| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 课题研究背景 | 第10-16页 |
| 1.1.1 细菌光敏色素概述 | 第10页 |
| 1.1.2 细菌光敏色素的功能研究 | 第10-11页 |
| 1.1.3 细菌光敏色素的结构研究 | 第11-13页 |
| 1.1.4 细菌光敏色素的光循环 | 第13-14页 |
| 1.1.5 细菌光敏色素的应用及发展趋势 | 第14-16页 |
| 1.1.5.1 近红外荧光探针 | 第14-15页 |
| 1.1.5.2 近红外光声探针 | 第15页 |
| 1.1.5.3 近红外生物传感器 | 第15-16页 |
| 1.2 PAi RFP1的概况 | 第16页 |
| 1.3 研究意义及目的 | 第16-17页 |
| 1.4 研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 细菌光敏色素PAi RFP1的诱导表达、纯化、组装及光谱学行为检测 | 第18-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.2 实验仪器和设备 | 第18-19页 |
| 2.3 实验试剂及配制方法 | 第19-21页 |
| 2.4 实验方法 | 第21-25页 |
| 2.4.1 PAi RFP1突变体的诱导表达、纯化及SDS-PAGE检测 | 第21-24页 |
| 2.4.1.1 PAi RFP1突变体的诱导表达 | 第21-22页 |
| 2.4.1.2 PAi RFP1的纯化 | 第22-23页 |
| 2.4.1.3 PAi RFP1的SDS-PAGE检测 | 第23-24页 |
| 2.4.2 PAi RFP1脱辅基蛋白与BV的体外组装 | 第24-25页 |
| 2.4.2.1 用Bradford方法测蛋白浓度 | 第24页 |
| 2.4.2.2 PAi RFP1与BV的组装 | 第24-25页 |
| 2.4.3 PAi RFP1光谱行为的检测 | 第25页 |
| 2.5 实验结果 | 第25-28页 |
| 2.5.1 PAi RFP1的诱导表达、纯化、组装及SDS-PAGE检测 | 第25-27页 |
| 2.5.2 PAi RFP1光谱学行为的研究 | 第27-28页 |
| 2.6 本章小结与讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 细菌光敏色素PAi RFP1应用于近红外生物传感器的初步研究 | 第30-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.2 实验仪器和设备 | 第30页 |
| 3.3 实验试剂及其配制 | 第30-31页 |
| 3.4 实验方法与步骤 | 第31-32页 |
| 3.4.1 运用荧光手段检测不同金属离子和氧化还原剂对PAi RFP1近红外荧光的影响 | 第31页 |
| 3.4.2 运用吸收手段检测不同离子和氧化还原剂对PAi RFP1光谱的影响 | 第31-32页 |
| 3.5 实验结果 | 第32-36页 |
| 3.5.1 近红外荧光蛋白PAi RFP1金属离子生物传感器的研究 | 第32-35页 |
| 3.5.1.1 Hg~(2+)对PAi RFP1的近红外荧光及吸收光谱的影响 | 第32页 |
| 3.5.1.2 K~+、NH_4~+、Mg~(2+)、Mn~(2+)对PAi RFP1的近红外荧光及吸收光谱的影响 | 第32-33页 |
| 3.5.1.3 氧化性金属离子Fe~(3+)，Cu~(2+)，Ag~+对近红外荧光蛋白PAi RFP1荧光发射和吸收光谱的影响 | 第33-35页 |
| 3.5.2 探讨近红外荧光蛋白PAi RFP1作为氧化还原生物传感器的初步研究 | 第35-36页 |
| 3.5.2.1 过氧化氢对近红外荧光蛋白PAi RFP1的影响 | 第35-36页 |
| 3.5.2.2 还原剂DTT对近红外荧光蛋白PAi RFP1的影响 | 第36页 |
| 3.6 本章小结与讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 基于PAi RFP1的蛋白质工程改造及近红外荧光光谱学行为研究 | 第38-50页 |
| 4.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 4.2 实验仪器及设备 | 第39页 |
| 4.3 实验试剂及配制方法 | 第39页 |
| 4.4 实验步骤 | 第39-42页 |
| 4.4.1 质粒提取 | 第39-40页 |
| 4.4.2 PAi RFP1突变体基因的构建 | 第40-41页 |
| 4.4.3 感受态细胞的制备（CaCl2法）及转化 | 第41页 |
| 4.4.4 PAi RFP1突变体的诱导表达、纯化及SDS-PAGE检测 | 第41页 |
| 4.4.5 PAi RFP1与BV的组装 | 第41页 |
| 4.4.6 光谱行为的检测 | 第41-42页 |
| 4.5 实验结果 | 第42-48页 |
| 4.5.1 定点突变PCR、SDS-PAGE及全蛋白的光谱学结果 | 第42-47页 |
| 4.5.1.1 定点突变PCR结果 | 第42-43页 |
| 4.5.1.2 突变体SDS-PAGE检测 | 第43页 |
| 4.5.1.3 突变体光谱学行为的检测 | 第43-47页 |
| 4.5.2 饱和突变PCR及测序结果 | 第47-48页 |
| 4.6 本章小结与讨论 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 相关研究成果 | 第56-57页 |
