摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-26页 |
1.1 细胞凋亡概述 | 第12-14页 |
1.1.1 细胞凋亡的基本概念 | 第12页 |
1.1.2 细胞凋亡的特征 | 第12-13页 |
1.1.3 细胞凋亡与细胞坏死的区别 | 第13-14页 |
1.1.4 细胞凋亡的生物学意义 | 第14页 |
1.2 细胞凋亡的常用检测方法 | 第14-15页 |
1.3 细胞凋亡的途径 | 第15-17页 |
1.3.1 线粒体通路 | 第15-16页 |
1.3.2 死亡受体通路 | 第16页 |
1.3.3 内质网通路 | 第16-17页 |
1.4 细胞凋亡的调节机制 | 第17-21页 |
1.5 活性氧诱导细胞凋亡 | 第21-23页 |
1.5.1 活性氧简述 | 第21-22页 |
1.5.2 活性氧诱导的细胞凋亡 | 第22页 |
1.5.3 活性氧诱导细胞凋亡的可能机制 | 第22-23页 |
1.6 家蚕细胞凋亡研究进展 | 第23-26页 |
第二章 引言 | 第26-28页 |
2.1 研究背景及目的意义 | 第26-27页 |
2.1.1 研究背景 | 第26页 |
2.1.2 研究目的意义 | 第26-27页 |
2.2 主要研究内容 | 第27页 |
2.3 研究技术路线 | 第27-28页 |
第三章 活性氧诱导家蚕BmN-SWU1细胞凋亡模型的建立 | 第28-40页 |
3.1 实验材料、试剂与仪器 | 第28-30页 |
3.1.1 实验材料 | 第28页 |
3.1.2 主要仪器 | 第28-29页 |
3.1.3 实验试剂 | 第29页 |
3.1.4 主要溶液的配置 | 第29-30页 |
3.2 实验方法 | 第30-33页 |
3.2.1 昆虫细胞培养技术 | 第30-31页 |
3.2.2 活性氧诱导家蚕BmN-SWU1细胞凋亡 | 第31-32页 |
3.2.3 细胞增殖检测 | 第32页 |
3.2.4 DAPI核染色 | 第32页 |
3.2.5 流式细胞仪检测 | 第32页 |
3.2.6 TUNEL检测 | 第32-33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-37页 |
3.3.1 细胞活性分析 | 第33-34页 |
3.3.2 细胞核变化分析 | 第34页 |
3.3.3 活性氧诱导BmN-SWU1细胞后流式分析 | 第34-36页 |
3.3.4 DNA断裂分析 | 第36-37页 |
3.4 讨论 | 第37-40页 |
第四章 活性氧诱导家蚕BmN-SWU1细胞凋亡的线粒体途径的研究 | 第40-70页 |
4.1 实验材料、试剂与仪器 | 第40-44页 |
4.1.1 实验材料 | 第40页 |
4.1.2 主要仪器 | 第40页 |
4.1.3 实验试剂 | 第40-41页 |
4.1.4 主要溶液的配置 | 第41-44页 |
4.2 实验方法 | 第44-53页 |
4.2.1 活性氧诱导BmN-SWU1细胞凋亡 | 第44页 |
4.2.2 Mito-Tracker Green染色 | 第44页 |
4.2.3 线粒体膜电位检测 | 第44-45页 |
4.2.4 细胞质内活性氧水平检测 | 第45页 |
4.2.5 细胞质内Ca~(2+)水平检测 | 第45-46页 |
4.2.6 免疫荧光技术 | 第46页 |
4.2.7 线粒体蛋白与细胞质蛋白的分离、提取 | 第46-47页 |
4.2.8 家蚕凋亡相关基因的RNA水平表达检测 | 第47-50页 |
4.2.9 昆虫细胞总蛋白的提取与凋亡相关蛋白测定 | 第50-52页 |
4.2.10 Caspase-9及3/7酶活性检测 | 第52-53页 |
4.3 结果与分析 | 第53-67页 |
4.3.1 活性氧诱导昆虫细胞凋亡对线粒体分布变化的影响 | 第53-54页 |
4.3.2 活性氧诱导昆虫细胞凋亡对线粒体膜电位变化的分析 | 第54-56页 |
4.3.3 细胞质内活性氧及Ca~(2+)水平变化分析 | 第56-59页 |
4.3.4 细胞色素c的表达及释放 | 第59-62页 |
4.3.5 活性氧对家蚕细胞凋亡相关基因mRNA水平表达的影响 | 第62-65页 |
4.3.6 凋亡相关蛋白变化分析 | 第65-66页 |
4.3.7 Caspase-9及3/7酶活性变化分析 | 第66-67页 |
4.4 讨论 | 第67-70页 |
第五章 全文总结 | 第70-72页 |
论文创新点 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-84页 |
附录 论文缩略词表 | 第84-86页 |
硕士期间发表论文及参研课题 | 第86-88页 |
致谢 | 第88页 |