| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第11-22页 |
| 1.1 卵母细胞的体外成熟 | 第11-18页 |
| 1.1.1 体外成熟的标志 | 第12页 |
| 1.1.2 影响体外成熟的因素 | 第12-18页 |
| 1.1.2.1 基础培养液 | 第12-13页 |
| 1.1.2.2 激素 | 第13-14页 |
| 1.1.2.3 生长因子 | 第14-15页 |
| 1.1.2.4 蛋白添加物 | 第15-16页 |
| 1.1.2.5 卵泡细胞 | 第16-17页 |
| 1.1.2.6 卵泡大小和卵母细胞形态 | 第17-18页 |
| 1.2 体外受精 | 第18-19页 |
| 1.2.1 精子洗涤 | 第18-19页 |
| 1.2.2 精子获能 | 第19页 |
| 1.2.3 受精液 | 第19页 |
| 1.3 早期胚胎的体外培养 | 第19-20页 |
| 1.4 整合素ɑ6β1 在精卵结合中的研究 | 第20页 |
| 1.5 Laminin在干细胞及胚胎中的研究 | 第20-22页 |
| 1.6 牛囊胚的简易双重染色 | 第22页 |
| 2.引言 | 第22-23页 |
| 3.材料与方法 | 第23-29页 |
| 3.1 试验材料 | 第23-25页 |
| 3.1.1 主要仪器及设备 | 第23页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 3.1.3 主要试剂的配置 | 第24-25页 |
| 3.2 试验方法 | 第25-27页 |
| 3.2.1 卵母细胞的采集 | 第25页 |
| 3.2.2 卵丘细胞的制备 | 第25页 |
| 3.2.3 体外成熟培养 | 第25页 |
| 3.2.4 体外受精 | 第25页 |
| 3.2.5 胚胎的体外培养 | 第25-26页 |
| 3.2.6 囊胚细胞数染色及双重染色 | 第26页 |
| 3.2.7 laminin在早期胚胎发育过程中的表达分布检测 | 第26-27页 |
| 3.3 试验设计与统计分析 | 第27-29页 |
| 3.3.1 卵母细胞体外成熟的设计 | 第27页 |
| 3.3.2 成熟卵母细胞体外受精试验的设计 | 第27页 |
| 3.3.3 laminin与anti-β1 对精卵融合影响试验的设计 | 第27-28页 |
| 3.3.4 早期胚胎体外培养试验的设计 | 第28页 |
| 3.3.5 囊胚差异染色试验设计 | 第28-29页 |
| 3.3.6 统计分析 | 第29页 |
| 4 结果与分析 | 第29-47页 |
| 4.1 卵丘细胞对卵母细胞体外成熟影响的研究结果 | 第29-32页 |
| 4.1.1 胞外卵丘细胞对卵母细胞体外成熟的影响 | 第29-30页 |
| 4.1.2 添加的离散卵丘细胞对卵母细胞体外成熟的影响 | 第30页 |
| 4.1.3 卵丘细胞在卵母细胞体外成熟中的作用途径及作用强度的分析 | 第30-32页 |
| 4.2 成熟卵母细胞体外受精的研究结果 | 第32页 |
| 4.2.1 不同受精液对卵母细胞受精后体外发育的影响 | 第32页 |
| 4.2.2 有无卵丘细胞对卵母细胞受精及受精后体外发育的影响 | 第32页 |
| 4.3 整合素β1 在精卵融合中的作用 | 第32-37页 |
| 4.3.1 laminin与卵子共孵化后对受精及卵裂的影响 | 第32-33页 |
| 4.3.2 laminin与精子子共孵化后对受精及卵裂的影响 | 第33-34页 |
| 4.3.3 laminin分别与精子和卵子共孵化后对受精及卵裂的影响 | 第34页 |
| 4.3.4 laminin在整个受精过程中对受精及卵裂的影响 | 第34-35页 |
| 4.3.5 anti-β1 与卵子共孵化后对受精及卵裂的影响 | 第35-36页 |
| 4.3.6 anti-β1 与精子共孵化后对受精及卵裂的影响 | 第36页 |
| 4.3.7 anti-β1 分别与精子和卵子共孵化后对受精及卵裂的影响 | 第36-37页 |
| 4.3.8 anti-β1 在整个受精过程中对受精及卵裂的影响 | 第37页 |
| 4.4 早期胚胎体外发育过程中层粘连蛋白的表达分布研究结果 | 第37-39页 |
| 4.5 不同laminin添加浓度对体外受精胚胎体外发育的研究结果 | 第39-42页 |
| 4.5.1 laminin对牛体外受精卵卵裂速度与卵裂率的影响 | 第39-40页 |
| 4.5.2 laminin对牛受精卵囊胚率的影响 | 第40页 |
| 4.5.3 laminin对牛囊胚细胞数的影响 | 第40-42页 |
| 4.6 牛囊胚简易快速的双重染色研究结果 | 第42-47页 |
| 4.6.1 方案一牛囊胚双重染色结果 | 第42-44页 |
| 4.6.2 方案二牛囊胚双重染色结果 | 第44-45页 |
| 4.6.3 方案三牛囊胚双重染色结果 | 第45-46页 |
| 4.6.4 方案四牛囊胚双重染色结果 | 第46-47页 |
| 5 讨论与结论 | 第47-55页 |
| 5.1 卵丘细胞对卵母细胞体外成熟的影响 | 第47-50页 |
| 5.1.1 外围卵丘细胞对卵母细胞体外成熟的影响 | 第47-48页 |
| 5.1.2 添加离散卵丘细胞对卵母细胞体外成熟的影响 | 第48页 |
| 5.1.3 卵丘细胞在卵母细胞体外成熟中的作用途径及作用强度的分析 | 第48-50页 |
| 5.2 不同受精液及有无卵丘细胞对成熟卵母细胞体外受精结果的影响 | 第50-51页 |
| 5.3 整合素 β1 在精卵融合中的作用 | 第51-52页 |
| 5.4 早期胚胎层粘连蛋白的表达分布及外源性层粘连蛋白对牛体外受精胚胎体外发育的影响 | 第52-53页 |
| 5.5 双重染色方法在牛囊胚质量评定上的作用 | 第53-54页 |
| 5.6 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-65页 |
