摘要 | 第4-9页 |
ABSTRACT | 第9-15页 |
英文缩写词对照表 | 第19-21页 |
前言 | 第21-31页 |
第一章 miRNA-124调控PPP1R13L的表达 | 第31-68页 |
1.1 材料 | 第31-37页 |
1.1.1 实验仪器及耗材 | 第31-32页 |
1.1.2 胶质母细胞瘤组织标本的收集 | 第32页 |
1.1.3 菌种与细胞 | 第32页 |
1.1.4 质粒载体 | 第32-33页 |
1.1.5 工具酶 | 第33页 |
1.1.6 抗体 | 第33-34页 |
1.1.7 主要实验试剂和试剂盒 | 第34-35页 |
1.1.8 溶液配制 | 第35-37页 |
1.2 实验方法 | 第37-54页 |
1.2.1 PPPlR13L基因3’非翻译区域microRNA-124结合位点的预测 | 第37-38页 |
1.2.2 对准备构建进入报告基因载体的PPP1R13L基因3’非翻译区的序列进行分析和引物设计 | 第38-40页 |
1.2.3 组织细胞中RNA的提取及逆转录 | 第40-42页 |
1.2.4 报告基因载体构建 | 第42-47页 |
1.2.5 真核细胞的培养与转染 | 第47-49页 |
1.2.6 Real-Time PCR | 第49-50页 |
1.2.7 双萤光素酶检测实验 | 第50-52页 |
1.2.8 Western blot分析 | 第52-54页 |
1.2.9 统计学分析 | 第54页 |
1.3 结果 | 第54-62页 |
1.3.1 与正常人脑组织相比,microRNA-124在神经胶质母细胞瘤组织和细胞中表达下调 | 第54-56页 |
1.3.2 人PPP1R13L基因是MicroRNA-124潜在的朝基因 | 第56-58页 |
1.3.3 MicroRNA-124在胶质母细胞瘤细胞系U251和U373细胞系中下调了PPP1R13L基因的表达 | 第58-60页 |
1.3.4 功能分析人PPP1R13L基因3’非翻译区潜在的microRNA-124结合位点 | 第60-62页 |
1.4 讨论 | 第62-68页 |
第二章 miRNA-124抑制胶质母细胞瘤增殖和侵润 | 第68-87页 |
2.1 材料 | 第68-69页 |
2.1.1 实验仪器及耗材 | 第68页 |
2.1.2 细胞 | 第68页 |
2.1.3 质粒载体 | 第68页 |
2.1.4 主要实验试剂和试剂盒 | 第68-69页 |
2.1.5 溶液配制 | 第69页 |
2.2 实验方法 | 第69-72页 |
2.2.1 真核细胞的培养与转染 | 第69页 |
2.2.2 MTT检测 | 第69-70页 |
2.2.3 克隆形成实验 | 第70页 |
2.2.4 流式细胞仪检测细胞周期 | 第70-71页 |
2.2.5 细胞侵润实验 | 第71-72页 |
2.2.6 统计学分析 | 第72页 |
2.3 实验结果 | 第72-81页 |
2.3.1 在胶质母细胞瘤细胞系U251和U373中,microRNA-124抑制了PPP1R13L介导的细胞增殖 | 第72-75页 |
2.3.2 在胶质母细胞瘤细胞系U251和U373中,microRNA-124抑制了PPPlR13L介导的细胞周期中G1向S期的转变 | 第75-78页 |
2.3.4 在胶质母细胞瘤细胞系U251和U373中,microRNA-124抑制了PPP1R13L介导的细胞侵润 | 第78-80页 |
2.3.5 在胶质母细胞瘤细胞系U251和U373中,microRNA-124抑制了 MMP-9和MMP-13的表达。 | 第80-81页 |
2.4 讨论 | 第81-87页 |
主要创新点 | 第87-88页 |
结论 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-100页 |
综述 | 第100-130页 |
参考文献 | 第111-130页 |
攻读学位期间主要的学术成绩 | 第130-131页 |
致谢 | 第131页 |