| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩写说明 | 第7-11页 |
| 一 前言 | 第11-21页 |
| 1 G 蛋白及 G 蛋白偶联受体 | 第11-12页 |
| 1.1 G 蛋白 | 第11-12页 |
| 1.2 G 蛋白偶联受体 | 第12页 |
| 2 GRKs 与β-arrestins 在 GPCRs 信号转导中的作用 | 第12-15页 |
| 2.1 G 蛋白偶联受体的脱敏、内化 | 第12-13页 |
| 2.2 G 蛋白偶联受体激酶（GRKs） | 第13-14页 |
| 2.3 β-arrestins | 第14-15页 |
| 3 GPCRs 的二聚化 | 第15-17页 |
| 3.1 N/OFQ/ORL1 系统 | 第15-16页 |
| 3.2 Apelin/APJ 系统 | 第16页 |
| 3.3 N/OFQ/ORL1 系统和 apelin/APJ 系统的相关性 | 第16-17页 |
| 4 蛋白质相互作用研究方法 | 第17-19页 |
| 4.1 荧光共振能量转移（FRET）技术 | 第17-18页 |
| 4.2 生物发光共振能量转移（BRET）技术 | 第18-19页 |
| 5 课题的设计思路及目的意义 | 第19-21页 |
| 二 材料与方法 | 第21-37页 |
| 1 实验材料 | 第21-23页 |
| 1.1 细胞、质粒和菌株 | 第21页 |
| 1.2 抗体 | 第21页 |
| 1.3 生化试剂 | 第21-22页 |
| 1.4 试剂配制 | 第22-23页 |
| 1.5 主要仪器 | 第23页 |
| 2 实验方法 | 第23-37页 |
| 2.1 质粒构建 | 第23-32页 |
| 2.2 HEK293T 细胞的培养及转染 | 第32-33页 |
| 2.3 生物发光共振能量转移（BRET）检测 | 第33-34页 |
| 2.4 酶联免疫吸附实验（ELISA） | 第34-35页 |
| 2.5 激光共聚焦扫描显微镜观测 | 第35页 |
| 2.6 荧光共振能量转移（FRET）检测 | 第35-37页 |
| 三 结果 | 第37-58页 |
| 1. 表达载体的构建 | 第37-44页 |
| 1.1 重组质粒 ORL1-Venus 等的构建 | 第37-40页 |
| 1.2 突变体 APJ S335A-Rluc 等的构建 | 第40-44页 |
| 2. HEK293T 细胞的培养与转染 | 第44-45页 |
| 2.1 HEK293T 细胞的培养 | 第44-45页 |
| 2.2 HEK293T 细胞的转染 | 第45页 |
| 3 生物发光共振能量转移（BRET）检测 | 第45-54页 |
| 3.1 ORL1 信号转导特点的检测 | 第45-49页 |
| 3.2 APJ 信号转导特点的检测 | 第49-52页 |
| 3.3 BRET1检测 APJ 与 ORL1 之间的相互作用 | 第52-54页 |
| 4. 酶联免疫吸附实验（ELISA） | 第54-56页 |
| 5. 激光共聚焦扫描显微镜观测 | 第56-57页 |
| 6. 荧光共振能量转移（FRET）检测 APJ-ORL1 的二聚化 | 第57-58页 |
| 四 讨论 | 第58-63页 |
| 1. GRKs 和β-arrestins 对 ORL1 及 APJ 的调节 | 第58-61页 |
| 1.1 ORL1 的信号转导特点 | 第58-59页 |
| 1.2 APJ 的信号转导特点 | 第59页 |
| 1.3 G 蛋白非依赖的信号转导 | 第59-61页 |
| 2. APJ 与 ORL1 的二聚化 | 第61-62页 |
| 3. 进一步研究计划 | 第62-63页 |
| 五 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 综述 | 第68-76页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
