中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
引言 | 第11-13页 |
第一部分 人 B7-H4 基因转染细胞株的构建及其生物学功能的初步研究 | 第13-24页 |
1 材料 | 第13-15页 |
1.1 主要试剂 | 第13-14页 |
1.2 主要溶液的配制 | 第14页 |
1.3 实验仪器 | 第14-15页 |
1.4 实验动物 | 第15页 |
2 实验方法 | 第15-18页 |
2.1 人 B7-H4 野生型基因及突变体基因转染细胞的构建及鉴定 | 第15-17页 |
2.2 免疫荧光定位 B7-H4 在转基因细胞株中的表达 | 第17页 |
2.3 转基因细胞增殖率分析 | 第17页 |
2.4 转基因细胞异种移植成瘤实验 | 第17-18页 |
2.5 转基因细胞中细胞周期蛋白水平的检测 | 第18页 |
2.6 统计学分析 | 第18页 |
3 实验结果 | 第18-22页 |
3.1 B7-H4 转基因细胞的鉴定 | 第18-19页 |
3.2 免疫荧光观察 B7-H4 在转基因细胞中的定位 | 第19页 |
3.3 转基因细胞增殖率的分析 | 第19-20页 |
3.4 转基因细胞异种移植成瘤实验 | 第20-21页 |
3.5 转基因细胞中细胞周期蛋白的表达水平 | 第21-22页 |
4 讨论 | 第22-24页 |
第二部分 PI3K/AKT 信号通路对 B7-H4 亚细胞定位调节作用的研究 | 第24-37页 |
1 材料 | 第24-25页 |
1.1 主要试剂 | 第24-25页 |
1.2 主要仪器 | 第25页 |
2 实验方法 | 第25-29页 |
2.1 细胞培养 | 第25页 |
2.2 PI3K/AKT 信号通路与 B7-H4 相关性的确定 | 第25-27页 |
2.3 Western Blot 检测 PI3K/AKT 信号通路对 B7-H4 亚细胞定位的调节作用 | 第27-28页 |
2.4 PI3K/AKT 信号通路调节 B7-H4 亚细胞定位下游靶点的确定 | 第28-29页 |
2.5 统计学分析 | 第29页 |
3 实验结果 | 第29-34页 |
3.1 LY294002 和 LMB 作用浓度和时间的确定 | 第29-30页 |
3.2 免疫荧光检测细胞中 B7-H4 的定位 | 第30-31页 |
3.3 IGF-1 浓度确定 | 第31-32页 |
3.4 Western blot 检测 LY294002 和 IGF-1 处理前后 B7-H4 总蛋白的表达水平 | 第32页 |
3.5 Western blot 检测 LY294002 处理前后 B7-H4 在细胞内定位的变化 | 第32-33页 |
3.6 Western blot 检测 IGF-1 处理前后 B7-H4 在细胞内定位的变化 | 第33-34页 |
3.7 下游靶点确定 | 第34页 |
4 讨论 | 第34-37页 |
论文总结 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
综述 | 第42-51页 |
参考文献 | 第48-51页 |
攻读学位期间公开发表的论文 | 第51-52页 |
附录 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |