中英文缩略词 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-12页 |
英文摘要 | 第12-16页 |
1 前言 | 第17-18页 |
2 实验材料 | 第18-23页 |
2.1 实验动物 | 第18-19页 |
2.2 实验仪器与设备 | 第19页 |
2.3 实验试剂 | 第19-21页 |
2.4 qRT-PCR相关基因引物序列 | 第21页 |
2.5 siRNA干扰序列 | 第21页 |
2.6 相关试剂的配制 | 第21-23页 |
3 实验方法 | 第23-30页 |
3.1 原代大鼠关节软骨细胞的提取和培养 | 第23-24页 |
3.2 免疫荧光法检测相关蛋白表达 | 第24页 |
3.3 激光共聚焦法检测胞内Ca~(2+)浓度变化 | 第24页 |
3.4 单丹磺酰尸胺(MDC)染色法观察自噬囊泡 | 第24页 |
3.5 透射电镜(TEM)法观察自噬小体 | 第24-25页 |
3.6 siRNA的转染 | 第25-26页 |
3.7 mcherry-EGFP-LC3B质粒的转染 | 第26-27页 |
3.8 qRT-PCR法检测软骨细胞相关基因的表达 | 第27-28页 |
3.9 WesternBlot法检测软骨细胞相关蛋白的表达 | 第28-30页 |
3.10 统计学分析 | 第30页 |
4 实验结果 | 第30-52页 |
4.1 胞外酸化诱导了大鼠关节软骨细胞的自噬 | 第30-33页 |
4.2 ASIC1a的激活介导了酸诱导的大鼠关节软骨细胞的自噬 | 第33-39页 |
4.3 转录因子FoxO3a在ASIC1a介导的大鼠关节软骨细胞的自噬中的作用 | 第39-45页 |
4.4 AMPK/FoxO3a信号转导通路在ASIC1a介导的大鼠关节软骨细胞的自噬中的作用 | 第45-52页 |
5 讨论 | 第52-55页 |
6 结论 | 第55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
附录 | 第62-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
综述 | 第65-82页 |
参考文献 | 第75-82页 |