸鼠成瘤的影响 | 第50-52页 |
| 4.8 讨论 | 第52-53页 |
| 4.9 本章小结 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 附录一 | 第60-61页 |
| 附录二 | 第61-62页 |
| 附录三 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
