摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第10-17页 |
1.1 绿盲蝽简介 | 第10页 |
1.2 昆虫的性信息素研究 | 第10-12页 |
1.3 绿盲蝽卵巢的简介 | 第12页 |
1.4 RNAi介绍 | 第12-16页 |
1.4.1 RNAi的作用机制 | 第12-13页 |
1.4.2 RNAi的发现意义 | 第13页 |
1.4.3 dsRNA导入方式 | 第13-16页 |
1.4.3.1 显微注射法 | 第14页 |
1.4.3.2 饲喂法 | 第14-15页 |
1.4.3.3 浸泡法 | 第15页 |
1.4.3.4 转基因植物 | 第15-16页 |
1.5 研究的目的与意义 | 第16-17页 |
第二章 绿盲蝽的最佳注射体积的研究 | 第17-21页 |
前言 | 第17页 |
2.1 材料和方法 | 第17-19页 |
2.1.1 实验材料 | 第17-18页 |
2.1.1.1 供试昆虫 | 第17-18页 |
2.1.1.2 主要试剂和仪器 | 第18页 |
2.1.2 实验方法 | 第18-19页 |
2.1.2.1 注射方法 | 第18页 |
2.1.2.2 最佳注射体积的确定 | 第18-19页 |
2.1.3 数据处理及分析 | 第19页 |
2.2 实验结果与分析 | 第19-20页 |
2.3 讨论 | 第20-21页 |
第三章 通过RNAi筛选性信息素合成相关基因 | 第21-29页 |
前言 | 第21页 |
3.1 材料和方法 | 第21-26页 |
3.1.1 实验材料 | 第21-22页 |
3.1.1.1 供试昆虫 | 第21页 |
3.1.1.2 主要试剂与仪器 | 第21-22页 |
3.1.2 实验方法 | 第22-26页 |
3.1.2.1 绿盲蝽总RNA的提取 | 第22-23页 |
3.1.2.2 第1链cDNA的合成 | 第23-24页 |
3.1.2.3 荧光定量PCR | 第24-26页 |
3.1.3 数据处理及分析 | 第26页 |
3.2.结果与分析 | 第26-28页 |
3.2.1 ATF、AOX和DES的时间表达模式 | 第26-28页 |
3.3 讨论 | 第28-29页 |
第四章 通过RNAi筛选卵巢发育相关的基因 | 第29-48页 |
前言 | 第29页 |
4.1 材料和方法 | 第29-37页 |
4.1.1 实验材料 | 第29页 |
4.1.1.1 供试昆虫 | 第29页 |
4.1.1.2 主要试剂与仪器 | 第29页 |
4.1.2 实验方法 | 第29-37页 |
4.1.2.1 绿盲蝽总RNA提取 | 第29-30页 |
4.1.2.2 第一链cDNA的合成 | 第30页 |
4.1.2.3 靶标基因的克隆 | 第30-31页 |
4.1.2.4 目的片段的PCR扩增、测序及序列分析 | 第31-32页 |
4.1.2.5 dsRNA模板的制备 | 第32-33页 |
4.1.2.6 dsRNA的合成 | 第33-34页 |
4.1.2.7 dsRNA的酚氯仿抽提 | 第34-35页 |
4.1.2.8 1L绿盲蝽成虫的注射方法 | 第35页 |
4.1.2.9 干扰效率检测 | 第35页 |
4.1.2.10 成熟卵子计数 | 第35-36页 |
4.1.2.11 NAA25、NAA20和NAA15的时间表达 | 第36页 |
4.1.2.12 NAA25和NAA15基因全长克隆 | 第36-37页 |
4.1.3 数据处理及分析 | 第37页 |
4.2 结果与分析 | 第37-47页 |
4.2.1 干扰效率检测 | 第37-38页 |
4.2.2 干扰后成熟卵子数量的变化 | 第38-40页 |
4.2.3 序列分析 | 第40-46页 |
4.2.3.1 NAA25和NAA15序列分析 | 第40-44页 |
4.2.3.3 NAA20序列分析 | 第44-46页 |
4.2.4 NAA25、NAA20和NAA15时间表达 | 第46-47页 |
4.3 讨论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
致谢 | 第54-55页 |