| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第13-31页 |
| 1.1 基因治疗简介 | 第13-16页 |
| 1.2 肿瘤及其微环境 | 第16-20页 |
| 1.2.1 肿瘤 | 第16页 |
| 1.2.2 肿瘤微环境 | 第16-20页 |
| 1.3 基于pH响应特性的非病毒基因输送体系 | 第20-28页 |
| 1.3.1 pH催化可降解聚合物 | 第20-23页 |
| 1.3.2 组氨酸修饰的聚合物载体 | 第23-25页 |
| 1.3.3 烷基丙烯酸酯类聚合物 | 第25-28页 |
| 1.4 聚乙烯亚胺 | 第28-29页 |
| 1.5 课题的提出 | 第29-31页 |
| 第二章 实验材料与仪器 | 第31-35页 |
| 2.1 实验试剂 | 第31-32页 |
| 2.2 实验仪器 | 第32-33页 |
| 2.3 质粒 | 第33页 |
| 2.4 细胞 | 第33页 |
| 2.5 工作溶液 | 第33-35页 |
| 2.5.1 常规溶液 | 第33-34页 |
| 2.5.2 实验所用MTT | 第34-35页 |
| 第三章 可降解电荷反转PEI衍生物用于基因输送的研究 | 第35-67页 |
| 3.1 引言 | 第35-37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-46页 |
| 3.2.1 质粒扩增与提取 | 第37页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第37-38页 |
| 3.2.3 p(EOMA-POMA)共聚物(pEP)的合成 | 第38-39页 |
| 3.2.4 p(EOMA-POMA)共聚物(pEP)的转变pH检测 | 第39页 |
| 3.2.5 p(EOMA-POMA)共聚物(pEP)的溶血能力检测 | 第39页 |
| 3.2.6 PEI-DMAEA的合成 | 第39-40页 |
| 3.2.7 PEI-DMAEA的季胺化 | 第40页 |
| 3.2.8 PEI-DMAEA在不同pH缓冲溶液中的电荷变化情况 | 第40-41页 |
| 3.2.9 不同程度季胺化的PEI-DMAEA在pH 7.4缓冲溶液中的电荷变化 | 第41页 |
| 3.2.10 PEI-DMAEA/DNA纳米复合物的制备 | 第41页 |
| 3.2.11 pEP/PEI-DMAEA/DNA纳米复合物的制备 | 第41页 |
| 3.2.12 纳米复合物物理性能测定 | 第41-42页 |
| 3.2.13 DNA凝胶阻滞电泳实验 | 第42页 |
| 3.2.14 细胞毒性实验 | 第42-43页 |
| 3.2.15 pEP/PEI-DMAEA/DNA纳米复合物的细胞摄取量检测 | 第43-44页 |
| 3.2.16 pEP/PEI-DMAEA/DNA纳米复合物亚细胞分布实验 | 第44页 |
| 3.2.17 pEP/PEI-DMAEA/DNA纳米复合物的体外细胞转染 | 第44-45页 |
| 3.2.18 激光共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白表达 | 第45-46页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第46-66页 |
| 3.3.1 阴离子聚合物pEP的化学表征 | 第46-48页 |
| 3.3.2 阴离子聚合物pEP的亲疏水转变pH检测 | 第48-49页 |
| 3.3.3 阴离子聚合物pEP的溶血实验 | 第49页 |
| 3.3.4 PEI-DMAEA的化学表征 | 第49-50页 |
| 3.3.5 PEI-DMAEA的细胞毒性检测 | 第50-51页 |
| 3.3.6 PEI-DMAEA在不同pH缓冲溶液中的电荷变化情况 | 第51-52页 |
| 3.3.7 PEI-DMAEA/DNA纳米复合物的表征 | 第52-53页 |
| 3.3.8 DNA从PEI-DMAEA/DNA纳米复合物中的释放 | 第53-54页 |
| 3.3.9 PEI-DMAEA/DNA纳米复合物的体外基因转染 | 第54-55页 |
| 3.3.10 不同程度季胺化的PEI-DMAEA在pH 7.4缓冲溶液中的电荷变化 | 第55-56页 |
| 3.3.11 pEP/PEI-DMAEA/DNA纳米复合物的表征 | 第56-58页 |
| 3.3.12 pEP/PEI-DMAEA/DNA纳米复合物的表征 | 第58-59页 |
| 3.3.13 pEP/PEI-DMAEA/DNA中聚合物与DNA络合及对DNA的保护 | 第59-60页 |
| 3.3.14 pEP/PEI-DMAEA/DNA纳米复合物的细胞毒性检测 | 第60-61页 |
| 3.3.15 pEP/PEI-DMAEA/DNA纳米复合物的细胞摄取和亚细胞分布 | 第61-63页 |
| 3.3.16 pEP/PEI-DMAEA/DNA复合物介导的体外基因转染 | 第63-66页 |
| 3.4 本章小结 | 第66-67页 |
| 第四章 聚赖氨酸苄酯用于基因输送的研究 | 第67-81页 |
| 4.1 引言 | 第67-68页 |
| 4.2 实验方法 | 第68-73页 |
| 4.2.1 聚赖氨酸苄酯的合成 | 第68-69页 |
| 4.2.2 聚赖氨酸苄酯在不同pH缓冲溶液中的水解 | 第69-70页 |
| 4.2.3 细胞毒性实验 | 第70页 |
| 4.2.4 pLLB/DNA纳米复合物的制备 | 第70-71页 |
| 4.2.5 纳米复合物理化特性表征 | 第71页 |
| 4.2.6 DNA凝胶阻滞电泳和酶解实验 | 第71页 |
| 4.2.7 纳米复合物亚细胞分布实验 | 第71-72页 |
| 4.2.8 pLLB/DNA纳米复合物的体外基因转染 | 第72-73页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第73-80页 |
| 4.3.1 聚赖氨酸苄酯的化学表征 | 第73-74页 |
| 4.3.2 聚赖氨酸苄酯在不同pH缓冲溶液中的水解曲线 | 第74页 |
| 4.3.3 聚赖氨酸苄酯的细胞毒性 | 第74-75页 |
| 4.3.4 pLLB/DNA纳米复合物的表征 | 第75-76页 |
| 4.3.5 pLLB与DNA的络合及对DNA的保护作用 | 第76-78页 |
| 4.3.6 pLLB/DNA纳米复合物的细胞摄取和亚细胞分布 | 第78-79页 |
| 4.3.7 pLLB/DNA纳米复合物的体外基因转染 | 第79-80页 |
| 4.4 本章小结 | 第80-81页 |
| 第五章 结论与展望 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-89页 |
| 作者简介 | 第89页 |
