| 英文缩略词表 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-14页 |
| Abstract | 第14-20页 |
| 第一章 载体的构建、细胞的分离培养及转染 | 第21-46页 |
| 1 引言 | 第21-23页 |
| 2 实验部分 | 第23-32页 |
| 2.1 实验试剂与材料 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.2.1 大鼠BMSC的分离、培养 | 第24页 |
| 2.2.2 构建小鼠PPARγ基因的Tet-On慢病毒载体并确定其沉默效应 | 第24-28页 |
| 2.2.2.1 shRNA-PPARγmir慢病毒表达载体构建 | 第24-27页 |
| 2.2.2.1.1 pSM2-PPARγ慢病毒载体构建 | 第24-26页 |
| 2.2.2.1.2 pTRIPZ-PPARγ(表达质粒)载体构建 | 第26-27页 |
| 2.2.2.2 pTRIPZ-PPARγ慢病毒包装纯化 | 第27-28页 |
| 2.2.3 转染BMSC,评价载体对PPARγ基因的沉默效果 | 第28-30页 |
| 2.2.4 成脂、成骨相关基因表达 | 第30-31页 |
| 2.2.5 体外实验shRNA-PPARγ对BMSC成脂与成骨分化的影响 | 第31-32页 |
| 3 结果 | 第32-42页 |
| 3.1 骨髓基质干细胞的分离、培养 | 第32页 |
| 3.2 筛选出最佳的RNAi序列并构建真核表达载体 | 第32-36页 |
| 3.3 转染大鼠BMSC、评价转染后PPARγ的沉默效果 | 第36-39页 |
| 3.4 成骨、成脂分化相关基因表达 | 第39-40页 |
| 3.5 将转染大鼠BMSC向成骨方向诱导分化,ALP检测 | 第40-42页 |
| 3.6 成脂诱导、油红-O染色鉴定 | 第42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 5 本章小结 | 第45-46页 |
| 第二章 HA/PLLA涂层BCP支架材料制备、Dox微球的制备与支架复合 | 第46-62页 |
| 1 引言 | 第46-48页 |
| 2 实验部分 | 第48-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第48-50页 |
| 2.2 实验方法 | 第50-54页 |
| 2.2.1 HA/PLLA涂层多孔BCP支架的制备 | 第50-52页 |
| 2.2.1.1 羟基磷灰石的制备 | 第50页 |
| 2.2.1.2 β相磷酸三钙的制备 | 第50-51页 |
| 2.2.1.3 双相磷酸钙的制备 | 第51页 |
| 2.2.1.4 BCP支架的制备与涂层 | 第51-52页 |
| 2.2.2 强力霉素微球的制备 | 第52-53页 |
| 2.2.2.1 强力霉素标准曲线 | 第52页 |
| 2.2.2.2 线性PLGA-mPEG嵌段共聚物的合成 | 第52-53页 |
| 2.2.2.3 载强力霉素微球的制备 | 第53页 |
| 2.2.3 载强力霉素BCP支架的制备 | 第53页 |
| 2.2.4 多孔BCP/Dox支架分析 | 第53-54页 |
| 2.2.5 多孔BCP/Dox支架体外释放实验 | 第54页 |
| 3 结果与讨论 | 第54-61页 |
| 3.1 双相磷钙的特征 | 第54页 |
| 3.2 HA/PLLA涂层BCP支架的特性 | 第54-55页 |
| 3.3 线性PLGA-mPEG嵌段共聚物 | 第55-56页 |
| 3.4 微球的特性 | 第56-57页 |
| 3.5 Dox、微球、支架材料的FTIR分析 | 第57-60页 |
| 3.6 多孔BCP/Dox支架的释药特性 | 第60-61页 |
| 4 本章小结 | 第61-62页 |
| 第三章 复合tBMSC的多孔BCP/Dox支架治疗大鼠骨缺损的研究 | 第62-86页 |
| 1 引言 | 第62-63页 |
| 2 实验部分 | 第63-69页 |
| 2.1 实验材料与设备 | 第63-64页 |
| 2.2 实验方法 | 第64-69页 |
| 2.2.1 体外实验 | 第64-66页 |
| 2.2.1.1 细胞粘附率 | 第64-65页 |
| 2.2.1.2 细胞增殖率 | 第65页 |
| 2.2.1.3 多孔BCP/Dox支架对tBMSC成骨分化的影响,对成脂分化的影响 | 第65-66页 |
| 2.2.2 体内实验 | 第66-68页 |
| 2.2.2.1 急性毒性实验 | 第66-67页 |
| 2.2.2.2 致敏试验 | 第67页 |
| 2.2.2.3 溶血实验 | 第67-68页 |
| 2.2.3 多孔BCP/Dox支架的肌肉植入实验 | 第68页 |
| 2.2.4 复合细胞的多孔BCP/Dox支架的骨缺损植入实验 | 第68-69页 |
| 3 结果 | 第69-82页 |
| 3.1 多孔BCP/Dox支架的粘附率、增殖率分析 | 第70-71页 |
| 3.2 BCP/Dox支架对tBMSC和BMSC成骨分化和成脂分化的影响 | 第71-74页 |
| 3.3 多孔BCP/Dox支架的毒性、致敏及溶血实验分析 | 第74-75页 |
| 3.4 肌肉植入实验 | 第75-77页 |
| 3.5 复合tBMSC的多孔BCP/Dox支架的颅骨修复结果 | 第77-82页 |
| 4 讨论 | 第82-85页 |
| 5 本章小结 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-99页 |
| 发表论文和参与课题 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
