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miRNA-124靶向调控PPP1R13L抑制胶质母细胞瘤增殖和侵润

摘要第4-9页
ABSTRACT第9-15页
英文缩写词对照表第19-21页
前言第21-31页
第一章 miRNA-124调控PPP1R13L的表达第31-68页
    1.1 材料第31-37页
        1.1.1 实验仪器及耗材第31-32页
        1.1.2 胶质母细胞瘤组织标本的收集第32页
        1.1.3 菌种与细胞第32页
        1.1.4 质粒载体第32-33页
        1.1.5 工具酶第33页
        1.1.6 抗体第33-34页
        1.1.7 主要实验试剂和试剂盒第34-35页
        1.1.8 溶液配制第35-37页
    1.2 实验方法第37-54页
        1.2.1 PPPlR13L基因3’非翻译区域microRNA-124结合位点的预测第37-38页
        1.2.2 对准备构建进入报告基因载体的PPP1R13L基因3’非翻译区的序列进行分析和引物设计第38-40页
        1.2.3 组织细胞中RNA的提取及逆转录第40-42页
        1.2.4 报告基因载体构建第42-47页
        1.2.5 真核细胞的培养与转染第47-49页
        1.2.6 Real-Time PCR第49-50页
        1.2.7 双萤光素酶检测实验第50-52页
        1.2.8 Western blot分析第52-54页
        1.2.9 统计学分析第54页
    1.3 结果第54-62页
        1.3.1 与正常人脑组织相比,microRNA-124在神经胶质母细胞瘤组织和细胞中表达下调第54-56页
        1.3.2 人PPP1R13L基因是MicroRNA-124潜在的朝基因第56-58页
        1.3.3 MicroRNA-124在胶质母细胞瘤细胞系U251和U373细胞系中下调了PPP1R13L基因的表达第58-60页
        1.3.4 功能分析人PPP1R13L基因3’非翻译区潜在的microRNA-124结合位点第60-62页
    1.4 讨论第62-68页
第二章 miRNA-124抑制胶质母细胞瘤增殖和侵润第68-87页
    2.1 材料第68-69页
        2.1.1 实验仪器及耗材第68页
        2.1.2 细胞第68页
        2.1.3 质粒载体第68页
        2.1.4 主要实验试剂和试剂盒第68-69页
        2.1.5 溶液配制第69页
    2.2 实验方法第69-72页
        2.2.1 真核细胞的培养与转染第69页
        2.2.2 MTT检测第69-70页
        2.2.3 克隆形成实验第70页
        2.2.4 流式细胞仪检测细胞周期第70-71页
        2.2.5 细胞侵润实验第71-72页
        2.2.6 统计学分析第72页
    2.3 实验结果第72-81页
        2.3.1 在胶质母细胞瘤细胞系U251和U373中,microRNA-124抑制了PPP1R13L介导的细胞增殖第72-75页
        2.3.2 在胶质母细胞瘤细胞系U251和U373中,microRNA-124抑制了PPPlR13L介导的细胞周期中G1向S期的转变第75-78页
        2.3.4 在胶质母细胞瘤细胞系U251和U373中,microRNA-124抑制了PPP1R13L介导的细胞侵润第78-80页
        2.3.5 在胶质母细胞瘤细胞系U251和U373中,microRNA-124抑制了 MMP-9和MMP-13的表达。第80-81页
    2.4 讨论第81-87页
主要创新点第87-88页
结论第88-89页
参考文献第89-100页
综述第100-130页
    参考文献第111-130页
攻读学位期间主要的学术成绩第130-131页
致谢第131页

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