摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
主要英文缩写词 | 第7-11页 |
第1章 绪论 | 第11-19页 |
1.1 HPV | 第11-13页 |
1.1.1 HPV概述 | 第11页 |
1.1.2 HPV疫苗的研究现状 | 第11-12页 |
1.1.3 HPV与食管癌 | 第12-13页 |
1.2 DC细胞 | 第13-17页 |
1.2.1 DC细胞概述 | 第13-14页 |
1.2.2 基于树突状细胞的肿瘤免疫治疗方法 | 第14-15页 |
1.2.3 DC疫苗在肿瘤免疫治疗中的应用及存在的问题 | 第15-17页 |
1.3 本课题的研究内容和目的 | 第17-19页 |
1.3.1 本课题的研究内容 | 第17页 |
1.3.2 本课题的研究目的 | 第17-19页 |
第2章 负载HPV16 L1的树突状细胞疫苗的制备 | 第19-25页 |
2.1 引言 | 第19页 |
2.2 实验材料 | 第19-20页 |
2.2.1 主要实验试剂 | 第19页 |
2.2.2 实验动物 | 第19页 |
2.2.3 主要仪器设备 | 第19-20页 |
2.3 实验方法 | 第20-22页 |
2.3.1 小鼠骨髓源未成熟树突状细胞的体外分离培养及诱导成熟 | 第20页 |
2.3.2 成熟DC细胞的鉴定 | 第20-21页 |
2.3.3 DC-L1疫苗的制备及鉴定 | 第21-22页 |
2.4 实验结果 | 第22-23页 |
2.4.1 成熟DC细胞的鉴定 | 第22-23页 |
2.4.2 DC-L1疫苗的鉴定 | 第23页 |
2.5 讨论 | 第23-24页 |
2.6 小结 | 第24-25页 |
第3章 TC1L1肿瘤细胞系的构建 | 第25-39页 |
3.1 引言 | 第25页 |
3.2 实验材料 | 第25-26页 |
3.2.1 细胞株和质粒 | 第25页 |
3.2.2 工具酶和主要试剂 | 第25页 |
3.2.3 主要仪器设备 | 第25-26页 |
3.3 实验方法 | 第26-35页 |
3.3.1 溶液的配制 | 第26页 |
3.3.2 Bsd-L1表达载体的构建 | 第26-31页 |
3.3.3 TC-1 细胞系的复苏、传代和培养 | 第31-32页 |
3.3.4 Bsd-L1表达载体转染TC-1 细胞和稻瘟霉素稳筛细胞系 | 第32页 |
3.3.5 RT-PCR法检测TC1L1肿瘤细胞系中HPV16 L1的转录 | 第32-34页 |
3.3.6 Western Blot法检测TC1L1肿瘤细胞系中HPV16 L1的表达 | 第34-35页 |
3.4 实验结果 | 第35-38页 |
3.4.1 表达HPV16 L1基因的表达载体的构建 | 第35-36页 |
3.4.2 表达HPV16 L1基因的TC-1 肿瘤细胞系的构建 | 第36-38页 |
3.5 讨论 | 第38页 |
3.6 本章小结 | 第38-39页 |
第4章 负载HPV16 L1的树突状细胞疫苗免疫效果的研究 | 第39-53页 |
4.1 引言 | 第39页 |
4.2 实验材料 | 第39-40页 |
4.2.1 细胞和疫苗 | 第39页 |
4.2.2 主要试剂 | 第39页 |
4.2.3 主要仪器设备 | 第39-40页 |
4.3 实验方法 | 第40-45页 |
4.3.1 小鼠免疫方案 | 第40页 |
4.3.2 小鼠体内细胞免疫水平检测 | 第40-42页 |
4.3.3 小鼠体内体液免疫水平检测 | 第42-43页 |
4.3.4 肿瘤攻击实验 | 第43-44页 |
4.3.5 体外杀伤实验 | 第44-45页 |
4.3.6 数据分析及处理 | 第45页 |
4.4 实验结果 | 第45-50页 |
4.4.1 DC-L1疫苗单针免疫效果研究 | 第45-47页 |
4.4.2 DC-L1疫苗三针免疫效果研究 | 第47-48页 |
4.4.3 肿瘤攻击实验 | 第48-49页 |
4.4.4 体外杀伤实验结果 | 第49-50页 |
4.5 讨论 | 第50-51页 |
4.6 本章小结 | 第51-53页 |
结论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第63-65页 |
致谢 | 第65页 |