| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 引言 | 第10-22页 |
| 1.1 肝癌 | 第10-13页 |
| 1.1.1 肝癌的发生 | 第10-11页 |
| 1.1.2 肝癌的研究现状 | 第11-13页 |
| 1.2 CDK4与肿瘤 | 第13-15页 |
| 1.2.1 CDK4的基本生物学特征 | 第13页 |
| 1.2.2 CDK4在细胞周期调控中的作用 | 第13页 |
| 1.2.3 CDK4的调节活性 | 第13-15页 |
| 1.3 CDK4与肝癌 | 第15-18页 |
| 1.3.1 CDK4与肿瘤的发生 | 第15-16页 |
| 1.3.2 以CDK4为靶点的肿瘤治疗 | 第16-17页 |
| 1.3.3 CDK4与肝癌的发生 | 第17-18页 |
| 1.4 胞内抗体 | 第18-20页 |
| 1.4.1 胞内抗体的功能 | 第18-19页 |
| 1.4.2 胞内抗体的应用 | 第19-20页 |
| 1.5 本文的立题目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第22-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-27页 |
| 2.1.1 细胞株及质粒 | 第22页 |
| 2.1.2 引物 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要试剂和溶液 | 第23-24页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第24-26页 |
| 2.1.5 实验所使用的仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-38页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第27页 |
| 2.2.2 去内毒素质粒提取 | 第27-28页 |
| 2.2.3 PEI介导的HepG2细胞转染 | 第28-29页 |
| 2.2.4 RT-PCR检测 | 第29-30页 |
| 2.2.5 Westernblot分析NLS-AK的表达 | 第30-31页 |
| 2.2.6 间接免疫荧光分析 | 第31-32页 |
| 2.2.7 Co-IP分析 | 第32页 |
| 2.2.8 MTT分析细胞增殖 | 第32-33页 |
| 2.2.9 流式细胞仪分析细胞周期 | 第33页 |
| 2.2.10 流式细胞仪分析细胞凋亡 | 第33-34页 |
| 2.2.11 肿瘤细胞的迁移实验 | 第34页 |
| 2.2.12 肝癌裸鼠动物模型的建立 | 第34-35页 |
| 2.2.13 肝癌裸鼠动物模型的治疗实验 | 第35页 |
| 2.2.14 Q-PCR检测目的基因的表达 | 第35-37页 |
| 2.2.15 统计学分析 | 第37-38页 |
| 第三章 实验结果 | 第38-50页 |
| 3.1 NLS-AK在肿瘤细胞中的表达分析 | 第38-39页 |
| 3.1.1 RT-PCR检测目的基因的表达 | 第38-39页 |
| 3.1.2 Western-blot检测目的基因的表达 | 第39页 |
| 3.2 NLS-AK在细胞内表达及定位 | 第39-40页 |
| 3.3 NLS-AK特异性结合HepG2细胞内源性CDK | 第40-41页 |
| 3.4 NLS-AK抑制HepG2细胞的生长和增殖 | 第41-42页 |
| 3.5 NLS-AK引起HepG2细胞的细胞周期G1期阻滞 | 第42-43页 |
| 3.6 NLS-AK促使HepG2细胞凋亡 | 第43-44页 |
| 3.7 NLS-AK抑制HepG2细胞迁移 | 第44-45页 |
| 3.8 NLS-AK对肝癌裸鼠动物模型治疗效果的评价 | 第45-48页 |
| 3.8.1 NLS-AK抑制裸鼠的异体移植瘤生长 | 第46页 |
| 3.8.2 HE染色病理学观察分析 | 第46-48页 |
| 3.9 NLS-AK对HepG2细胞肿瘤相关因子mRNA水平的影响 | 第48-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 以CDK4为靶点的肝癌治疗策略 | 第50-51页 |
| 4.2 抗CDK4胞内抗体发挥抑瘤效应可能的分子机制 | 第51-53页 |
| 第五章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 作者简介 | 第60-61页 |
| 攻读硕士期间科研成果 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
