摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
1.1 水稻二化螟和二化螟盘绒茧蜂概况 | 第12-13页 |
1.1.1 水稻二化螟概况 | 第12页 |
1.1.2 二化螟盘绒茧蜂概况 | 第12-13页 |
1.2 寄生蜂对寄主的调控机制 | 第13-15页 |
1.3 昆虫热激蛋白研究进展 | 第15-18页 |
1.3.1 热激蛋白简介 | 第15页 |
1.3.2 HSP70研究进展 | 第15-16页 |
1.3.3 sHSPs研究进展 | 第16-17页 |
1.3.4 热激蛋白与昆虫温度耐受性的关系 | 第17-18页 |
1.4 转录组测序技术及其应用 | 第18-19页 |
1.5 基因表达研究中内参基因的筛选 | 第19-20页 |
1.6 研究意义和主要内容 | 第20-21页 |
1.6.1 本论文的研究意义 | 第20页 |
1.6.2 本论文主要研究内容 | 第20-21页 |
第二章 寄生与未寄生二化螟的转录组比较分析 | 第21-36页 |
2.1 材料与方法 | 第21-23页 |
2.1.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.2 二化螟幼虫转录组测序流程 | 第21页 |
2.1.3 数据分析 | 第21-23页 |
2.2 结果与分析 | 第23-34页 |
2.2.1 二化螟幼虫样本文库构建及质检 | 第23-24页 |
2.2.2 二化螟幼虫转录组测序数据分析 | 第24-32页 |
2.2.2.1 序列质量评估 | 第24-25页 |
2.2.2.2 数据预处理 | 第25页 |
2.2.2.3 转录本组装 | 第25-26页 |
2.2.2.4 基因功能注释 | 第26-32页 |
2.2.3 差异表达基因分析 | 第32-34页 |
2.3 小结与讨论 | 第34-36页 |
第三章 二化螟寄生相关热激蛋白基因的克隆与分析 | 第36-48页 |
3.1 实验材料 | 第36页 |
3.1.1 供试虫源 | 第36页 |
3.1.2 实验试剂 | 第36页 |
3.2 实验方法 | 第36-41页 |
3.2.1 总RNA提取 | 第36-37页 |
3.2.2 cDNA第一条链合成 | 第37页 |
3.2.3 水稻二化螟3条hsps片段的获得、回收纯化及克隆 | 第37-39页 |
3.2.3.1 水稻二化螟3条hsps片段的获得 | 第37-38页 |
3.2.3.2 水稻二化螟3条hsps片段的回收纯化 | 第38-39页 |
3.2.3.3 水稻二化螟3条hsps片段的克隆 | 第39页 |
3.2.4 水稻二化螟3条hsps片段的5'和3'RACE片段的获得 | 第39-40页 |
3.2.4.1 5'和3'RACE引物的设计 | 第39页 |
3.2.4.2 5'和3'RACE PCR扩增 | 第39-40页 |
3.2.4.3 5'和3'RACE PCR扩增 | 第40页 |
3.2.5 二化螟hsp21.7c的基因组扩增 | 第40-41页 |
3.2.6 二化螟3条HSP基因的生物信息学分析 | 第41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-46页 |
3.3.1 二化螟3条hsps的序列特征分析 | 第41-43页 |
3.3.2 系统发育分析 | 第43-46页 |
3.4 小结与讨论 | 第46-48页 |
第四章 二化螟盘绒茧蜂寄生胁迫下二化螟内参基因的筛选与验证 | 第48-55页 |
4.1 材料与方法 | 第48-50页 |
4.1.1 供试虫源 | 第48页 |
4.1.2 实验方法 | 第48页 |
4.1.3 实时定量的cDNA的合成 | 第48-49页 |
4.1.4 水稻二化螟候选内参基因实时定量分析 | 第49页 |
4.1.5 数据处理 | 第49-50页 |
4.2 结果与分析 | 第50-53页 |
4.2.1 总RNA的含量和PCR扩增效率 | 第50-51页 |
4.2.2 候选内参基因的表达情况 | 第51页 |
4.2.3 候选内参基因表达稳定性分析 | 第51-53页 |
4.2.4 内参基因稳定性验证 | 第53页 |
4.3 小结与讨论 | 第53-55页 |
第五章 二化螟四条HSPs基因在二化螟盘绒茧蜂寄生胁迫下的表达规律 | 第55-59页 |
5.1 材料与方法 | 第55-56页 |
5.1.1 供试虫源 | 第55页 |
5.1.2 实验方法 | 第55页 |
5.1.3 实时定量的cDNA的合成 | 第55页 |
5.1.4 实时定量引物的设计与合成 | 第55-56页 |
5.1.5 二化螟4条hsps实时定量分析 | 第56页 |
5.1.6 数据分析 | 第56页 |
5.2 结果与分析 | 第56-58页 |
5.2.1 二化螟hsps在寄生胁迫下的表达模式 | 第56-57页 |
5.2.2 转录组测序数据与qPCR数据比较 | 第57-58页 |
5.3 小结与讨论 | 第58-59页 |
第六章 二化螟HSPs基因在温度胁迫下的表达模式 | 第59-63页 |
6.1 材料与方法 | 第59-60页 |
6.1.1 供试虫源 | 第59页 |
6.1.2 温度处理 | 第59页 |
6.1.3 RNA提取及第一链cDNA的合成 | 第59-60页 |
6.1.4 引物的设计与合成 | 第60页 |
6.1.5 实时定量分析 | 第60页 |
6.1.6 数据处理 | 第60页 |
6.2 结果分析 | 第60-61页 |
6.3 小结与讨论 | 第61-63页 |
参考文献(Reference) | 第63-78页 |
附录 | 第78-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第82-83页 |