| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第16-23页 |
| 1.1 干燥综合征 | 第16-17页 |
| 1.2 M3受体与干燥综合征 | 第17-20页 |
| 1.2.1 M3受体的结构与功能 | 第17-18页 |
| 1.2.2 M3受体被认为是pSS的候选致病抗原 | 第18-20页 |
| 1.2.2.1 SS病人体内存在该抗体 | 第18页 |
| 1.2.2.2 抗M3受体抗体能够与靶抗原相互作用 | 第18-19页 |
| 1.2.2.3 被动转移该抗体能重现疾病的特征 | 第19页 |
| 1.2.2.4 利用抗原免疫动物产生疾病模型 | 第19-20页 |
| 1.2.2.5 降低抗体的水平能改善疾病的病情 | 第20页 |
| 1.3 IL-18与干燥综合征 | 第20-21页 |
| 1.3.1 IL-18的结构和功能 | 第20-21页 |
| 1.3.2 IL-18与自身免疫疾病的相关性 | 第21页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第23-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-33页 |
| 2.1.1 合成多肽 | 第23-24页 |
| 2.1.2 原发干燥综合征病例及健康对照 | 第24-25页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第25页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.5 溶液的配制 | 第26-33页 |
| 2.1.5.1 溶解多肽 | 第26-27页 |
| 2.1.5.2 配制弗氏完全佐剂CFA | 第27页 |
| 2.1.5.3 溶解链霉亲和素 | 第27页 |
| 2.1.5.4 磷酸盐缓冲液(0.01MPBS) | 第27-28页 |
| 2.1.5.5 0.05M碳酸盐缓冲液 | 第28页 |
| 2.1.5.6 PBS-T | 第28页 |
| 2.1.5.7 10%水合氯醛溶液 | 第28页 |
| 2.1.5.8 毛果芸香碱溶液 | 第28页 |
| 2.1.5.9 4%多聚甲醛固定液 | 第28页 |
| 2.1.5.10 Mayer苏木素染液 | 第28页 |
| 2.1.5.11 封闭液 | 第28-29页 |
| 2.1.5.12 血清稀释液 | 第29页 |
| 2.1.5.13 抗体稀释液 | 第29页 |
| 2.1.5.14 实验用抗体 | 第29-30页 |
| 2.1.5.15 底物缓冲液 | 第30页 |
| 2.1.5.16 TMB显色液 | 第30页 |
| 2.1.5.17 ELISA反应终止液 | 第30页 |
| 2.1.5.18 抗体纯化洗脱缓冲液 | 第30-31页 |
| 2.1.5.19 抗体纯化收集缓冲液 | 第31页 |
| 2.1.5.20 检测IL-18血清浓度的ELISA试剂配制 | 第31-32页 |
| 2.1.5.21 其它材料 | 第32-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-46页 |
| 2.2.1 pSS病人血清中的抗M3R抗体检测 | 第33-35页 |
| 2.2.1.1 ELISA方法1 | 第33-34页 |
| 2.2.1.2 ELISA方法2 | 第34页 |
| 2.2.1.3 ELISA方法3 | 第34页 |
| 2.2.1.4 数据处理及统计分析 | 第34-35页 |
| 2.2.2 动物模型 | 第35-41页 |
| 2.2.2.1 唾液及泪液检测 | 第35页 |
| 2.2.2.2 免疫OVA-M3R多肽 | 第35-36页 |
| 2.2.2.3 分离血清 | 第36页 |
| 2.2.2.4 检测抗体滴度 | 第36-37页 |
| 2.2.2.5 检测抗体表位拓展 | 第37页 |
| 2.2.2.6 检测抗体亚型 | 第37-38页 |
| 2.2.2.7 摘取小鼠腺体组织 | 第38页 |
| 2.2.2.8 制备石蜡切片 | 第38-39页 |
| 2.2.2.9 HE染色 | 第39-40页 |
| 2.2.2.10 制作冰冻切片 | 第40页 |
| 2.2.2.11 直接免疫荧光法检测腺体上的IgG | 第40-41页 |
| 2.2.2.12 间接免疫荧光法检测腺体上的IgG | 第41页 |
| 2.2.3 抗体转移实验 | 第41-42页 |
| 2.2.3.1 提取纯化抗体 | 第41-42页 |
| 2.2.3.2 注射抗体 | 第42页 |
| 2.2.3.3 分泌腺功能检测及组织学检测 | 第42页 |
| 2.2.4 pSS病人血清中IL-18浓度的检测 | 第42-46页 |
| 2.2.4.1 IL-18的检测 | 第42-43页 |
| 2.2.4.2 IL-18R1的检测 | 第43-44页 |
| 2.2.4.3 IL-18BP的检测 | 第44-45页 |
| 2.2.4.4 数据处理及统计分析 | 第45-46页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第46-71页 |
| 3.1 抗M3R抗体在pSS病人中的检测 | 第46-50页 |
| 3.1.1 三种不同ELISA方法的检测结果 | 第46-49页 |
| 3.1.2 三种不同ELISA方法的特异性及敏感度 | 第49-50页 |
| 3.2 M3R多肽免疫小鼠pSS相关症状的检验 | 第50-66页 |
| 3.2.1 小鼠血清中的抗M3R抗体 | 第51-58页 |
| 3.2.1.1 小鼠血清中的抗M3R抗体滴度的变化 | 第51-54页 |
| 3.2.1.2 免疫小鼠抗体亚型的检测 | 第54-55页 |
| 3.2.1.3 腺体上的IgG结合 | 第55-58页 |
| 3.2.2 小鼠外分泌腺分泌功能的变化 | 第58-59页 |
| 3.2.3 组织学检测 | 第59-61页 |
| 3.2.3.1 肉眼观察 | 第59-60页 |
| 3.2.3.2 HE染色观察 | 第60-61页 |
| 3.2.4 M3R抗体转移实验 | 第61-66页 |
| 3.2.4.1 小鼠外分泌腺分泌功能的变化 | 第62-63页 |
| 3.2.4.2 组织学检测 | 第63-64页 |
| 3.2.4.3 腺体上的IgG结合 | 第64-66页 |
| 3.3 血清中IL-18浓度和pSS疾病的相关性研究 | 第66-71页 |
| 3.3.1 pSS病人与对照中的IL-18水平 | 第66-68页 |
| 3.3.2 pSS病人IL-18水平与疾病活动系数的相关性 | 第68-71页 |
| 第四章 讨论 | 第71-75页 |
| 4.1 抗M3R抗体在pSS病人血清中的检测 | 第71-72页 |
| 4.2 抗M3R胞外第二环多肽抗体在干燥综合症中的作用 | 第72-73页 |
| 4.3 血清中IL-18浓度和pSS疾病的相关性 | 第73-75页 |
| 第五章 结论 | 第75-76页 |
| 附录 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 主要科研成果 | 第83页 |
