摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
1 绪论 | 第8-19页 |
1.1 引言 | 第8-9页 |
1.2 葡萄种质资源系统发育研究进展 | 第9-10页 |
1.3 我国野生葡萄种质资源的分布与保存现状 | 第10-11页 |
1.4 我国野生葡萄系统发育研究方法与进展 | 第11-16页 |
1.4.1 形态学分类方法 | 第11-12页 |
1.4.2 孢粉学分类方法 | 第12页 |
1.4.3 解剖学分类方法 | 第12-13页 |
1.4.4 同工酶分类方法 | 第13页 |
1.4.5 细胞学分类方法 | 第13-14页 |
1.4.6 分子标记 | 第14-16页 |
1.4.6.1 RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism) | 第14页 |
1.4.6.2 RAPD(Random Amplification Polymorphic DNA) | 第14-15页 |
1.4.6.3 AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism) | 第15页 |
1.4.5.4 SSR(Simple Sequence Repeat) | 第15-16页 |
1.4.6.5 ISSR(Inter Simple Sequence Repeat) | 第16页 |
1.4.7 DNA序列分析 | 第16页 |
1.5 RPP13基因研究进展 | 第16-17页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
1.7 技术路线 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-28页 |
2.1 试验材料 | 第19-21页 |
2.2 仪器与试剂 | 第21-22页 |
2.2.1 试验仪器 | 第21页 |
2.2.2 试验试剂 | 第21-22页 |
2.3 试验方法 | 第22-28页 |
2.3.1 葡萄基因组DNA提取 | 第22-23页 |
2.3.2 RPP13基因片段的PCR扩增 | 第23-25页 |
2.3.2.1 RPP13基因的命名 | 第23页 |
2.3.2.2 扩增引物的设计 | 第23页 |
2.3.2.3 PCR扩增反应体系 | 第23-24页 |
2.3.2.4 PCR扩增反应程序 | 第24-25页 |
2.3.2.5 PCR扩增产物的回收与纯化 | 第25页 |
2.3.3 克隆与测序 | 第25-27页 |
2.3.3.1 克隆载体构建 | 第25-26页 |
2.3.3.2 菌落PCR鉴定 | 第26-27页 |
2.3.4 数据整理与分析 | 第27-28页 |
3 结果与分析 | 第28-46页 |
3.1 基因组DNA提取后的检测结果 | 第28页 |
3.2 RPP13基因序列分析及在我国野生葡萄系统发育中的作用 | 第28-46页 |
3.2.1 VIT_13s0158g00210在NCBI数据库中的比对结果 | 第28-30页 |
3.2.2 基因片段PCR扩增结果 | 第30-31页 |
3.2.3 PCR产物回收 | 第31-32页 |
3.2.4 菌落PCR检测 | 第32页 |
3.2.5 不同种野生葡萄RPP13基因片段的序列比较 | 第32-40页 |
3.2.5.1 预实验结果分析 | 第32-33页 |
3.2.5.2 克隆测序结果分析 | 第33-40页 |
3.2.6 我国野生葡萄的RPP13进化树分析 | 第40-46页 |
4 讨论 | 第46-50页 |
4.1 我国野生葡萄基因组DNA提取方法的改良 | 第46页 |
4.2 RPP13基因在我国野生葡萄系统发育中的作用 | 第46-50页 |
4.2.1 片段a1系统发育树分析 | 第46-47页 |
4.2.2 片段a2系统发育树分析 | 第47页 |
4.2.3 片段a3系统发育树分析 | 第47-48页 |
4.2.4 片段a1、a2、a3系统发育树联合分析 | 第48页 |
4.2.5 RPP13基因对霜霉病的抗性与葡萄的系统发育之间的关系 | 第48-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
5.1RPP13基因在我国葡萄野生种系统发育中的应用 | 第50页 |
5.2 RPP13基因对抗霜霉病的抗性与葡萄属欧亚支系系统发育之间的关系 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
附录 | 第58-89页 |
致谢 | 第89页 |