| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 中英文缩略词表 | 第12-14页 |
| 1. 前言 | 第14-17页 |
| 2. 材料与方法 | 第17-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-21页 |
| 2.1.1 细胞来源 | 第17页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第19-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-32页 |
| 2.2.1 实验流程图 | 第21-22页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2.3 RT-PCR检测SHEE及SHEEC细胞中NS、PI3K、AKT和mTOR mRNA的表达 | 第23-26页 |
| 2.2.4 Western Blot检测SHEE及SHEEC细胞中NS、PI3K和AKT基因的蛋白表达情况 | 第26-29页 |
| 2.2.5 细胞转染 | 第29-31页 |
| 2.2.6 流式细胞仪检测干扰NS基因前后各组细胞的凋亡率 | 第31页 |
| 2.2.7 MTT法检测干扰NS后细胞增殖活性 | 第31-32页 |
| 2.3 统计学方法 | 第32-33页 |
| 3. 结果 | 第33-45页 |
| 3.1 RT-PCR检测SHEE和SHEEC细胞中NS、PI3K、AKT和mTOR的mRNA表达水平 | 第33-37页 |
| 3.1.1 RNA纯度和完整性检测结果 | 第33页 |
| 3.1.2 Real-Time PCR结果 | 第33-37页 |
| 3.2 Western Blot检测SHEE和SHEEC细胞中NS、PI3K和p-AKT蛋白的表达水平 | 第37-38页 |
| 3.2.1 BCA法检测蛋白浓度 | 第37页 |
| 3.2.2 SHEE和SHEEC细胞中NS、PI3K及p-AKT蛋白的表达水平 | 第37-38页 |
| 3.3 抑制SHEEC细胞中NS基因后对PI3K/AKT/mTOR信号转导通路中相关因子的影响 | 第38-45页 |
| 3.3.1 细胞转染后荧光显微镜下观察结果 | 第38页 |
| 3.3.2 流式细胞仪检测转染效率 | 第38-39页 |
| 3.3.3 RT-PCR检测干扰效果 | 第39-40页 |
| 3.3.4 干扰SHEEC细胞中NS表达后PI3K、AKT、mTOR和GβL mRNA的表达 | 第40-41页 |
| 3.3.5 干扰SHEEC细胞中NS表达后PI3K和p-AKT蛋白的表达 | 第41-42页 |
| 3.3.6 细胞凋亡率检测 | 第42-43页 |
| 3.3.7 MTT检测抑制SHEEC细胞中NS基因表达后对细胞增殖的影响 | 第43-45页 |
| 4. 讨论 | 第45-50页 |
| 4.1 NS在SHEEC细胞中的表达及意义 | 第45-46页 |
| 4.2 PI3K/AKT/mTOR信号转导通路相关分子在SHEEC细胞中的表达及意义 | 第46-47页 |
| 4.3 NS表达下调对PI3K/AKT/mTOR的影响 | 第47-48页 |
| 4.4 NS表达下调对细胞凋亡的影响 | 第48页 |
| 4.5 NS表达下调对细胞增殖的影响 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 综述 核干细胞因子的研究进展 | 第56-67页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 个人简历 | 第67-68页 |
| 1.基本信息 | 第67页 |
| 2.硕士期间发表的论文 | 第67页 |
| 3.参加的研究项目 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
