| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第12-26页 |
| 第一章 CD147及纳米抗体的研究进展 | 第12-26页 |
| 1.1 CD147的研究进展 | 第12-18页 |
| 1.1.1 CD147分子的结构 | 第12-13页 |
| 1.1.2 CD147分子的分布 | 第13-14页 |
| 1.1.3 CD147与肿瘤 | 第14-16页 |
| 1.1.4 CD147的调控机制研究 | 第16-17页 |
| 1.1.5 CD147的临床应用 | 第17-18页 |
| 1.2 纳米抗体的研究进展 | 第18-24页 |
| 1.2.1 纳米抗体的发现 | 第18-19页 |
| 1.2.2 纳米抗体的结构及特性 | 第19-20页 |
| 1.2.3 纳米抗体制备的方法 | 第20-22页 |
| 1.2.4 纳米抗体的应用 | 第22-24页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 试验研究 | 第26-64页 |
| 第二章 抗CD147纳米抗体的筛选及原核表达 | 第26-43页 |
| 2.1 材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第26页 |
| 2.1.2 试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 菌种及质粒 | 第26-27页 |
| 2.1.4 引物设计 | 第27页 |
| 2.1.5 培养基及主要溶液配制 | 第27-29页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第29页 |
| 2.2 方法 | 第29-35页 |
| 2.2.1 骆驼免疫及CD147免疫文库构建 | 第29页 |
| 2.2.2 噬菌体文库的救援与扩增 | 第29-30页 |
| 2.2.3 噬菌体展示文库滴度测定 | 第30页 |
| 2.2.4 辅助噬菌体滴度测定和扩增 | 第30-31页 |
| 2.2.5 抗CD147纳米抗体的筛选 | 第31-32页 |
| 2.2.6 phage-ELISA鉴定阳性克隆 | 第32-33页 |
| 2.2.7 表达载体构建和纳米抗体及融合蛋白表达纯化 | 第33-35页 |
| 2.3 结果与分析 | 第35-41页 |
| 2.3.1 抗CD147纳米抗体的制备策略 | 第35-36页 |
| 2.3.2 纳米抗体的文库构建分析 | 第36-37页 |
| 2.3.3 抗CD147纳米抗体筛选分析 | 第37-40页 |
| 2.3.4 纳米抗体表达纯化分析 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-42页 |
| 2.5 小结 | 第42-43页 |
| 第三章 抗CD147纳米抗体的表征及靶向性研究 | 第43-56页 |
| 3.1 材料 | 第43-44页 |
| 3.1.1 试验动物 | 第43页 |
| 3.1.2 试剂 | 第43页 |
| 3.1.3 细胞株 | 第43页 |
| 3.1.4 主要溶液配制 | 第43-44页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第44页 |
| 3.2 方法 | 第44-48页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第44-45页 |
| 3.2.2 纳米抗体及融合蛋白粒径测定 | 第45页 |
| 3.2.3 透射电镜观察纳米抗体 | 第45页 |
| 3.2.4 纳米抗体HRP的标记 | 第45-46页 |
| 3.2.5 结合力测定 | 第46页 |
| 3.2.6 Westernbloting | 第46-47页 |
| 3.2.7 细胞荧光实验 | 第47页 |
| 3.2.8 小动物荧光成像 | 第47-48页 |
| 3.3 结果 | 第48-54页 |
| 3.3.1 纳米抗体粒径及电镜观察结果分析 | 第48页 |
| 3.3.2 在蛋白水平验证纳米抗体与CD147结合的特异性 | 第48-49页 |
| 3.3.3 亲和力分析 | 第49-50页 |
| 3.3.4 纳米抗体特异性识别肿瘤表面的CD147分子 | 第50-52页 |
| 3.3.5 纳米抗体在动物体内的靶向性 | 第52-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-55页 |
| 3.5 小结 | 第55-56页 |
| 第四章 纳米抗体及其偶联阿霉素的功能研究 | 第56-64页 |
| 4.1 材料 | 第56-57页 |
| 4.1.1 试验动物 | 第56页 |
| 4.1.2 试剂 | 第56页 |
| 4.1.3 细胞株 | 第56页 |
| 4.1.4 主要溶液配制 | 第56页 |
| 4.1.5 主要仪器 | 第56-57页 |
| 4.2 方法 | 第57-58页 |
| 4.2.1 流式细胞术检测动物体内血清中的趋化因子 | 第57页 |
| 4.2.2 DOX-11-1的合成 | 第57页 |
| 4.2.3 实时观察药物在细胞上的定位 | 第57-58页 |
| 4.2.4 药物对细胞的体外杀伤作用 | 第58页 |
| 4.2.5 细胞凋亡检测 | 第58页 |
| 4.3 结果分析 | 第58-62页 |
| 4.3.1 纳米抗体11-1对血清中趋化因子的影响 | 第58-59页 |
| 4.3.2 DOX-11-1的化学合成 | 第59-60页 |
| 4.3.3 实时观察药物在细胞上的分布 | 第60-61页 |
| 4.3.4 药物对肿瘤细胞体外杀伤作用 | 第61页 |
| 4.3.5 药物对细胞凋亡的影响 | 第61-62页 |
| 4.4 讨论 | 第62-63页 |
| 4.5 小结 | 第63-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 作者简介 | 第74页 |
