| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-21页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 1.1 乳腺癌的发生发展 | 第12-16页 |
| 1.1.1 乳腺癌研究现状 | 第12页 |
| 1.1.2 乳腺痛发生发展的原因 | 第12-13页 |
| 1.1.3 发病机制 | 第13页 |
| 1.1.4 乳腺癌的分子分型 | 第13-14页 |
| 1.1.5 乳腺癌发生发展相关的基因 | 第14-16页 |
| 1.2 miRNA在肿瘤中的研究进展 | 第16-21页 |
| 1.2.1 MicroRNA的简述 | 第16-18页 |
| 1.2.2 癌产生的调控和癌症转移 | 第18-21页 |
| 第二章 乳腺癌相关miRNA表达谱的建立 | 第21-31页 |
| 引言 | 第21页 |
| 2.1 方法和材料 | 第21-26页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂和耗材 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要设备与仪器 | 第22页 |
| 2.1.4 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.1.5 总RNA的提取与鉴定 | 第23-24页 |
| 2.1.6 检测miRNA的表达 | 第24-26页 |
| 2.1.7 分析数据 | 第26页 |
| 2.2 结果 | 第26-29页 |
| 2.2.1 RNA提取报告及电泳图 | 第26-27页 |
| 2.2.2 乳腺癌miRNA表达谱芯片的设计与建立 | 第27-29页 |
| 2.3 小结 | 第29-31页 |
| 第三章 miRNA的筛选和miRNA靶基因的预测 | 第31-45页 |
| 引言 | 第31页 |
| 3.1 方法和材料 | 第31-36页 |
| 3.1.1 细胞株与乳腺组织样本 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂和耗材 | 第31-32页 |
| 3.1.3 主要设备与仪器 | 第32-33页 |
| 3.1.4 细胞培养 | 第33页 |
| 3.1.5 总RNA的提取与鉴定 | 第33页 |
| 3.1.6 定量RT-PCR检测miRNA的表达 | 第33页 |
| 3.1.7 Western blot | 第33-35页 |
| 3.1.8 细胞转染 | 第35页 |
| 3.1.9 细胞计数 | 第35-36页 |
| 3.1.10 数据分析 | 第36页 |
| 3.1.11 miR-221/222靶基因的预测 | 第36页 |
| 3.2 结果 | 第36-44页 |
| 3.2.1 乳腺癌组织miRNA表达谱芯片的分析 | 第36-40页 |
| 3.2.2 预测miR-221/222的靶基因 | 第40-41页 |
| 3.2.3 在乳腺癌细胞用定量PCR验证SOCS1和CDKN1B | 第41-42页 |
| 3.2.4 miR-221/222抑制SOCS1和CDKN1B靶蛋白的表达 | 第42-44页 |
| 3.3 小结 | 第44-45页 |
| 第四章 miR-221/222在乳腺癌细胞中生物学行为作用的研究 | 第45-62页 |
| 引言 | 第45页 |
| 4.1 材料和方法 | 第45-51页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第45页 |
| 4.1.2 主要试剂和耗材 | 第45-46页 |
| 4.1.3 主要仪器和设备 | 第46-47页 |
| 4.1.4 细胞培养 | 第47页 |
| 4.1.5 细胞瞬时转染 | 第47页 |
| 4.1.6 MTT法检测细胞增殖活性 | 第47-48页 |
| 4.1.7 Transwell小室测细胞的侵袭实验 | 第48页 |
| 4.1.8 Wound healing测细胞的迁移实验 | 第48页 |
| 4.1.9 Northern blot | 第48-51页 |
| 4.1.10 细胞周期实验 | 第51页 |
| 4.1.11 数据处理 | 第51页 |
| 4.2 结果 | 第51-61页 |
| 4.2.1 miRNA-221/222 inhibitors对MDA-MB-231细胞增殖的影响 | 第51-52页 |
| 4.2.2 miRNA-221/222对MDA-MB-231细胞侵袭的影响 | 第52-54页 |
| 4.2.3 miRNA-221/222对MDA-MB-231细胞迁移的影响 | 第54-58页 |
| 4.2.4 miRNA-221/222对细胞周期的影响 | 第58-61页 |
| 4.3 小结 | 第61-62页 |
| 第五章 讨论 | 第62-67页 |
| 5.1 miRNA表达谱芯片的筛选与建立 | 第62-63页 |
| 5.2 miR-221/miR-222的差异表达 | 第63页 |
| 5.3 miRNA的靶基因预测及验证 | 第63-64页 |
| 5.4 miRNA对细胞生物学能力的调控 | 第64-67页 |
| 第六章 结论 | 第67-69页 |
| 6.1 主要结论 | 第67页 |
| 6.2 研究展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 在学期间的研究成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
