| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 引言与文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 心脏发育及先天性心脏病 | 第11-13页 |
| 1.1.1 心脏发育概况 | 第11-12页 |
| 1.1.2 先天性心脏病 | 第12-13页 |
| 1.2 简析小鼠胚胎心脏发育的分子机制 | 第13页 |
| 1.3 BMP信号途径与小鼠心脏发育 | 第13-16页 |
| 1.3.1 BMP家族 | 第13页 |
| 1.3.2 BMP信号通路 | 第13-16页 |
| 1.4 小鼠心脏发育与BMP信号通路的作用机制 | 第16-17页 |
| 1.5 流感病毒及其致病机制 | 第17-20页 |
| 1.5.1 流感病毒概况 | 第17-18页 |
| 1.5.2 流感病毒致病的主要分子机制 | 第18-20页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-33页 |
| 2.1 主要材料、试剂与设备 | 第21-24页 |
| 2.1.1 主要实验仪器和耗材 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要的试剂配制 | 第22-23页 |
| 2.1.4 质粒和菌种 | 第23页 |
| 2.1.5 病毒和实验动物 | 第23页 |
| 2.1.6 生物信息学分析的主要软件与数据库 | 第23-24页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第24-33页 |
| 2.2.1 小鼠交配 | 第24页 |
| 2.2.2 流感病毒攻击 | 第24页 |
| 2.2.3 材料的收集 | 第24页 |
| 2.2.4 胚胎心脏组织总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.5 cDNA文库的合成 | 第25-26页 |
| 2.2.6 引物设计与合成 | 第26页 |
| 2.2.7 PCR反应 | 第26页 |
| 2.2.8 PCR产物的纯化回收 | 第26-27页 |
| 2.2.9 产物与载体的连接 | 第27页 |
| 2.2.10 转化 | 第27页 |
| 2.2.11 质粒抽提与鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.12 原位杂交探针的构建 | 第28-30页 |
| 2.2.13 胚胎原位杂交 | 第30-33页 |
| 3 实验结果与分析 | 第33-47页 |
| 3.1 小鼠原位杂交探针的制备 | 第33-37页 |
| 3.1.1 BMP4探针的合成 | 第33页 |
| 3.1.2 Nkx2.5 探针的合成 | 第33页 |
| 3.1.3 ehand探针的合成 | 第33-34页 |
| 3.1.4 Isl1探针的合成 | 第34-35页 |
| 3.1.5 Fgf10探针的合成 | 第35页 |
| 3.1.6 MLC2a探针的合成 | 第35-36页 |
| 3.1.7 BMP5探针的合成 | 第36页 |
| 3.1.8 BMP7探针的合成 | 第36-37页 |
| 3.1.9 BAMBI探针的合成 | 第37页 |
| 3.2 流感病毒H1N1对小鼠胚胎及心脏发育的形态学检测 | 第37-39页 |
| 3.2.1 对不同时期的小鼠胚胎重量评测和形态观察 | 第37-38页 |
| 3.2.2 对不同时期H1N1感染的小鼠胚胎心脏形态分析 | 第38-39页 |
| 3.3 H1N1对BMP信号成员在心脏中表达影响的原位杂交分析 | 第39-42页 |
| 3.3.1 H1N1对BMP4胚胎心脏中表达影响分析 | 第39页 |
| 3.3.2 H1N1对BMP5在心脏中表达影响的分析 | 第39-40页 |
| 3.3.3 H1N1对BMP7表达影响的分析 | 第40-41页 |
| 3.3.4 H1N1对BAMBI表达影响的分析 | 第41-42页 |
| 3.4 H1N1对心脏发育标志基因表达影响的原位杂交分析 | 第42-47页 |
| 3.4.1 H1N1对Nkx2.5 表达的影响分析 | 第42-43页 |
| 3.4.2 H1N1对Isl1表达的影响分析 | 第43-44页 |
| 3.4.3 H1N1对Fgf10表达的影响分析 | 第44-45页 |
| 3.4.4 H1N1对ehand表达的影响分析 | 第45页 |
| 3.4.5 H1N1对MLC2a表达的影响分析 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 5 结语 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录Ⅰ | 第54-55页 |
| 附录Ⅱ | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
