| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 主要符号对照表 | 第10-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-24页 |
| 1.1 AAV概述 | 第12-19页 |
| 1.1.1 AAV的基本生物学特征 | 第12-14页 |
| 1.1.2 AAV的生活周期 | 第14-17页 |
| 1.1.3 rAAV转导研究现状 | 第17-19页 |
| 1.2 课题来源及意义 | 第19-21页 |
| 1.3 主要研究内容及方法 | 第21-24页 |
| 1.3.1 主要研究内容 | 第22页 |
| 1.3.2 主要研究方法 | 第22-24页 |
| 第2章 rAAV的制备 | 第24-35页 |
| 2.1 实验材料、试剂及仪器 | 第24-28页 |
| 2.1.1 实验试剂及材料 | 第24-25页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第25页 |
| 2.1.3 常用试剂配置 | 第25-28页 |
| 2.2 试验方法 | 第28-32页 |
| 2.2.1 磷酸钙沉淀转染法 | 第28-29页 |
| 2.2.2 细胞裂解 | 第29页 |
| 2.2.3 CsCl梯度离心 | 第29页 |
| 2.2.4 免疫印迹试验(Westernblot) | 第29-30页 |
| 2.2.5 银染实验 | 第30-31页 |
| 2.2.6 QuantitativeReal-timePCR测定病毒滴度 | 第31页 |
| 2.2.7 病毒活性检测 | 第31-32页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第32-34页 |
| 2.3.1 rAAV纯度检测 | 第32-33页 |
| 2.3.2 rAAV滴度测定 | 第33页 |
| 2.3.3 rAAV活性检测 | 第33-34页 |
| 2.4 本章小结 | 第34-35页 |
| 第3章 促进rAAV转导的天然药物成分的筛选 | 第35-64页 |
| 3.1 实验材料、试剂及仪器 | 第35-37页 |
| 3.1.1 实验试剂及材料 | 第35页 |
| 3.1.2 主要实验仪器 | 第35-36页 |
| 3.1.3 常用试剂配置 | 第36-37页 |
| 3.2 试验方法 | 第37-43页 |
| 3.2.1 中药成分选取 | 第37页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第37页 |
| 3.2.3 细胞活力实验 | 第37-38页 |
| 3.2.4 量效关系评价 | 第38页 |
| 3.2.5 时效关系评价 | 第38-39页 |
| 3.2.6 rAAV感染HEK293细胞MOI值的确定 | 第39页 |
| 3.2.7 细胞内病毒全基因组提取 | 第39-40页 |
| 3.2.8 ELISA法检测rAAV2-Kal蛋白含量 | 第40-42页 |
| 3.2.9 SalB的普适性研究 | 第42-43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-62页 |
| 3.3.1 细胞活力实验 | 第43-44页 |
| 3.3.2 量效关系实验 | 第44-46页 |
| 3.3.3 时效关系实验 | 第46-47页 |
| 3.3.4 rAAV感染HEK293细胞MOI值的确定 | 第47-50页 |
| 3.3.5 细胞内病毒全基因组提取 | 第50-51页 |
| 3.3.6 SalB促rAAV转导的普适性探究 | 第51-62页 |
| 3.4 本章小结 | 第62-64页 |
| 第4章 SalB促进rAAV转导的机制探究 | 第64-80页 |
| 4.1 实验材料、试剂及仪器 | 第64-65页 |
| 4.1.1 实验试剂及材料 | 第64页 |
| 4.1.2 主要实验仪器 | 第64页 |
| 4.1.3 常用试剂配置 | 第64-65页 |
| 4.2 试验方法 | 第65-70页 |
| 4.2.1 细胞周期检测 | 第65-66页 |
| 4.2.2 SalB对单链和自补双链rAAV转导的影响 | 第66页 |
| 4.2.3 rAAV与细胞膜受体的结合 | 第66-67页 |
| 4.2.4 rAAV的摄入 | 第67页 |
| 4.2.5 SalB作用时间探究 | 第67-68页 |
| 4.2.6 QuantitativeReal-timePCR定量病毒全基因组 | 第68页 |
| 4.2.7 免疫荧光实验 | 第68-70页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第70-78页 |
| 4.3.1 SalB对HEK293细胞周期调控作用的影响 | 第70-72页 |
| 4.3.2 SalB对ssrAAV与scrAAV作用的对比 | 第72页 |
| 4.3.3 SalB对rAAV2-Kal与受体结合的影响 | 第72-73页 |
| 4.3.4 SalB对rAAV2-Kal入胞的影响 | 第73-74页 |
| 4.3.5 SalB作用时间探究 | 第74-75页 |
| 4.3.6 rAAV2-Kal在细胞器的分布 | 第75-78页 |
| 4.4 本章小结 | 第78-80页 |
| 总结与展望 | 第80-82页 |
| 主要工作 | 第80页 |
| 主要成果 | 第80-81页 |
| 展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 个人简历、在校期间发表的学术论文和研究成果 | 第90页 |
