摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-24页 |
1.1 猪圆环病毒病原学历史 | 第11-12页 |
1.2 猪圆环病毒的生物学特性与致病性 | 第12-18页 |
1.2.1 猪圆环病毒的形态结构与理化性质 | 第12-13页 |
1.2.2 猪圆环病毒的分型 | 第13页 |
1.2.3 猪圆环病毒2型的基因组结构 | 第13-15页 |
1.2.4 猪圆环病毒2型的发病机制 | 第15-16页 |
1.2.5 猪圆环病毒的易感宿主 | 第16页 |
1.2.6 猪圆环病毒的传播途径 | 第16-17页 |
1.2.7 猪圆环病毒的危害 | 第17-18页 |
1.2.8 猪圆环病毒的疫苗研究 | 第18页 |
1.3 猪圆环病毒的检测方法 | 第18-22页 |
1.3.1 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第19-20页 |
1.3.2 间接免疫荧光试验(IFA) | 第20页 |
1.3.3 免疫组织化学检测(IHC) | 第20-21页 |
1.3.4 免疫过氧化物酶单层试验(IPMA) | 第21页 |
1.3.5 聚合酶链式反应(PCR) | 第21-22页 |
1.3.6 原位核酸杂交试验(ISH) | 第22页 |
1.4 本研究目的与意义 | 第22-24页 |
第二章 PCV2不同基因型间混合感染的研究 | 第24-37页 |
2.1 材料与方法 | 第24-26页 |
2.1.1 菌株、载体及病料 | 第24页 |
2.1.2 酶及其他主要试剂 | 第24-25页 |
2.1.3 主要试剂配置及制备 | 第25-26页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-30页 |
2.2.1 引物设计 | 第26-27页 |
2.2.2 组织病料的总DNA提取 | 第27页 |
2.2.3 质粒构建与提取 | 第27-30页 |
2.2.3.1 PCR 扩增 | 第27-28页 |
2.2.3.2 胶回收纯化DNA | 第28-30页 |
2.2.4 PCV2的基因组序列分析 | 第30页 |
2.3 实验结果 | 第30-35页 |
2.3.1 酶切验证重组质粒 | 第30-31页 |
2.3.2 测序结果整理分析 | 第31-33页 |
2.3.3 测序结果进化树分析 | 第33-34页 |
2.3.4 PCV2进化分析 | 第34-35页 |
2.4 讨论 | 第35-37页 |
第三章 PCV2ORF1提前终止对病毒复制影响的研究 | 第37-51页 |
3.1 材料与方法 | 第37-39页 |
3.1.1 菌株、载体及构建模板等 | 第37页 |
3.1.2 酶及其他试剂 | 第37-38页 |
3.1.3 主要试剂配置及制备 | 第38页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第38-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-45页 |
3.2.1 引物设计 | 第39-40页 |
3.2.2 PK-15细胞复苏 | 第40页 |
3.2.3 重组质粒的构建 | 第40-43页 |
3.2.3.1 PCR 扩增 | 第40-41页 |
3.2.3.2 胶回收纯化DNA | 第41-43页 |
3.2.4 重组质粒转染PK-15细胞 | 第43-44页 |
3.2.5 病毒拷贝数的测定 | 第44页 |
3.2.6 病毒的简介免疫荧光(IFA)检测 | 第44-45页 |
3.3 实验结果 | 第45-49页 |
3.3.1 酶切验证重组质粒 | 第45-46页 |
3.3.2 病毒拷贝数的测定结果 | 第46-47页 |
3.3.3 间接免疫荧光(IFA)检测结果 | 第47-49页 |
3.3.4 病毒全基因组克隆测序 | 第49页 |
3.4 讨论 | 第49-51页 |
第四章 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简历 | 第61页 |