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MiR-367-3p抑制TGF-β诱导的非小细胞肺癌上皮—间质转化的作用机制

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
一、前言第12-15页
二、材料与方法第15-35页
    2.1 材料第15-20页
        2.1.1 细胞株与组织样本第15页
        2.1.2 实验用仪器和试剂第15-17页
        2.1.3 常用溶液的配制第17-20页
    2.2 方法第20-35页
        2.2.1 生物信息学方法第20页
        2.2.2 细胞培养第20-22页
        2.2.3 细胞和组织中总RNA的提取第22-23页
        2.2.4 实时荧光定量PCR(SYBR染料法)第23-25页
        2.2.5 细胞裂解和总蛋白的提取第25页
        2.2.6 Western blot第25-29页
        2.2.7 microRNA mimics/siRNA瞬时转染细胞第29-30页
        2.2.8 重组质粒的构建第30-32页
        2.2.9 重组质粒和microRNA瞬时共转染细胞以及荧光素酶报告实验第32-33页
        2.2.10 细胞迁移与侵袭能力Transwell试验第33-34页
        2.2.11 统计方法与分析结果第34-35页
三、结果第35-47页
    3.1 NSCLC细胞中,ZEB2与miR3673p的靶向作用关系第35-38页
        3.1.1 查阅文献和生物信息学软件分析预测第35页
        3.1.2 双荧光素酶报告基因活性检测结果证明miR3673p可以直接与ZEB2基因 3’UTR种子序列互补结合第35-38页
        3.1.3 miR3673p对A549和H226细胞内源性ZEB2基因的调控第38页
    3.2 不同NSCLC细胞株和HBE中ZEB2与miR3673p的表达水平检测第38-39页
    3.3 NSCLC组织中miR3673p和ZEB2基因的m RNA表达水平以及其相关关系验证第39-40页
        3.3.1 NSCLC患者组织样本中有远端淋巴结转移和没有淋巴结转移的非小细胞肺癌组织样本种miR3673p的差异性表达第39页
        3.3.2 NSCLC患者组织样本中有远端淋巴结转移和没有淋巴结转移的非小细胞肺癌组织样本之间的ZEB2基因mRNA的差异性表达第39-40页
        3.3.3 NSCLC组织中miR3673p和ZEB2的mRNA表达相关性验证第40页
    3.4 NSCLC细胞中miR3673p抑制TGF-β 诱导的上皮-间质转化(EMT)第40-41页
    3.5 NSCLC细胞中miR3673p对其TGF-β 诱导的细胞EMT表型迁移与浸润的抑制第41-43页
    3.6 NSCLC细胞中,ZEB2基因对其迁移与浸润作用影响第43-47页
        3.6.1 NSCLC细胞中,si-ZEB2干扰ZEB2基因的mRNA和蛋白的表达第43页
        3.6.2 NSCLC细胞中si-ZEB2抑制TGF-β 诱导的上皮-间质转化(EMT)第43-44页
        3.6.3 NSCLC 细胞中,干扰 ZEB2 基因抑制细胞的迁移与浸润的表型研究第44-47页
四、全文总结第47-49页
五、全文讨论第49-51页
六、参考文献第51-57页
附录:中英文对照第57-58页
攻读硕士学位期间公开发表的学术论文第58-59页
致谢第59-60页

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