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J亚群禽白血病病毒gp85重组干酪乳杆菌表达及其免疫效果的研究

英文缩略词第4-7页
中文摘要第7-9页
Abstract第9-10页
1 引言第11-23页
    1.1 J 亚群禽白血病病原学第12-13页
    1.2 J 亚群禽白血病病毒的致病性第13页
    1.3 J 亚群禽白血病的流行病学第13-14页
    1.4 J 亚群禽白血病的诊断与防治第14-16页
    1.5 J 亚群禽白血病疫苗的研究进展第16-17页
    1.6 黏膜免疫的简述第17-18页
        1.6.1 黏膜免疫的组成第17页
        1.6.2 黏膜免疫的功能和抗感染作用第17-18页
        1.6.3 黏膜免疫的途径第18页
    1.7 乳酸菌综述第18-21页
        1.7.1 乳酸菌的定义和分类第18-19页
        1.7.2 口服乳酸菌疫苗及其表达系统的特点第19页
        1.7.3 乳酸杆菌通过黏膜免疫表达外源抗原递送载体的研究进展第19-21页
    1.8 大肠杆菌-乳酸杆菌穿梭表达载体 pMG36e 的研究进展第21-22页
        1.8.1 pMG36e 的组成第21-22页
        1.8.2 pMG36e 的应用情况第22页
    1.9 研究的目的和意义第22-23页
2 材料与方法第23-34页
    2.1 毒株、细胞及实验动物第23页
    2.2 菌株和载体第23页
    2.3 主要仪器与材料第23-24页
    2.4 常用溶液与试剂第24页
    2.5 引物的设计与合成第24-25页
    2.6 方法第25-30页
        2.6.1 目的片段的扩增与鉴定第25页
        2.6.2 pMG36e-gp85 重组大肠杆菌载体的构建第25-27页
        2.6.3 pMG36e-gp85 基因重组乳酸杆菌表达载体的构建第27-28页
        2.6.4 从 pMG36e-gp85 基因重组乳酸杆菌中提取质粒及 PCR 鉴定第28-29页
        2.6.5 pMG36e-gp85 基因重组乳酸杆菌表达蛋白及 Western blot 的鉴定第29-30页
        2.6.6 利用流式细胞仪对外源蛋白在乳酸菌表面的定位检测第30页
    2.7 动物试验第30-34页
        2.7.1 免疫用重组乳酸菌体的制备第30页
        2.7.2 动物分组及免疫程序制定第30-31页
        2.7.3 血清样本采集第31页
        2.7.4 间接 ELISA 检测免疫鸡血清中 IgG 抗体第31-34页
    2.8 数据分析第34页
3 结果第34-39页
    3.1 目的片段 gp85 基因的扩增第34页
    3.2 重组质粒的鉴定结果第34-39页
        3.2.1 重组质粒 pMG36e-gp85 的双酶切鉴定结果第34-35页
        3.2.2 重组质粒 pMG36e-gp85 的 PCR 鉴定结果第35页
        3.2.3 重组质粒 pMG36e-gp85 的测序结果第35-37页
        3.2.4 pMG36e-gp85 重组乳酸菌质粒的蛋白表达 Western-blot 结果第37页
        3.2.5 流式细胞术对外源蛋白在乳酸菌表面的定位检测结果第37-38页
        3.2.6 血清中 ALV-J gp85 特异性 IgG 的效价第38-39页
        3.2.7 攻毒保护性试验结果第39页
4 讨论第39-41页
5 结论第41页
6 创新点第41-42页
7 参考文献第42-55页
8 附录常用试剂的配制第55-58页
9 致谢第58-59页
10 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录及著作第59页

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