| 摘要 | 第4-5页 |
| Summary | 第5-6页 |
| 缩略词对照表 | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1 研究背景 | 第10-11页 |
| 2 细胞重编程的研究 | 第11-13页 |
| 2.1 体细胞核移植技术 | 第11-12页 |
| 2.2 细胞融合技术 | 第12页 |
| 2.3 诱导多能干细胞技术 | 第12-13页 |
| 3 基因编辑技术的研究 | 第13-16页 |
| 3.1 锌指核酸酶技术 | 第14页 |
| 3.2 TALENs技术 | 第14-15页 |
| 3.3 CRISPR/Cas9系统 | 第15-16页 |
| 4 研究相关基因的介绍 | 第16-17页 |
| 4.1 Nanog基因 | 第16页 |
| 4.2 绿色荧光蛋白基因 | 第16-17页 |
| 4.3 Kan/neoR基因 | 第17页 |
| 5 本研究的目的意义及主要内容 | 第17-19页 |
| 第二章 表达载体的构建 | 第19-31页 |
| 1 材料和试剂 | 第19-27页 |
| 1.1 试验材料 | 第19-20页 |
| 1.2 试验方法 | 第20-27页 |
| 2 结果 | 第27-29页 |
| 2.1 质粒改造MCS区验证 | 第27页 |
| 2.2 表达载体pUC-up双酶切验证 | 第27-28页 |
| 2.3 表达载体pUC-up-down双酶切验证 | 第28页 |
| 2.4 表达载体pUC-up-pgk-down双酶切验证 | 第28-29页 |
| 2.5 表达载体pUC-up-eGFP-pgk-down测序结果 | 第29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 切割载体的构建 | 第31-37页 |
| 1 材料与方法 | 第31-34页 |
| 1.1 试验材料 | 第31-32页 |
| 1.2 试验方法 | 第32-34页 |
| 2 结果 | 第34-36页 |
| 2.1 pX330质粒及酶切图谱 | 第34-35页 |
| 2.2 pX330切割载体的检测 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 稳定转染细胞系的获得 | 第37-49页 |
| 1 材料与方法 | 第37-42页 |
| 1.1 试验材料 | 第37-38页 |
| 1.2 试验方法 | 第38-42页 |
| 2 结果 | 第42-46页 |
| 2.1 切割质粒转染结果 | 第42-43页 |
| 2.2 T7E1酶切检验结果 | 第43-44页 |
| 2.3 表达载体和切割载体同时转染结果 | 第44页 |
| 2.4 添加G418药物筛选后结果 | 第44-45页 |
| 2.5 敲入基因片段eGFP-Neo的检测结果 | 第45-46页 |
| 2.6 Neo基因表达的检测结果 | 第46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| 第五章 iPS细胞诱导条件探索 | 第49-55页 |
| 1 材料与方法 | 第49-52页 |
| 1.1 试验材料 | 第49-50页 |
| 1.2 试验方法 | 第50-52页 |
| 2 结果 | 第52-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 附表 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 导师简介 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70-71页 |