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猪圆环病毒2型(PCV2)不同基因亚型间混合感染及进化的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 绪论第11-24页
    1.1 猪圆环病毒病原学历史第11-12页
    1.2 猪圆环病毒的生物学特性与致病性第12-18页
        1.2.1 猪圆环病毒的形态结构与理化性质第12-13页
        1.2.2 猪圆环病毒的分型第13页
        1.2.3 猪圆环病毒2型的基因组结构第13-15页
        1.2.4 猪圆环病毒2型的发病机制第15-16页
        1.2.5 猪圆环病毒的易感宿主第16页
        1.2.6 猪圆环病毒的传播途径第16-17页
        1.2.7 猪圆环病毒的危害第17-18页
        1.2.8 猪圆环病毒的疫苗研究第18页
    1.3 猪圆环病毒的检测方法第18-22页
        1.3.1 酶联免疫吸附试验(ELISA)第19-20页
        1.3.2 间接免疫荧光试验(IFA)第20页
        1.3.3 免疫组织化学检测(IHC)第20-21页
        1.3.4 免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)第21页
        1.3.5 聚合酶链式反应(PCR)第21-22页
        1.3.6 原位核酸杂交试验(ISH)第22页
    1.4 本研究目的与意义第22-24页
第二章 PCV2不同基因型间混合感染的研究第24-37页
    2.1 材料与方法第24-26页
        2.1.1 菌株、载体及病料第24页
        2.1.2 酶及其他主要试剂第24-25页
        2.1.3 主要试剂配置及制备第25-26页
        2.1.4 主要仪器设备第26页
    2.2 实验方法第26-30页
        2.2.1 引物设计第26-27页
        2.2.2 组织病料的总DNA提取第27页
        2.2.3 质粒构建与提取第27-30页
            2.2.3.1 PCR 扩增第27-28页
            2.2.3.2 胶回收纯化DNA第28-30页
        2.2.4 PCV2的基因组序列分析第30页
    2.3 实验结果第30-35页
        2.3.1 酶切验证重组质粒第30-31页
        2.3.2 测序结果整理分析第31-33页
        2.3.3 测序结果进化树分析第33-34页
        2.3.4 PCV2进化分析第34-35页
    2.4 讨论第35-37页
第三章 PCV2ORF1提前终止对病毒复制影响的研究第37-51页
    3.1 材料与方法第37-39页
        3.1.1 菌株、载体及构建模板等第37页
        3.1.2 酶及其他试剂第37-38页
        3.1.3 主要试剂配置及制备第38页
        3.1.4 主要仪器设备第38-39页
    3.2 实验方法第39-45页
        3.2.1 引物设计第39-40页
        3.2.2 PK-15细胞复苏第40页
        3.2.3 重组质粒的构建第40-43页
            3.2.3.1 PCR 扩增第40-41页
            3.2.3.2 胶回收纯化DNA第41-43页
        3.2.4 重组质粒转染PK-15细胞第43-44页
        3.2.5 病毒拷贝数的测定第44页
        3.2.6 病毒的简介免疫荧光(IFA)检测第44-45页
    3.3 实验结果第45-49页
        3.3.1 酶切验证重组质粒第45-46页
        3.3.2 病毒拷贝数的测定结果第46-47页
        3.3.3 间接免疫荧光(IFA)检测结果第47-49页
        3.3.4 病毒全基因组克隆测序第49页
    3.4 讨论第49-51页
第四章 结论第51-52页
参考文献第52-60页
致谢第60-61页
作者简历第61页

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