| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第12-28页 |
| 1.1 植物villin研究进展 | 第12-18页 |
| 1.1.1 villin/gelsolin/fragmin超级家族蛋白的分子构成 | 第13页 |
| 1.1.2 植物villin/gelsolin/fragmin超级家族发现 | 第13-14页 |
| 1.1.3 villin的生化活性及调控 | 第14-16页 |
| 1.1.4 villin的细胞功能 | 第16-18页 |
| 1.2 植物非生物胁迫 | 第18-23页 |
| 1.2.1 植物耐盐研究进展 | 第19-20页 |
| 1.2.2 植物耐热研究进展 | 第20-23页 |
| 1.3 转录组测序 | 第23-26页 |
| 1.3.1 转录组测序简介 | 第23-24页 |
| 1.3.2 RNA-seq研究进展 | 第24页 |
| 1.3.3 RNA-seq工作流程 | 第24-26页 |
| 1.3.4 RNA-seq需要注意的问题 | 第26页 |
| 1.4 本研究的目的意义 | 第26-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-30页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第28页 |
| 2.1.2 菌种和质粒 | 第28页 |
| 2.1.3 试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.4 PCR引物 | 第29-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-48页 |
| 2.2.1 棉花培养与处理 | 第30页 |
| 2.2.2 植物表达载体GhVLN1-GFP的构建 | 第30-35页 |
| 2.2.3 GhVLN1在烟草中瞬时表达 | 第35-36页 |
| 2.2.4 GhVLN1在酵母中表达 | 第36-37页 |
| 2.2.5 拟南芥培养与筛选 | 第37-38页 |
| 2.2.6 GhVLN1过表达拟南芥的鉴定 | 第38-41页 |
| 2.2.9 RNA-seq的拟南芥样品处理 | 第41-42页 |
| 2.2.10 RNA-seq数据分析 | 第42-44页 |
| 2.2.11 植物干扰表达载体构建与转化 | 第44-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-90页 |
| 3.1 GhVLN1的亚细胞定位分析 | 第48-50页 |
| 3.1.1 植物表达载体构建 | 第48-49页 |
| 3.1.2 GhVLN1在烟草叶片细胞中瞬时表达 | 第49-50页 |
| 3.2 GhVLN1在酵母中表达及功能初探 | 第50-52页 |
| 3.2.1 GhVLN1转化粟酒裂殖酵母 | 第50页 |
| 3.2.2 GhVLN1过表达酵母表型观察 | 第50-52页 |
| 3.3 GhVLN1过表达拟南芥PCR鉴定 | 第52页 |
| 3.4 GhVLN1过表达拟南芥qRT-PCR分析 | 第52-53页 |
| 3.5 GhVLN1过表达拟南芥表现型观察 | 第53-58页 |
| 3.5.1 GhVLN1过表达拟南芥根长观察分析 | 第53-55页 |
| 3.5.2 GhVLN1过表达拟南芥的根部细胞长度观察分析 | 第55-56页 |
| 3.5.3 GhVLN1过表达拟南芥根毛长度观察分析 | 第56-57页 |
| 3.5.4 GhVLN1过表达拟南芥根部细胞骨架观察分析 | 第57-58页 |
| 3.6 GhVLN1顺势作用元件分析 | 第58-60页 |
| 3.7 GhVLN1诱导表达分析 | 第60页 |
| 3.8 GhVLN1过表达拟南芥耐盐性鉴定 | 第60-63页 |
| 3.8.1 GhVLN1过表达拟南芥种子萌发期耐盐性鉴定 | 第60-62页 |
| 3.8.2 GhVLN1过表达拟南芥幼苗期耐盐性鉴定 | 第62-63页 |
| 3.9 GhVLN1过表达拟南芥耐热性鉴定 | 第63-64页 |
| 3.10 GhVLN1过表达拟南芥RNA-seq分析 | 第64-86页 |
| 3.10.1 RNA提取及质量检测 | 第64-65页 |
| 3.10.2 测序质量评估 | 第65-67页 |
| 3.10.3 qRT-PCR验证测序结果 | 第67-68页 |
| 3.10.4 差异表达基因筛选 | 第68-69页 |
| 3.10.5 部分上调表达基因分析 | 第69-74页 |
| 3.10.6 差异基因功能显著性富集分析 | 第74-78页 |
| 3.10.7 差异显著基因功能分类 | 第78-82页 |
| 3.10.8 KEGG Pathway显著性富集分析 | 第82-86页 |
| 3.11 植物干扰表达载体pHellsgate4-GhVLN1构建 | 第86-87页 |
| 3.12 植物干扰表达载体pHellsgate4-GhVLN1转化棉花 | 第87-90页 |
| 3.12.1 棉花干扰表达GhVLN1植株的获得 | 第87-88页 |
| 3.12.2 棉花干扰表达GhVLN1植株的阳性鉴定 | 第88-90页 |
| 4 讨论 | 第90-94页 |
| 4.1 GhVLN1酵母细胞骨架观察 | 第90页 |
| 4.2 qRT-PCR引物设计 | 第90页 |
| 4.3 GhVLN1过表达拟南芥表现型鉴定 | 第90-91页 |
| 4.4 GhVLN1过表达拟南芥盐、热胁迫耐受力的讨论 | 第91-94页 |
| 5 全文结论 | 第94-96页 |
| 本研究创新之处 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-112页 |
| 致谢 | 第112页 |
