| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 组织工程角膜的研究概述 | 第17-35页 |
| 1 角膜的结构与功能 | 第17-20页 |
| 1.1 角膜的解剖结构 | 第17-18页 |
| 1.2 角膜的生理功能 | 第18-20页 |
| 1.2.1 屏障功能 | 第18-19页 |
| 1.2.2 屈光功能 | 第19-20页 |
| 1.3 角膜疾病及治疗 | 第20页 |
| 2 组织工程学概述 | 第20-23页 |
| 2.1 组织工程学的建立与发展 | 第21页 |
| 2.2 组织工程的基本原理 | 第21-22页 |
| 2.3 组织工程的研究方向 | 第22-23页 |
| 2.3.1 组织工程种子细胞研究 | 第22页 |
| 2.3.2 组织工程支架材料研究 | 第22-23页 |
| 3 组织工程角膜的研究进展 | 第23-34页 |
| 3.1 组织工程角膜种子细胞的研究进展 | 第24-29页 |
| 3.1.1 胚胎干细胞研究 | 第24页 |
| 3.1.2 成体干细胞研究 | 第24-28页 |
| 3.1.3 其他类型细胞研究 | 第28-29页 |
| 3.2 组织工程角膜载体支架材料 | 第29-34页 |
| 3.2.1 天然材料 | 第29-33页 |
| 3.2.2 合成材料 | 第33-34页 |
| 4 本文的研究目的和意义 | 第34-35页 |
| 第二章 组织工程人全层角膜种子细胞的体外培养及其鉴定 | 第35-53页 |
| 1 材料与用品 | 第36-39页 |
| 1.1 实验材料 | 第36页 |
| 1.2 实验仪器 | 第36-37页 |
| 1.3 实验耗材 | 第37页 |
| 1.4 实验药品 | 第37页 |
| 1.5 溶液配方 | 第37-39页 |
| 2 实验方法 | 第39-43页 |
| 2.1 HCEP 细胞、HCS 细胞及 HCE 细胞的复苏及扩增培养 | 第39-40页 |
| 2.1.1 细胞的复苏 | 第39页 |
| 2.1.2 细胞的扩增培养 | 第39-40页 |
| 2.2 HCEP 细胞、HCS 细胞及 HCE 细胞的细胞生长曲线测定 | 第40页 |
| 2.3 HCEP 细胞、HCS 细胞及 HCE 细胞的染色体组型分析 | 第40-41页 |
| 2.4 HCEP 细胞、HCS 细胞及 HCE 细胞的免疫荧光染色 | 第41-42页 |
| 2.5 细胞的致瘤性检验 | 第42-43页 |
| 2.6 统计学方法 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-50页 |
| 3.1 HCEP 细胞、HCS 细胞及 HCE 细胞的生长特性 | 第43-46页 |
| 3.2 HCEP 细胞、HCS 细胞及 HCE 细胞的染色体计数与核型分析 | 第46-48页 |
| 3.3 HCEP 细胞、HCS 细胞及 HCE 细胞的免疫细胞化学检测 | 第48-49页 |
| 3.4 HCEP 细胞、HCS 细胞及 HCE 细胞的致瘤性检验 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 5 本章小结 | 第52-53页 |
| 第三章 脱细胞猪角膜基质的制备及其鉴定 | 第53-70页 |
| 1 材料与用品 | 第53-57页 |
| 1.1 实验材料 | 第53页 |
| 1.2 实验仪器 | 第53-54页 |
| 1.3 实验耗材 | 第54-55页 |
| 1.4 实验药品 | 第55页 |
| 1.5 主要溶液配方 | 第55-57页 |
| 2 实验方法 | 第57-61页 |
| 2.1 aPCS 的制备 | 第57-58页 |
| 2.2 aPCS 理化性能的检测 | 第58-60页 |
| 2.2.1 透光率检测 | 第58页 |
| 2.2.2 含水量检测 | 第58页 |
| 2.2.3 冰冻及石蜡切片 | 第58-59页 |
| 2.2.4 HE 染色 | 第59页 |
| 2.2.5 DAPI 染色 | 第59页 |
| 2.2.6 阿利新兰染色 | 第59页 |
| 2.2.7 电镜观察超微结构 | 第59-60页 |
| 2.3 aPCS 与角膜种子细胞的生物相容性研究 | 第60页 |
| 2.3.1 浸提液制备 | 第60页 |
| 2.3.2 细胞活力检测 | 第60页 |
| 2.3.3 细胞毒性检测 | 第60页 |
| 2.4 统计学方法 | 第60-61页 |
| 3 结果 | 第61-67页 |
| 3.1 aPCS 外观 | 第61页 |
| 3.2 aPCS 理化性能 | 第61-64页 |
| 3.3 aPCS 与种子细胞的生物相容性 | 第64-67页 |
| 4 讨论 | 第67-68页 |
| 5 本章小结 | 第68-70页 |
| 第四章 体外重建组织工程人全角膜的实验研究 | 第70-83页 |
| 1 材料与用品 | 第70-73页 |
| 1.1 实验材料 | 第70页 |
| 1.2 实验仪器 | 第70-71页 |
| 1.3 实验耗材 | 第71页 |
| 1.4 实验药品 | 第71-72页 |
| 1.5 常用溶液配方 | 第72-73页 |
| 2 实验方法 | 第73-77页 |
| 2.1 TE-HC 的体外重建 | 第73-75页 |
| 2.1.1 TE-HC 载体支架 aPCS 的制备 | 第73-74页 |
| 2.1.2 TE-HC 种子细胞的扩增培养 | 第74页 |
| 2.1.3 TE-HC 种子细胞的收集 | 第74-75页 |
| 2.1.4 TE-HC 的体外重建 | 第75页 |
| 2.2 体外重建 TE-HC 的鉴定 | 第75-76页 |
| 2.2.1 TE-HC 的光学透明度 | 第75页 |
| 2.2.2 TE-HC 内皮的茜素红染色 | 第75页 |
| 2.2.3 石蜡切片 HE 染色 | 第75-76页 |
| 2.2.4 TE-HC 的免疫细胞化学检测 | 第76页 |
| 2.2.5 TE-HC 的电镜观察 | 第76页 |
| 2.3 统计学方法 | 第76-77页 |
| 3 结果 | 第77-80页 |
| 3.1 TE-HC 的光学透明度 | 第77页 |
| 3.2 TE-HC 内皮的茜素红染色 | 第77-78页 |
| 3.3 石蜡切片 HE 染色 | 第78页 |
| 3.4 TE-HC 的电镜超微结构 | 第78-79页 |
| 3.5 TE-HC 的免疫组织化学检测 | 第79-80页 |
| 4 讨论 | 第80-82页 |
| 5 小结 | 第82-83页 |
| 第五章 组织工程全层人角膜的动物移植研究 | 第83-95页 |
| 1 材料与用品 | 第83-86页 |
| 1.1 实验材料 | 第83页 |
| 1.2 实验仪器 | 第83-84页 |
| 1.3 实验耗材 | 第84-85页 |
| 1.4 实验药品 | 第85页 |
| 1.5 常用溶液配方 | 第85-86页 |
| 2 实验方法 | 第86-90页 |
| 2.1 TE-HC 的体外重建 | 第86-89页 |
| 2.1.1 TE-HC 载体支架 aPCS 的制备 | 第86-87页 |
| 2.1.2 TE-HC 种子细胞的扩增培养 | 第87-88页 |
| 2.1.3 TE-HC 种子细胞的收集 | 第88页 |
| 2.1.4 TE-HC 种子细胞的标记 | 第88-89页 |
| 2.1.5 TE-HC 的体外重建 | 第89页 |
| 2.2 穿透性角膜移植及检测 | 第89-90页 |
| 2.2.1 穿透性角膜移植手术 | 第89页 |
| 2.2.2 术后护理 | 第89页 |
| 2.2.3 术后在体检测 | 第89-90页 |
| 2.3 统计学方法 | 第90页 |
| 3 结果 | 第90-93页 |
| 3.1 标记种子细胞的 TE-HC 的体外重建 | 第90页 |
| 3.2 角膜厚度 | 第90-91页 |
| 3.3 眼压 | 第91页 |
| 3.4 裂隙灯观察 | 第91-93页 |
| 4 讨论 | 第93-94页 |
| 5 本章小结 | 第94-95页 |
| 全文总结 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 个人简历 | 第106页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第106-107页 |
