| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩写词(Abbreviation) | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-22页 |
| 1 黄酮类物质的合成途径 | 第13-20页 |
| 1.1 黄酮类物质合成途径相关键酶基因的克隆 | 第14-15页 |
| 1.2 黄酮类物质的生物合成相关酶类研究 | 第15-17页 |
| 1.3 简单儿茶素的生物合成研究 | 第17-18页 |
| 1.4 酯型儿茶素生物合成的研究 | 第18-20页 |
| 2 研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 3 技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 CsECGT基因的原核表达 | 第22-33页 |
| 1 材料与方法 | 第22-26页 |
| 1.1 材料 | 第22-23页 |
| 1.1.1 主要原料 | 第22页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第22页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
| 1.2 方法 | 第23-26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-30页 |
| 2.1 保靖黄金茶鲜叶总RNA的检测及分析 | 第26-27页 |
| 2.2 目的基因ECGT的检测及分析 | 第27页 |
| 2.3 平末端连接T载体与阳性转化子的检测 | 第27-28页 |
| 2.4 T-ECGT重组载体的测序结果与分析 | 第28页 |
| 2.5 BamHI、Xhol 双酶切 T-ECGT 与 pET28a 载体图 | 第28-29页 |
| 2.6 PET28a-ECGT BL21中转化子的检测图 | 第29页 |
| 2.7 SDS-PAGE电泳图与分析 | 第29-30页 |
| 3 小结 | 第30页 |
| 4 讨论 | 第30-33页 |
| 第三章 CsECGT基因的序列分析 | 第33-42页 |
| 1 材料与方法 | 第33-35页 |
| 1.1 材料 | 第33-34页 |
| 1.2 方法 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-41页 |
| 2.1 CsECGT基因全长cDNA克隆 | 第35页 |
| 2.2 CsECGT的ORF及其氨基酸序列的预测 | 第35页 |
| 2.3 氨基酸序列的同源性分析 | 第35页 |
| 2.4 CsECGT氨基酸组成及理化性质分析 | 第35-36页 |
| 2.5 CsECGT蛋白亲水/疏水性分析 | 第36页 |
| 2.6 CsECGT蛋白信号肽预测 | 第36-37页 |
| 2.7 CsECGT磷酸化位点预测与分析 | 第37页 |
| 2.8 CsECGT蛋白二级结构的预测与分析 | 第37-39页 |
| 2.9 CsECGT蛋白卷曲螺旋结构的预测与分析 | 第39-40页 |
| 2.10 CsECGT蛋白的跨膜结构预测与分析 | 第40-41页 |
| 3 小结 | 第41页 |
| 4 讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 CsECGT过表达载体的构建 | 第42-46页 |
| 1 材料与方法 | 第42-44页 |
| 1.1 材料 | 第42-43页 |
| 1.2 方法 | 第43-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-45页 |
| 2.1 CsECGT基因片段的特异性扩增 | 第44页 |
| 2.2 限制性酶XCmI酶切条件的优化 | 第44页 |
| 2.3 过表达载体构建成功验证图 | 第44-45页 |
| 3 小结 | 第45页 |
| 4 讨论 | 第45-46页 |
| 第五章 CsECGT表达与提取 | 第46-53页 |
| 1 材料与方法 | 第46-49页 |
| 1.1 材料 | 第46页 |
| 1.2 方法 | 第46-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-51页 |
| 2.1 在1/2MS培养基上生长的阳性烟草植株 | 第49页 |
| 2.2 HybF/R引物验证的实验组与对照组烟草植株 | 第49-50页 |
| 2.3 CsECGTOF、CXSNOF引物对验证的实验组、对照组烟草植株 | 第50页 |
| 2.4 对照组、实验组鲜叶提取物的SDS-PAGE电泳图 | 第50-51页 |
| 3 小结 | 第51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 第六章 ECGT功能验证 | 第53-61页 |
| 1 材料与方法 | 第53-55页 |
| 1.1 材料 | 第53页 |
| 1.2 方法 | 第53-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-59页 |
| 2.1 制备βG的LC-MS图谱 | 第55-56页 |
| 2.2 液相分析建立的儿茶素标样图 | 第56页 |
| 2.3 对照组(PCDG)、实验组(PCXSN)烟草鲜叶的提取物液相图 | 第56-57页 |
| 2.4 以EC、βG为底物的酶反应液相图 | 第57-58页 |
| 2.5 以EC、βG为底物的酶反应水层液相检测图 | 第58页 |
| 2.6 以EGC、βG为底物的酶反应液相检测图 | 第58页 |
| 2.7 以EGC、βG为底物的酶反应液相检测图 | 第58-59页 |
| 3 小结 | 第59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 第七章 全文总结 | 第61-63页 |
| 1 主要研究成果 | 第61页 |
| 2 创新点、创新方法 | 第61-62页 |
| 3 展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
