附录 英文缩语 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
前言 | 第15-18页 |
第一部分 程序性坏死相关蛋白在小鼠脑出血后的表达规律研究 | 第18-27页 |
材料和方法 | 第18-24页 |
1 主要实验材料 | 第18-21页 |
1.1 实验动物 | 第18页 |
1.2 实验器械和仪器 | 第18-19页 |
1.3 药品试剂 | 第19-20页 |
1.4 主要试剂配制 | 第20-21页 |
2 实验方法与设计 | 第21-24页 |
2.1 动物分组 | 第21页 |
2.2 脑出血模型制作 | 第21页 |
2.3 Western blot法检测假手术组、脑出血各亚组RIP3和MLKL的蛋白表达情况 | 第21-23页 |
2.3.1 小鼠处死并取材保存 | 第21-22页 |
2.3.2 总蛋白的提取以及蛋白浓度的测定 | 第22页 |
2.3.3 Westernblot步骤 | 第22-23页 |
2.4 免疫荧光 | 第23-24页 |
2.4.1 组织冰冻切片制备 | 第23-24页 |
2.4.2 免疫荧光染色步骤 | 第24页 |
2.5 统计方法 | 第24页 |
实验结果 | 第24-26页 |
1 小鼠脑出血模型建立情况 | 第24-25页 |
2 小鼠脑出血模型中程序性坏死相关蛋白RIP3、MLKL表达 | 第25-26页 |
3 小鼠ICH中RIP3及MLKL在细胞中表达分布情况 | 第26页 |
小结 | 第26-27页 |
第二部分 RIP1/RIP3/MLKL通路介导的程序性细胞坏死在小鼠脑出血的作用研究 | 第27-40页 |
方法与材料 | 第27-35页 |
1 实验材料 | 第27-30页 |
1.1 实验动物 | 第27页 |
1.2 实验器械和仪器 | 第27-28页 |
1.3 药品试剂及试剂配制 | 第28-29页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第29-30页 |
2 实验方法 | 第30-35页 |
2.1 动物分组及设计 | 第30页 |
2.2 神经功能缺损评分(NDS) | 第30-31页 |
2.3 脑含水量测定 | 第31-32页 |
2.4 伊文思蓝 | 第32页 |
2.4.1 伊文思蓝外渗标本的留取 | 第32页 |
2.4.2 标准曲线建立 | 第32页 |
2.5 Western blot比较各组ICH后3天RIP1、RIP3、MLKL的变化 | 第32-33页 |
2.5.1 小鼠处死并取材 | 第32页 |
2.5.2 总蛋白的提取 | 第32-33页 |
2.5.3 Western blot步骤 | 第33页 |
2.6 试剂盒法测定各组小鼠脑组织丙二醛MDA含量测定 | 第33-34页 |
2.6.1 蛋白质提取 | 第33页 |
2.6.2 蛋白浓度定量 | 第33-34页 |
2.7 酶联免疫吸附法肿瘤坏死因子-α、白介素-1β | 第34页 |
2.7.1 脑匀浆制备 | 第34页 |
2.7.2 ELISA检测脑组织上清中TNF-α、IL-1β的浓度 | 第34页 |
2.7.3 结果计算 | 第34页 |
2.8 统计方法 | 第34-35页 |
实验结果 | 第35-40页 |
1 小鼠脑出血模型的建立情况 | 第35页 |
2 神经功能缺损评分结果 | 第35页 |
3 脑含水量测定结果 | 第35-36页 |
4 伊文思蓝测量BBB破坏程度 | 第36-37页 |
5 Western blot比较各组ICH后3天RIP1、RIP3、MLKL的变化 | 第37-38页 |
6 试剂盒法测定各组小鼠脑组织MDA含量变化 | 第38-39页 |
7 炎症因子(IL-1β、TNF-α)变化结果 | 第39-40页 |
小结 | 第40页 |
讨论 | 第40-44页 |
结论 | 第44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
综述 | 第49-61页 |
参考文献 | 第57-61页 |
致谢 | 第61页 |