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活性氧诱导家蚕细胞凋亡的内源性线粒体途径的研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
第一章 文献综述第12-26页
    1.1 细胞凋亡概述第12-14页
        1.1.1 细胞凋亡的基本概念第12页
        1.1.2 细胞凋亡的特征第12-13页
        1.1.3 细胞凋亡与细胞坏死的区别第13-14页
        1.1.4 细胞凋亡的生物学意义第14页
    1.2 细胞凋亡的常用检测方法第14-15页
    1.3 细胞凋亡的途径第15-17页
        1.3.1 线粒体通路第15-16页
        1.3.2 死亡受体通路第16页
        1.3.3 内质网通路第16-17页
    1.4 细胞凋亡的调节机制第17-21页
    1.5 活性氧诱导细胞凋亡第21-23页
        1.5.1 活性氧简述第21-22页
        1.5.2 活性氧诱导的细胞凋亡第22页
        1.5.3 活性氧诱导细胞凋亡的可能机制第22-23页
    1.6 家蚕细胞凋亡研究进展第23-26页
第二章 引言第26-28页
    2.1 研究背景及目的意义第26-27页
        2.1.1 研究背景第26页
        2.1.2 研究目的意义第26-27页
    2.2 主要研究内容第27页
    2.3 研究技术路线第27-28页
第三章 活性氧诱导家蚕BmN-SWU1细胞凋亡模型的建立第28-40页
    3.1 实验材料、试剂与仪器第28-30页
        3.1.1 实验材料第28页
        3.1.2 主要仪器第28-29页
        3.1.3 实验试剂第29页
        3.1.4 主要溶液的配置第29-30页
    3.2 实验方法第30-33页
        3.2.1 昆虫细胞培养技术第30-31页
        3.2.2 活性氧诱导家蚕BmN-SWU1细胞凋亡第31-32页
        3.2.3 细胞增殖检测第32页
        3.2.4 DAPI核染色第32页
        3.2.5 流式细胞仪检测第32页
        3.2.6 TUNEL检测第32-33页
    3.3 结果与分析第33-37页
        3.3.1 细胞活性分析第33-34页
        3.3.2 细胞核变化分析第34页
        3.3.3 活性氧诱导BmN-SWU1细胞后流式分析第34-36页
        3.3.4 DNA断裂分析第36-37页
    3.4 讨论第37-40页
第四章 活性氧诱导家蚕BmN-SWU1细胞凋亡的线粒体途径的研究第40-70页
    4.1 实验材料、试剂与仪器第40-44页
        4.1.1 实验材料第40页
        4.1.2 主要仪器第40页
        4.1.3 实验试剂第40-41页
        4.1.4 主要溶液的配置第41-44页
    4.2 实验方法第44-53页
        4.2.1 活性氧诱导BmN-SWU1细胞凋亡第44页
        4.2.2 Mito-Tracker Green染色第44页
        4.2.3 线粒体膜电位检测第44-45页
        4.2.4 细胞质内活性氧水平检测第45页
        4.2.5 细胞质内Ca~(2+)水平检测第45-46页
        4.2.6 免疫荧光技术第46页
        4.2.7 线粒体蛋白与细胞质蛋白的分离、提取第46-47页
        4.2.8 家蚕凋亡相关基因的RNA水平表达检测第47-50页
        4.2.9 昆虫细胞总蛋白的提取与凋亡相关蛋白测定第50-52页
        4.2.10 Caspase-9及3/7酶活性检测第52-53页
    4.3 结果与分析第53-67页
        4.3.1 活性氧诱导昆虫细胞凋亡对线粒体分布变化的影响第53-54页
        4.3.2 活性氧诱导昆虫细胞凋亡对线粒体膜电位变化的分析第54-56页
        4.3.3 细胞质内活性氧及Ca~(2+)水平变化分析第56-59页
        4.3.4 细胞色素c的表达及释放第59-62页
        4.3.5 活性氧对家蚕细胞凋亡相关基因mRNA水平表达的影响第62-65页
        4.3.6 凋亡相关蛋白变化分析第65-66页
        4.3.7 Caspase-9及3/7酶活性变化分析第66-67页
    4.4 讨论第67-70页
第五章 全文总结第70-72页
论文创新点第72-74页
参考文献第74-84页
附录 论文缩略词表第84-86页
硕士期间发表论文及参研课题第86-88页
致谢第88页

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