摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 引言 | 第11-19页 |
1.1 植物病原菌致病性研究现状 | 第11-12页 |
1.1.1 多糖 | 第11页 |
1.1.2 脂多糖 | 第11-12页 |
1.1.3 胞外酶 | 第12页 |
1.1.4 III型分泌系统 | 第12页 |
1.2 黄单胞菌研究现状 | 第12-13页 |
1.3 棉花角斑病研究现状 | 第13-15页 |
1.3.1 棉花角斑病菌特征及其发病特点 | 第13-14页 |
1.3.2 棉花细菌性角斑病危害 | 第14页 |
1.3.3 棉花角斑病的防治 | 第14-15页 |
1.4 AAA+超家族 | 第15-18页 |
1.4.1 AAA+超家族功能 | 第15-16页 |
1.4.2 Clp蛋白酶家族的功能 | 第16-17页 |
1.4.3 ClpA蛋白酶的结构和功能 | 第17-18页 |
1.5 立题依据和研究意义 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-33页 |
2.1 实验材料 | 第19-22页 |
2.1.1 实验菌株 | 第19页 |
2.1.2 供试质粒 | 第19页 |
2.1.3 引物 | 第19页 |
2.1.4 实验所用棉花 | 第19页 |
2.1.5 实验所用培养基 | 第19-20页 |
2.1.6 实验试剂 | 第20-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-25页 |
2.2.1 DNA快速纯化回收法 | 第22页 |
2.2.2 质粒小量抽取法 | 第22-23页 |
2.2.3 基因组提取方法 | 第23页 |
2.2.4 丙酮法提取细菌总蛋白 | 第23-24页 |
2.2.5 116 热激感受态制备方法 | 第24页 |
2.2.6 S17-1 电击感受态的制作 | 第24-25页 |
2.2.7 Trizol法提取细菌总RNA | 第25页 |
2.2.8 细菌总RNA的反转录 | 第25页 |
2.3 实验过程 | 第25-33页 |
2.3.1 clpA基因敲除菌株的获得 | 第25-28页 |
2.3.2 Xcm(ΔclpA)菌株和野生型菌株Xcm的表型生物学特征比较 | 第28-33页 |
3 结果与分析 | 第33-47页 |
3.1 clpA基因敲除菌株的获得 | 第33-36页 |
3.1.1 clpA基因敲除体系的构建 | 第33-35页 |
3.1.2 同源重组法获得clpA基因敲除菌株 | 第35-36页 |
3.2 Xcm(ΔclpA)菌株和野生型菌株的表型生物学特征比较 | 第36-47页 |
3.2.1 运动能力方面的比较 | 第36-37页 |
3.2.2 耐热能力方面的比较 | 第37-38页 |
3.2.3 耐铜离子能力方面的比较 | 第38页 |
3.2.4 耐乙醇能力方面的比较 | 第38-39页 |
3.2.5 耐酸碱能力方面的比较 | 第39-40页 |
3.2.6 生物薄膜形成能力方面的比较 | 第40-41页 |
3.2.7 定殖能力方面的比较 | 第41页 |
3.2.8 竞争能力比较 | 第41-42页 |
3.2.9 clpA敲除菌株与野生型菌株耐盐能力比较 | 第42-43页 |
3.2.10 高盐条件下蛋白表达的比较 | 第43-45页 |
3.2.11 双向电泳结果 | 第45页 |
3.2.12 野生型Xcm菌株在不同盐浓度条件下clpA基因表达量的比较 | 第45-47页 |
4 结论 | 第47-49页 |
5 讨论 | 第49-53页 |
6 展望 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61页 |