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基于RPP13基因的葡萄属欧亚支系的系统发育研究

摘要第6-7页
Abstract第7页
1 绪论第8-19页
    1.1 引言第8-9页
    1.2 葡萄种质资源系统发育研究进展第9-10页
    1.3 我国野生葡萄种质资源的分布与保存现状第10-11页
    1.4 我国野生葡萄系统发育研究方法与进展第11-16页
        1.4.1 形态学分类方法第11-12页
        1.4.2 孢粉学分类方法第12页
        1.4.3 解剖学分类方法第12-13页
        1.4.4 同工酶分类方法第13页
        1.4.5 细胞学分类方法第13-14页
        1.4.6 分子标记第14-16页
            1.4.6.1 RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)第14页
            1.4.6.2 RAPD(Random Amplification Polymorphic DNA)第14-15页
            1.4.6.3 AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)第15页
            1.4.5.4 SSR(Simple Sequence Repeat)第15-16页
            1.4.6.5 ISSR(Inter Simple Sequence Repeat)第16页
        1.4.7 DNA序列分析第16页
    1.5 RPP13基因研究进展第16-17页
    1.6 本研究的目的及意义第17-18页
    1.7 技术路线第18-19页
2 材料与方法第19-28页
    2.1 试验材料第19-21页
    2.2 仪器与试剂第21-22页
        2.2.1 试验仪器第21页
        2.2.2 试验试剂第21-22页
    2.3 试验方法第22-28页
        2.3.1 葡萄基因组DNA提取第22-23页
        2.3.2 RPP13基因片段的PCR扩增第23-25页
            2.3.2.1 RPP13基因的命名第23页
            2.3.2.2 扩增引物的设计第23页
            2.3.2.3 PCR扩增反应体系第23-24页
            2.3.2.4 PCR扩增反应程序第24-25页
            2.3.2.5 PCR扩增产物的回收与纯化第25页
        2.3.3 克隆与测序第25-27页
            2.3.3.1 克隆载体构建第25-26页
            2.3.3.2 菌落PCR鉴定第26-27页
        2.3.4 数据整理与分析第27-28页
3 结果与分析第28-46页
    3.1 基因组DNA提取后的检测结果第28页
    3.2 RPP13基因序列分析及在我国野生葡萄系统发育中的作用第28-46页
        3.2.1 VIT_13s0158g00210在NCBI数据库中的比对结果第28-30页
        3.2.2 基因片段PCR扩增结果第30-31页
        3.2.3 PCR产物回收第31-32页
        3.2.4 菌落PCR检测第32页
        3.2.5 不同种野生葡萄RPP13基因片段的序列比较第32-40页
            3.2.5.1 预实验结果分析第32-33页
            3.2.5.2 克隆测序结果分析第33-40页
        3.2.6 我国野生葡萄的RPP13进化树分析第40-46页
4 讨论第46-50页
    4.1 我国野生葡萄基因组DNA提取方法的改良第46页
    4.2 RPP13基因在我国野生葡萄系统发育中的作用第46-50页
        4.2.1 片段a1系统发育树分析第46-47页
        4.2.2 片段a2系统发育树分析第47页
        4.2.3 片段a3系统发育树分析第47-48页
        4.2.4 片段a1、a2、a3系统发育树联合分析第48页
        4.2.5 RPP13基因对霜霉病的抗性与葡萄的系统发育之间的关系第48-50页
5 结论第50-51页
    5.1RPP13基因在我国葡萄野生种系统发育中的应用第50页
    5.2 RPP13基因对抗霜霉病的抗性与葡萄属欧亚支系系统发育之间的关系第50-51页
参考文献第51-58页
附录第58-89页
致谢第89页

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