不同培养方式对人肺癌及脐静脉内皮细胞基因表达及差异的影响分析
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 研究现状、成果 | 第11页 |
| 研究目的、方法 | 第11-13页 |
| 一、脐静脉血管内皮细胞和肺癌细胞的混合培养 | 第13-19页 |
| ·实验对象 | 第13页 |
| ·肿瘤细胞株 | 第13页 |
| ·培养基及试剂 | 第13页 |
| ·器材 | 第13页 |
| ·实验方法 | 第13-15页 |
| ·细胞培养和处理 | 第14页 |
| ·HUVEC细胞和LTEP-A-2细胞混合培养 | 第14-15页 |
| ·活细胞计数 | 第15页 |
| ·唾哇蓝(MTT)比色实验和绘制生长曲线 | 第15页 |
| ·结果 | 第15-18页 |
| ·细胞的生长状态 | 第15-16页 |
| ·活细胞计数结果 | 第16-17页 |
| ·MTT比色试验结果 | 第17-18页 |
| ·讨论 | 第18页 |
| ·小结 | 第18-19页 |
| 二、基因芯片筛选细胞混合培养状态下差异表达的基因 | 第19-36页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第19页 |
| ·实验试剂 | 第19页 |
| ·实验仪器 | 第19页 |
| ·两种细胞的单独及混合培养 | 第19页 |
| ·流式细胞仪分离混合培养细胞 | 第19-20页 |
| ·提取总RNA | 第20页 |
| ·RNA质量检查 | 第20-21页 |
| ·基因芯片筛选差异表达基因 | 第21-23页 |
| ·探针标记与杂交 | 第21-22页 |
| ·筛选标准简要说明 | 第22-23页 |
| ·结果 | 第23-27页 |
| ·RNA提取结果及电泳图 | 第23-24页 |
| ·芯片杂交结果 | 第24-27页 |
| ·讨论 | 第27-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 三、差异表达基因的RT-PCR验证 | 第36-42页 |
| ·对象和方法 | 第36-39页 |
| ·细胞培养及总RAN的提取 | 第36页 |
| ·引物合成 | 第36页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-39页 |
| ·结果 | 第39-40页 |
| ·目标基因终产物电泳图 | 第39页 |
| ·扩增曲线及溶解曲线 | 第39页 |
| ·Real-time PCR和基因芯片数据比较 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录 | 第47-56页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第56-57页 |
| 综述 | 第57-68页 |
| 肿瘤血管生成相关基因及其功能研究进展 | 第57-66页 |
| 综述参考文献 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
