| 内容提要 | 第1-6页 |
| 英文缩写词 | 第6-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-24页 |
| ·基因治疗的研究现状及发展前景 | 第11-12页 |
| ·基因治疗的概念 | 第11页 |
| ·基因治疗的研究现状 | 第11-12页 |
| ·基因治疗的发展前景 | 第12页 |
| ·肝癌的基因治疗 | 第12-14页 |
| ·抑癌基因治疗 | 第13页 |
| ·反义基因治疗 | 第13页 |
| ·RNA干扰技术 | 第13页 |
| ·自杀基因治疗 | 第13-14页 |
| ·免疫基因治疗 | 第14页 |
| ·抗血管生成基因治疗 | 第14页 |
| ·多药耐药基因治疗 | 第14页 |
| ·TRAIL与肝癌 | 第14-20页 |
| ·TRAIL的生物学特性 | 第15-16页 |
| ·TRAIL的受体 | 第16-18页 |
| ·TRAIL诱导凋亡的机制 | 第18-19页 |
| ·TRAIL在肝癌治疗方面的价值 | 第19-20页 |
| ·TRAIL 在肿瘤治疗方面存在的问题 | 第20页 |
| ·hTERT与肝癌 | 第20-23页 |
| ·端粒 | 第20-21页 |
| ·端粒酶 | 第21页 |
| ·端粒酶逆转录酶 | 第21-22页 |
| ·hTERT在肝癌治疗中的应用 | 第22-23页 |
| ·展望 | 第23-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-38页 |
| ·实验材料 | 第24-27页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·器材 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·质粒与菌株 | 第26页 |
| ·细胞株 | 第26-27页 |
| ·细胞生物学实验方法 | 第27-29页 |
| ·培养液配制 | 第27页 |
| ·胎牛血清制备 | 第27页 |
| ·D-Hank's 液的配制 | 第27页 |
| ·胰酶的配制 | 第27-28页 |
| ·细胞培养 | 第28页 |
| ·细胞冻存 | 第28页 |
| ·细胞复苏 | 第28页 |
| ·细胞转染 | 第28页 |
| ·细胞增殖检测 | 第28页 |
| ·PI单染法检测细胞周期 | 第28-29页 |
| ·Annexin Ⅴ-EGFP/PI双染法检测细胞凋亡 | 第29页 |
| ·分光光度法检测caspase-3 蛋白的表达 | 第29页 |
| ·分子生物学实验方法 | 第29-37页 |
| ·细菌培养技术 | 第29-32页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第32-37页 |
| ·统计学分析 | 第37-38页 |
| 第3章 实验结果 | 第38-70页 |
| ·重组质粒的构建及鉴定 | 第38-43页 |
| ·目的基因的获得 | 第38-40页 |
| ·载体的构建及鉴定 | 第40-43页 |
| ·重组质粒对人肝癌细胞株SMMC7721 和人正常肝细胞株HL7702 的转染效率的研究 | 第43-44页 |
| ·重组质粒对人肝癌细胞株SMMC7721 和人正常肝细胞株HL7702 增殖的影响 | 第44-46页 |
| ·重组质粒对人肝癌细胞株SMMC7721 和人正常肝细胞株HL7702 细胞凋亡的影响 | 第46-49页 |
| ·重组质粒对人肝癌细胞株SMMC7721 和人正常肝细胞株HL7702 细胞周期的影响 | 第49-53页 |
| ·重组质粒对人肝癌细胞株SMMC7721 和人正常肝细胞株HL7702 TRAIL蛋白表达的时程变化 | 第53-54页 |
| ·重组质粒对人肝癌细胞株SMMC7721 和人正常肝细胞株HL7702 caspase 3 蛋白表达的影响 | 第54-56页 |
| ·重组质粒对人肝癌细胞株SMMC7721 和人正常肝细胞株HL7702 mRNA表达的时程变化 | 第56-70页 |
| ·标准曲线 | 第56-59页 |
| ·GAPDH mRNA的表达 | 第59-61页 |
| ·TRAIL基因mRNA的表达 | 第61-65页 |
| ·DR5 基因mRNA的表达 | 第65-70页 |
| 第4章 讨论 | 第70-77页 |
| ·实验设计的可行性分析 | 第70-71页 |
| ·目的基因的克隆及重组质粒的构建 | 第71-72页 |
| ·hTERT启动子的克隆 | 第71页 |
| ·TRAIL基因的克隆 | 第71-72页 |
| ·肿瘤靶向重组质粒的构建 | 第72页 |
| ·重组质粒对人肝癌细胞 SMMC7721 和人正常细胞HL7702 的生物学行为影响 | 第72-74页 |
| ·重组质粒对细胞增殖的影响 | 第72-73页 |
| ·重组质粒对细胞凋亡的影响 | 第73页 |
| ·重组质粒对细胞周期的影响 | 第73-74页 |
| ·重组质粒诱导细胞凋亡的机制探讨 | 第74-77页 |
| ·重组质粒对TRAIL蛋白表达的影响 | 第74页 |
| ·重组质粒对caspase 3 蛋白表达的影响 | 第74-75页 |
| ·重组质粒对基因mRNA表达的影响 | 第75-77页 |
| 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 中文摘要 | 第87-90页 |
| Abstract | 第90-93页 |
