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中华绒螯蟹血细胞吞噬功能与凋亡分子机制的研究

致谢第6-7页
摘要第7-10页
ABSTRACT第10-12页
主要英文缩写及译名第13-19页
第一章 绪论第19-38页
    1.1 甲壳动物血细胞的分类方法第19-23页
        1.1.1 显微镜分类法第19-20页
        1.1.2 细胞染色分类法第20-21页
        1.1.3 透射电子显微镜分类法第21-22页
        1.1.4 流式细胞术分类法第22-23页
    1.2 甲壳动物血细胞的分离第23-24页
    1.3 甲壳动物血细胞的免疫功能第24-33页
        1.3.1 细胞吞噬作用第25-26页
        1.3.2 细胞粘附因子第26-28页
        1.3.3 细胞酚氧化酶原系统第28-31页
        1.3.4 细胞凝集素第31-33页
        1.3.5 结节形成、包囊作用和细胞毒理作用第33页
    1.4 甲壳动物血细胞凋亡的调控因子第33-36页
        1.4.1 IAPs和IAP结合蛋白第34页
        1.4.2 凋亡蛋白酶Caspases第34-35页
        1.4.3 Bcl-2家族蛋白第35页
        1.4.4 Apaf-1和Apip家族蛋白第35页
        1.4.5 丝裂原活化蛋白激酶MAPK蛋白第35-36页
    1.5 研究目的及意义第36-37页
    1.6 技术路线第37-38页
第二章 中华绒螯蟹血细胞分类及吞噬作用研究第38-51页
    2.1 材料与仪器第38-40页
        2.1.1 实验仪器第38-39页
        2.1.2 试剂及试剂盒第39-40页
    2.2 实验方法第40-42页
        2.2.1 实验动物第40页
        2.2.2 血细胞收集第40页
        2.2.3 血细胞形态观察与分类第40-41页
        2.2.4 血细胞数量统计第41页
        2.2.5 流式细胞术检测分类第41页
        2.2.6 血细胞超微结构观察第41页
        2.2.7 血细胞体内吞噬作用观察第41-42页
        2.2.8 数据统计分析第42页
    2.3 实验结果第42-48页
        2.3.1 中华绒螯蟹血细胞的分类第42-46页
        2.3.2 血细胞的体内吞噬作用第46-48页
    2.4 讨论第48-50页
    2.5 本章小结第50-51页
第三章 LPS诱导中华绒螯蟹血细胞凋亡机制的研究第51-71页
    3.1 材料与仪器第51-54页
        3.1.1 实验仪器第52页
        3.1.2 试剂及试剂盒第52-54页
    3.2 实验方法第54-56页
        3.2.1 实验动物第54页
        3.2.2 血细胞收集第54页
        3.2.3 LPS、嗜水气单胞菌及枯草芽孢杆菌对血细胞数量的影响第54页
        3.2.4 LPS体外诱导血细胞凋亡的检测第54-56页
        3.2.5 LPS诱导血细胞ROS检测第56页
        3.2.6 数据统计分析第56页
    3.3 实验结果第56-68页
        3.3.1 嗜水气单胞菌和枯草芽孢杆菌对中华绒螯蟹血细胞数量的影响第56-58页
        3.3.2 不同浓度LPS对中华绒螯蟹血细胞数量的影响第58-60页
        3.3.3 LPS诱导中华绒螯蟹血细胞凋亡的形态学观察第60-63页
        3.3.4 LPS诱导中华绒螯蟹血细胞凋亡的DNA片段化分析第63-64页
        3.3.5 流式细胞术检测LPS诱导后中华绒螯蟹血细胞的凋亡第64-65页
        3.3.6 LPS诱导中华绒螯蟹血细胞的ROS检测第65-68页
    3.4 讨论第68-70页
    3.5 本章小结第70-71页
第四章 中华绒螯蟹细胞粘附蛋白EsPX的克隆及其对外源刺激物的免疫反应第71-94页
    4.1 材料与仪器第71-74页
        4.1.1 实验仪器第71-72页
        4.1.2 试剂及试剂盒第72-74页
    4.2 实验方法第74-80页
        4.2.1 实验动物第74页
        4.2.2 血细胞收集第74-75页
        4.2.3 中华绒螯蟹EsPX序列分析第75页
        4.2.4 EsPX mRNA组织表达分析第75-77页
        4.2.5 外源刺激物对EsPX mRNA表达量的影响第77-78页
        4.2.6 EsPX蛋白的亚细胞定位第78-79页
        4.2.7 外源刺激物对EsPX蛋白表达的影响第79-80页
        4.2.8 数据统计分析第80页
    4.3 实验结果第80-90页
        4.3.1 EsPX序列及同源性分析结果第80-82页
        4.3.2 EsPX多序列比对和系统发育树的构建结果第82-84页
        4.3.3 EsPX在不同组织中的分布情况第84页
        4.3.4 外源刺激物对EsPX基因表达的影响第84-86页
        4.3.5 EsPX蛋白在不同血细胞的定位第86-87页
        4.3.6 外源刺激物对血细胞EsPX蛋白表达的影响第87-90页
    4.4 讨论第90-92页
    4.5 本章小结第92-94页
第五章 中华绒螯蟹MAPK基因的克隆及功能分析第94-121页
    5.1 材料与仪器第94-98页
        5.1.1 实验仪器第94-95页
        5.1.2 主要软件第95页
        5.1.3 试剂及试剂盒第95-98页
    5.2 实验方法第98-105页
        5.2.1 实验动物第98页
        5.2.2 血细胞收集第98页
        5.2.3 中华绒螯蟹EsMAPK序列分析第98-99页
        5.2.4 EsMAPK mRNA组织表达分析第99-101页
        5.2.5 外源刺激物对EsMAPK mRNA表达量的影响第101页
        5.2.6 EsMAPK蛋白的原核表达第101-104页
        5.2.7 中华绒螯蟹EsMAPK蛋白的亚细胞定位第104-105页
        5.2.8 外源刺激物对EsMAPK蛋白表达的影响第105页
        5.2.9 数据统计分析第105页
    5.3 实验结果第105-117页
        5.3.1 EsMAPK序列分析第105-106页
        5.3.2 EsMAPK氨基酸序列同源性分析和系统发育树的构建第106-110页
        5.3.3 EsMAPK在不同组织中的表达第110页
        5.3.4 外源刺激物对EsMAPK基因表达的影响第110-112页
        5.3.5 EsMAPK蛋白原核表达第112-115页
        5.3.6 LPS和嗜水气单胞菌对EsMAPK蛋白表达的影响第115-117页
    5.4 讨论第117-119页
    5.5 本章小结第119-121页
第六章 研究结果与展望第121-125页
    6.1 研究结果第121-122页
    6.2 主要创新点第122-123页
    6.3 不足和展望第123-125页
参考文献第125-140页
作者简历及攻读博士期间发表的论文第140-141页

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