英文缩略词 | 第4-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 引言 | 第11-23页 |
1.1 J 亚群禽白血病病原学 | 第12-13页 |
1.2 J 亚群禽白血病病毒的致病性 | 第13页 |
1.3 J 亚群禽白血病的流行病学 | 第13-14页 |
1.4 J 亚群禽白血病的诊断与防治 | 第14-16页 |
1.5 J 亚群禽白血病疫苗的研究进展 | 第16-17页 |
1.6 黏膜免疫的简述 | 第17-18页 |
1.6.1 黏膜免疫的组成 | 第17页 |
1.6.2 黏膜免疫的功能和抗感染作用 | 第17-18页 |
1.6.3 黏膜免疫的途径 | 第18页 |
1.7 乳酸菌综述 | 第18-21页 |
1.7.1 乳酸菌的定义和分类 | 第18-19页 |
1.7.2 口服乳酸菌疫苗及其表达系统的特点 | 第19页 |
1.7.3 乳酸杆菌通过黏膜免疫表达外源抗原递送载体的研究进展 | 第19-21页 |
1.8 大肠杆菌-乳酸杆菌穿梭表达载体 pMG36e 的研究进展 | 第21-22页 |
1.8.1 pMG36e 的组成 | 第21-22页 |
1.8.2 pMG36e 的应用情况 | 第22页 |
1.9 研究的目的和意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-34页 |
2.1 毒株、细胞及实验动物 | 第23页 |
2.2 菌株和载体 | 第23页 |
2.3 主要仪器与材料 | 第23-24页 |
2.4 常用溶液与试剂 | 第24页 |
2.5 引物的设计与合成 | 第24-25页 |
2.6 方法 | 第25-30页 |
2.6.1 目的片段的扩增与鉴定 | 第25页 |
2.6.2 pMG36e-gp85 重组大肠杆菌载体的构建 | 第25-27页 |
2.6.3 pMG36e-gp85 基因重组乳酸杆菌表达载体的构建 | 第27-28页 |
2.6.4 从 pMG36e-gp85 基因重组乳酸杆菌中提取质粒及 PCR 鉴定 | 第28-29页 |
2.6.5 pMG36e-gp85 基因重组乳酸杆菌表达蛋白及 Western blot 的鉴定 | 第29-30页 |
2.6.6 利用流式细胞仪对外源蛋白在乳酸菌表面的定位检测 | 第30页 |
2.7 动物试验 | 第30-34页 |
2.7.1 免疫用重组乳酸菌体的制备 | 第30页 |
2.7.2 动物分组及免疫程序制定 | 第30-31页 |
2.7.3 血清样本采集 | 第31页 |
2.7.4 间接 ELISA 检测免疫鸡血清中 IgG 抗体 | 第31-34页 |
2.8 数据分析 | 第34页 |
3 结果 | 第34-39页 |
3.1 目的片段 gp85 基因的扩增 | 第34页 |
3.2 重组质粒的鉴定结果 | 第34-39页 |
3.2.1 重组质粒 pMG36e-gp85 的双酶切鉴定结果 | 第34-35页 |
3.2.2 重组质粒 pMG36e-gp85 的 PCR 鉴定结果 | 第35页 |
3.2.3 重组质粒 pMG36e-gp85 的测序结果 | 第35-37页 |
3.2.4 pMG36e-gp85 重组乳酸菌质粒的蛋白表达 Western-blot 结果 | 第37页 |
3.2.5 流式细胞术对外源蛋白在乳酸菌表面的定位检测结果 | 第37-38页 |
3.2.6 血清中 ALV-J gp85 特异性 IgG 的效价 | 第38-39页 |
3.2.7 攻毒保护性试验结果 | 第39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
5 结论 | 第41页 |
6 创新点 | 第41-42页 |
7 参考文献 | 第42-55页 |
8 附录常用试剂的配制 | 第55-58页 |
9 致谢 | 第58-59页 |
10 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录及著作 | 第59页 |