中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略语/符号说明 | 第11-13页 |
前言 | 第13-16页 |
研究现状、成果 | 第13-15页 |
研究目的、方法 | 第15-16页 |
一、人退变腰椎间盘髓核细胞miRNA表达谱分析 | 第16-33页 |
1.1 实验材料 | 第16-17页 |
1.1.1 取材和分组 | 第16页 |
1.1.2 实验仪器设备 | 第16-17页 |
1.1.3 主要试剂 | 第17页 |
1.2 实验方法 | 第17-19页 |
1.2.1 髓核细胞的分离和培养 | 第17页 |
1.2.2 髓核细胞的鉴定 | 第17-18页 |
1.2.3 数据校正和差异探针筛选 | 第18页 |
1.2.4 聚类分析 | 第18页 |
1.2.5 靶基因预测分析 | 第18页 |
1.2.6 靶基因Gene Ontology(GO)分析 | 第18页 |
1.2.7 靶基因Pathway分析 | 第18-19页 |
1.2.8 统计学方法 | 第19页 |
1.3 结果 | 第19-24页 |
1.3.1 髓核细胞分离、培养情况 | 第19页 |
1.3.2 髓核细胞的鉴定 | 第19-20页 |
1.3.3 差异性表达的miRNA | 第20页 |
1.3.4 聚类分析结果 | 第20-22页 |
1.3.5 靶基因预测 | 第22页 |
1.3.6 靶基因GO分析 | 第22页 |
1.3.7 靶基因参与信号传导通路分析 | 第22-24页 |
1.4 讨论 | 第24-32页 |
1.4.1 椎间盘退变机制的研究 | 第24-26页 |
1.4.2 miRNA的特点、功能及与人类疾病的关系 | 第26-30页 |
1.4.3 研究miRNA基因在腰椎退行性疾病中表达谱的意义 | 第30-32页 |
1.5 小结 | 第32-33页 |
二、miR-494和miR-513a-5p在退变髓核组织中差异性表达的验证 | 第33-51页 |
2.1 实验材料 | 第33-34页 |
2.1.1 标本来源和分组 | 第33页 |
2.1.2 主要试剂和仪器 | 第33页 |
2.1.3 引物合成 | 第33-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-37页 |
2.2.1 组织的保存及处理方法 | 第34页 |
2.2.2 总RNA提取 | 第34页 |
2.2.3 miRNA反转录反应 | 第34-35页 |
2.2.4 定量PCR | 第35-36页 |
2.2.5 数据分析 | 第36-37页 |
2.3 结果 | 第37-44页 |
2.3.1 总RNA提取结果 | 第37页 |
2.3.2 内参基因—U6在不同样本中的数据分析 | 第37-40页 |
2.3.3 miR-513a-5p表达量分析 | 第40-42页 |
2.3.4 miR-494表达量分析 | 第42-44页 |
2.4 讨论 | 第44-50页 |
2.4.1 实时荧光定量PCR | 第44-45页 |
2.4.2 miR-494的研究及与疾病之间的关系 | 第45-47页 |
2.4.3 miR-513a-5p的研究及与疾病之间的关系 | 第47-48页 |
2.4.4 IVDD相关基因的研究 | 第48-50页 |
2.5 小结 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第61-62页 |
综述 | 第62-77页 |
综述参考文献 | 第71-77页 |
致谢 | 第77页 |