摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
缩略词 | 第5-10页 |
第一章 引言 | 第10-24页 |
1.1 矿质元素对植物生长发育和抗病性的影响 | 第10-13页 |
1.1.1 矿质元素对植物生长的影响 | 第10-11页 |
1.1.2 矿质元素对果实发育成熟的影响 | 第11页 |
1.1.3 矿质营养与植物抗病性 | 第11-13页 |
1.2 钾在果实发育成熟及品质形成中的作用机理 | 第13-14页 |
1.2.1 钾在果实发育成熟中的作用机理 | 第13页 |
1.2.2 钾在果实品质形成中的作用机理 | 第13-14页 |
1.3 植物液泡在植物生长发育及果实成熟中的作用 | 第14-15页 |
1.3.1 植物液泡在植物生长发育中的作用 | 第14页 |
1.3.2 植物液泡在果实成熟中的作用 | 第14-15页 |
1.4 植物钾离子通道及转运体研究进展 | 第15-19页 |
1.4.1 Shaker家族钾离子通道 | 第16页 |
1.4.2 TPK家族和Kir-like家族 | 第16-18页 |
1.4.3 钾离子转运蛋白 | 第18-19页 |
1.5 蛋白外源表达 | 第19-22页 |
1.5.1 大肠杆菌表达系统 | 第19-20页 |
1.5.2 酵母表达系统 | 第20页 |
1.5.3 昆虫表达系统 | 第20-21页 |
1.5.4 哺乳动物表达系统 | 第21页 |
1.5.5 植物表达系统 | 第21页 |
1.5.6 无细胞表达体系 | 第21-22页 |
1.6 研究目的与意义 | 第22-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-46页 |
2.1 试验材料 | 第24页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 载体与菌株 | 第24页 |
2.2 试验试剂及配置 | 第24-27页 |
2.2.1 试验试剂 | 第24页 |
2.2.2 培养基的配制 | 第24-25页 |
2.2.3 溶液配置 | 第25-27页 |
2.3 试验仪器 | 第27页 |
2.4 试验方法 | 第27-46页 |
2.4.1 草莓RNA转录组测序 | 第27页 |
2.4.2 基因的克隆与序列测定及比对 | 第27-29页 |
2.4.3 半定量(SqRT-PCR)和荧光定量(qRT-PCR)分析基因表达量 | 第29-31页 |
2.4.4 果实圆片温育试验 | 第31页 |
2.4.5 瞬时表达载体的构建与转化试验 | 第31-35页 |
2.4.6 草莓果实瞬时侵染试验 | 第35页 |
2.4.7 蛋白的表达纯化及检测 | 第35-41页 |
2.4.8 等温滴定量热法(iTC) | 第41页 |
2.4.9 洋葱表皮细胞亚细胞定位 | 第41-42页 |
2.4.10 矿质元素含量的测定 | 第42页 |
2.4.11 糖、花色苷及ABA含量的测定 | 第42-43页 |
2.4.12 草莓灰霉病原菌侵染试验 | 第43页 |
2.4.13 大肠杆菌突变菌株LB2003钾吸收试验 | 第43-46页 |
第三章 结果与分析 | 第46-64页 |
3.1 草莓果实钾离子通道和运载体基因的转录组分析 | 第46-48页 |
3.1.1 钾离子通道(channel)和转运体(transporter)基因的转录分析 | 第46-47页 |
3.1.2 草莓FaTPK1的表达分析 | 第47-48页 |
3.2 '甜查理'草莓果实中FaTPK1的克隆、表达分析及亚细胞定位 | 第48-51页 |
3.2.1 FaTPK1的克隆及圆片温育试验 | 第48-50页 |
3.2.2 FaTPK1洋葱表皮亚细胞定位 | 第50-51页 |
3.3 FaTPK1在草莓果实发育和成熟过程中的功能分析 | 第51-60页 |
3.3.1 草莓7个果实发育时期矿质元素(7种)含量测定 | 第51-52页 |
3.3.2 草莓7个果实发育时期可溶性糖及花色苷含量的测定 | 第52-53页 |
3.3.3 FaTPK1基因的沉默与超表达 | 第53-56页 |
3.3.4 转基因草莓果实成熟相关基因表达分析 | 第56-57页 |
3.3.5 转基因草莓果实生理指标分析 | 第57-58页 |
3.3.6 转基因草莓果实对病原菌(Botrytis cinerea)敏感性检测 | 第58-60页 |
3.4 FaTPK1蛋白的表达纯化及功能研究 | 第60-61页 |
3.4.1 FaTPK1蛋白的表达纯化 | 第60页 |
3.4.2 FaTPK1蛋白活性测定 | 第60-61页 |
3.5 FaTPK1对大肠杆菌钾吸收突变菌株LB2003的钾吸收试验 | 第61-63页 |
3.6 FaTPK1基因的下调和过表达改变了ABA含量 | 第63-64页 |
第四章 讨论 | 第64-68页 |
4.1 FaTPK1参与草莓果实成熟调控及品质形成 | 第64-65页 |
4.2 FaTPK1转基因草莓对病原真菌敏感性的分析 | 第65页 |
4.3 FaTPK1钾吸收能力分析 | 第65-68页 |
第五章 结论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-86页 |
致谢 | 第86-88页 |
个人简历 | 第88页 |