摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
1. 绪论 | 第15-25页 |
1.1 张应变、血管重建与高压血 | 第16-18页 |
1.2 Rab28 研究现状 | 第18-20页 |
1.3 FOXOs 家族在血管发育过程中的作用 | 第20-21页 |
1.4 细胞增殖、分化与血管重建 | 第21-24页 |
1.5 本文研究的主要内容及思路 | 第24-25页 |
2. 实验仪器与试剂 | 第25-26页 |
2.1 实验仪器 | 第25页 |
2.2 主要溶液的成分及其配制 | 第25页 |
2.3 实验动物和实验试剂 | 第25-26页 |
3. 实验方法 | 第26-35页 |
3.1 手术建立高血压大鼠动物模型 | 第26-27页 |
3.1.1 动物实验场所 | 第26页 |
3.1.2 手术过程 | 第26-27页 |
3.1.3 血压测定 | 第27页 |
3.2 大鼠主动脉弓取材、血管组织免疫荧光检测分子表达 | 第27-28页 |
3.2.1 主动脉取材 | 第27-28页 |
3.2.2 冰冻切片的制备 | 第28页 |
3.2.3 组织免疫荧光染色 | 第28页 |
3.3 Western blotting 检测大鼠胸主动脉组织血管分子表达 | 第28-29页 |
3.4 SD 大鼠胸主动脉 VSMCs 的原代培养及鉴定 | 第29页 |
3.5 VSMCs 的传代培养、冻存及复苏 | 第29页 |
3.6 VSMCs 的周期性张应变的加载 | 第29-31页 |
3.7 Western blotting 检测细胞蛋白表达水平 | 第31页 |
3.8 VSMCs RNAi 实验 | 第31-33页 |
3.9 细胞增殖活性检测 | 第33-34页 |
3.10 细胞免疫荧光染色 | 第34页 |
3.11 统计学方法 | 第34-35页 |
4. 结果 | 第35-53页 |
4.1 高血压模型大鼠胸主动脉组织血管细胞的分化及 Rab28、FOXOs 分子的表达 | 第35-41页 |
4.1.1 高血压模型大鼠的血压 | 第35页 |
4.1.2 高血压模型大鼠胸主动脉血管细胞分化水平增高 | 第35-36页 |
4.1.3 高血压模型大鼠胸主动脉中 Rab28 分布与表达 | 第36-38页 |
4.1.4 高血压模型大鼠胸主动脉中 FOXOs 分布与表达 | 第38-41页 |
4.2 周期性张应变加载条件下 VSMCs 的分化、增殖及 Rab28、FOXOs 表达 | 第41-46页 |
4.2.1 张应变调控 VSMCs 的 Rab28 分子的表达 | 第41-42页 |
4.2.2 张应变调控 VSMCs 的 FOXO4 分子的表达 | 第42-43页 |
4.2.3 张应变调控 VSMCs 的 FOXO1 及 phospho-FOXO1 表达 | 第43-44页 |
4.2.4 张应变调控 VSMCs 的表型变化 | 第44-45页 |
4.2.5 张应变调控 VSMCs 的增殖 | 第45-46页 |
4.3 抑制 VSMCs 的 FOXO1 表达对其分化和增殖的影响 | 第46-49页 |
4.3.1 siRNA 转染显著降低 VSMCs 的 FOXO1 和 phospho- FOXO1 表达 | 第46-47页 |
4.3.2 RNAi 抑制 FOXO1 的表达即抑制了 VSMCs 的分化 | 第47-48页 |
4.3.3 RNAi 抑制 FOXO1 的表达即抑制了 VSMCs 的增殖 | 第48-49页 |
4.4 静态条件下 Rab28、FOXO4 及 phospho-FOXO4 在 VSMCs 的分布 | 第49-53页 |
4.4.1 Rab28 在 VSMCs 中的分布 | 第49-50页 |
4.4.2 FOXO4、phospho-FOXO4 在 VSMCs 中的分布 | 第50-53页 |
5. 讨论 | 第53-57页 |
6. 展望 | 第57-58页 |
全文小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
附录 | 第67-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读硕士学位期间已完成或发表的学术论文 | 第74-75页 |
附件 | 第75页 |