| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 秀丽线虫简介 | 第12-13页 |
| 1.2 秀丽线虫的脂肪代谢 | 第13-19页 |
| 1.2.1 秀丽线虫脂肪储存的动态变化 | 第13-15页 |
| 1.2.2 秀丽线虫脂肪代谢的调控基因 | 第15-16页 |
| 1.2.3 秀丽线虫的脂肪代谢与生殖发育 | 第16-19页 |
| 1.3 秀丽线虫反转座基因ssp-31的研究背景 | 第19-24页 |
| 1.3.1 反转座基因研究进展 | 第20-22页 |
| 1.3.2 秀丽线虫SSP家族基因研究进展 | 第22-24页 |
| 1.4 研究的意义 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-42页 |
| 2.1 实验材料、试剂和仪器 | 第26-30页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第28-29页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第29-30页 |
| 2.2 实验路线 | 第30-31页 |
| 2.2.1 RT-PCR | 第30页 |
| 2.2.2 荧光定量PCR | 第30-31页 |
| 2.2.3 RNA干扰及功能分析 | 第31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-42页 |
| 2.3.1 SSP家族成员基因序列比对和进化树分析 | 第31页 |
| 2.3.2 秀丽线虫总RNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.3.3 总RNA中基因组DNA的消化和反转录 | 第32-33页 |
| 2.3.4 目的基因的扩增和纯化 | 第33-35页 |
| 2.3.5 克隆载体的构建 | 第35-36页 |
| 2.3.6 表达载体的构建 | 第36-38页 |
| 2.3.7 反转座基因在线虫发育不同时期mRNA水平的表达 | 第38-39页 |
| 2.3.8 线虫RNA干扰的实施及干扰效果的检测 | 第39-40页 |
| 2.3.9 ssp-31对线虫产卵量及孵化率影响的分析 | 第40页 |
| 2.3.10 ssp-31对线虫脂肪代谢影响的分析 | 第40-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-60页 |
| 3.1 SSP家族成员基因序列比对和进化树分析 | 第42-47页 |
| 3.2 秀丽线虫总RNA的提取和反转录 | 第47-48页 |
| 3.3 目的基因的扩增 | 第48页 |
| 3.4 克隆载体的构建和鉴定 | 第48-49页 |
| 3.5 表达载体的构建和鉴定 | 第49-52页 |
| 3.5.1 质粒的提取 | 第49-50页 |
| 3.5.2 双酶切获得目的片段和L4440线性质粒 | 第50-51页 |
| 3.5.3 目的基因与L4440线性质粒连接转化和阳性克隆的鉴定 | 第51-52页 |
| 3.6 ssp-31在线虫不同发育期的表达情况 | 第52-53页 |
| 3.7 ssp-31 RNAi的效果 | 第53-54页 |
| 3.8 ssp-31 RNAi对线虫产卵和孵化率的影响 | 第54-57页 |
| 3.9 ssp-31 RNAi对线虫脂肪代谢的影响 | 第57-58页 |
| 3.10 ssp-31 RNAi对线虫其他方面的影响 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-67页 |
| 4.1 本研究的创新之处 | 第60页 |
| 4.2 反转座基因ssp-31的表达与功能分析 | 第60-62页 |
| 4.3 RNAi方法的优化 | 第62-64页 |
| 4.4 小结与展望 | 第64-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
