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替诺福韦酯致PC12细胞损伤及其机制研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
前言第11-13页
1 材料、试剂和仪器第13-19页
    1.1 实验细胞株第13页
    1.2 试剂第13-14页
    1.3 仪器设备第14-15页
    1.4 试剂配制第15-19页
        1.4.1 DMEM细胞培养基第15页
        1.4.2 磷酸盐缓冲液(Phosphate buffer solution,PBS)第15页
        1.4.3 MTT工作液第15页
        1.4.4 胰酶储备液第15页
        1.4.5 胰酶工作液第15页
        1.4.6 多聚赖氨酸工作液(PLL)第15-16页
        1.4.7 PMSF配制第16页
        1.4.8 考马斯亮蓝G250溶液第16页
        1.4.9 SDS-PAGE蛋白上样缓冲液第16页
        1.4.10 10×电泳缓冲液第16页
        1.4.11 1×转移缓冲液第16页
        1.4.12 10×丽春红染液第16页
        1.4.13 洗脱抗体缓冲液第16-17页
        1.4.14 10×TBS缓冲液第17页
        1.4.15 1×TBST缓冲液第17页
        1.4.16 封闭缓冲液(5%的脱脂奶粉)第17-19页
2 实验方法第19-25页
    2.1 PC12细胞培养第19页
    2.2 MTT比色法检测替诺福韦酯对PC12细胞存活率的影响第19页
    2.3 酶标法检测细胞培养液LDH的变化第19页
    2.4 Hoechst-33342染色观察细胞核形态的变化第19-20页
    2.5 TUNEL法检测细胞凋亡率第20页
    2.6 Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡率第20页
    2.7 高内涵成像系统检测PC12细胞内ROS的含量第20页
    2.8 酶标法检测PC12细胞内丙二醛的含量第20-21页
    2.9 Western-blot检测PC12细胞Bax的表达第21-23页
        2.9.1 细胞总蛋白的提取第21页
        2.9.2 BCA试剂盒定量检测细胞总蛋白浓度第21-22页
        2.9.3 蛋白变性第22页
        2.9.4 Western-blot检测第22-23页
    2.10 统计学处理第23-25页
3 实验结果第25-33页
    3.1 替诺福韦酯对PC12细胞增殖的影响第25页
    3.2 LDH法检测替诺福韦酯对PC12细胞的损伤作用第25-26页
    3.3 替诺福韦酯对PC12细胞核形态的影响第26-27页
    3.4 Tunel法观察替诺福韦酯对PC12细胞凋亡率的影响第27-28页
    3.5 Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测替诺福韦酯对PC12细胞凋亡的影响第28-29页
    3.6 PC12细胞内ROS含量测定第29-30页
    3.7 PC12细胞内丙二醛含量测定第30页
    3.8 替诺福韦酯对PC12细胞凋亡蛋白Bax表达的影响第30-33页
4 讨论第33-35页
5 结论第35-37页
参考文献第37-39页
文献综述第39-49页
    参考文献第45-49页
附录第49-51页
致谢第51-53页
攻读学位期间发表的学术论文第53-54页

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