| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 常用缩写词中英文对照表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一部分 miRNA-134在不同骨肉瘤细胞系及骨肉瘤临床样本中的表达比较 | 第14-20页 |
| 1 材料与方法 | 第14-17页 |
| 1.1 细胞系及临床标本来源 | 第14页 |
| 1.2 主要仪器耗材 | 第14-15页 |
| 1.3 主要试剂 | 第15页 |
| 1.4 miRNA提取 | 第15-16页 |
| 1.5 cDNA逆转录 | 第16页 |
| 1.6 miRNAqPCR反应 | 第16-17页 |
| 2 实验结果 | 第17-18页 |
| 2.1 miR-134在骨肉瘤细胞中呈低表达 | 第17-18页 |
| 2.2 miR-134在骨肉瘤样本组织中呈低表达 | 第18页 |
| 3 讨论 | 第18-19页 |
| 4 结论 | 第19-20页 |
| 第二部分 miRNA-134于体外对骨肉瘤细胞增殖、凋亡及血管生成的影响 | 第20-28页 |
| 1 材料与方法 | 第20-25页 |
| 1.1 主要仪器耗材 | 第20页 |
| 1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
| 1.3 miR134转染和过表达 | 第21页 |
| 1.4 细胞凋亡检测(流式细胞检测法) | 第21-22页 |
| 1.5 miR-134qPCR反应 | 第22-23页 |
| 1.6 Western-Blot凝胶电泳 | 第23-24页 |
| 1.7 血管生成实验 | 第24-25页 |
| 2 实验结果 | 第25-27页 |
| 2.1 成功转染和过表达miR-134 | 第25页 |
| 2.2 miR-134过表达抑制骨肉瘤细胞增殖 | 第25-26页 |
| 2.3 miR-134过表达促进骨肉瘤细胞凋亡 | 第26页 |
| 2.4 miR-134 过表达抑制血管生成的实验 | 第26-27页 |
| 3 讨论 | 第27-28页 |
| 4 结论 | 第28页 |
| 第三部分 miRNA-134于体内对骨肉瘤增殖及血管生成的影响 | 第28-38页 |
| 1 材料与方法 | 第28-35页 |
| 1.1 主要仪器耗材 | 第28-29页 |
| 1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
| 1.3 异种移植瘤模型的建立 | 第30-31页 |
| 1.4 FMT在体检测血管生成 | 第31页 |
| 1.5 miR-134调控VEGFmRNA水平实验 | 第31-33页 |
| 1.6 miR-134调控VEGF蛋白水平实验 | 第33-34页 |
| 1.7 免疫组化染色实验 | 第34-35页 |
| 2 实验结果 | 第35-37页 |
| 2.1 miR-134在体抑制瘤体生长 | 第35页 |
| 2.2 FMT验证血管生成 | 第35-36页 |
| 2.3 过表达miR-134抑制VEGFA/VEGFR1表达 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 4 结论 | 第38页 |
| 第四部分 miRNA-134在骨肉瘤中作用机制的探索和研究 | 第38-46页 |
| 1 材料与方法 | 第38-43页 |
| 1.1 主要仪器耗材 | 第38-39页 |
| 1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 1.3 检测VEGFA和VEGFR1mRNA在骨肉瘤样本组织表达情况 | 第39-41页 |
| 1.4 检测VEGFA/VEGFR1蛋白在骨肉瘤样本组织表达情况 | 第41-42页 |
| 1.5 ELISA检测miR-134与目的基因作用关系 | 第42页 |
| 1.6 验证miR-134靶基因VEGFA/VEGFR1荧光素酶基因报告系统 | 第42-43页 |
| 2 结果 | 第43-45页 |
| 2.1 VEGFA和VEGFR1在骨肉瘤样本组织中呈高表达 | 第43页 |
| 2.2 miR-134呈剂量、时间依赖方式作用于VEGF | 第43-44页 |
| 2.3 过表达miR-134抑制VEGFA/VEGFR1表达 | 第44页 |
| 2.4 miR-134靶基因验证 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| 4 结论 | 第46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 综述 | 第49-55页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 致谢 | 第55-57页 |
| 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果 | 第57-59页 |
| 个人简历 | 第59页 |
