| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 CAMTA转录因子结构及其功能研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.1 CAMTA转录因子的结构 | 第12页 |
| 1.1.2 CAMTA转录因子的功能 | 第12-13页 |
| 1.2 CRISPR/Cas9介导的基因组定点编辑系统 | 第13-17页 |
| 1.2.1 CRISPR/Cas系统的概述 | 第13-14页 |
| 1.2.2 CRISPR/Cas9结构 | 第14-15页 |
| 1.2.3 CRISPR/Cas9作用机理 | 第15-16页 |
| 1.2.4 CRISPR/Cas9的优势与应用 | 第16-17页 |
| 1.3 紫花苜蓿遗传转化研究进展 | 第17-23页 |
| 1.3.1 苜蓿的遗传转化 | 第18-21页 |
| 1.3.2 转基因苜蓿的研究进展 | 第21-23页 |
| 1.4 本课题的研究背景、研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 第2章 紫花苜蓿MsCAMTA1基因的克隆 | 第24-40页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 实验材料和方法 | 第24-31页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.2.2 实验仪器及药品 | 第24-28页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第28-31页 |
| 2.3 实验结果 | 第31-39页 |
| 2.3.1 Ms CAMTA1基因的克隆 | 第31-32页 |
| 2.3.2 pMD18T- MsCAMTA1克隆载体的构建 | 第32-33页 |
| 2.3.3 Ms CAMTA1序列的生物信息学分析 | 第33-39页 |
| 2.4 本章小节 | 第39-40页 |
| 第3章 pCBM-MsCAMTA1和pYLCRISPR/Cas9-MsCAMTA1植物表达载体的构建 | 第40-51页 |
| 3.1 引言 | 第40页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第40-45页 |
| 3.2.1 质粒载体与菌株 | 第40页 |
| 3.2.2 实验仪器及药品 | 第40页 |
| 3.2.3 实验方法 | 第40-45页 |
| 3.3 实验结果 | 第45-50页 |
| 3.3.1 植物表达载体pCBM-MsCAMTA1的构建 | 第45-47页 |
| 3.3.2 植物表达载体pYLCRISPR/Cas9-MsCAMTA1的构建 | 第47-50页 |
| 3.4 本章小结 | 第50-51页 |
| 第4章 MsCAMTA1基因对紫花苜蓿的遗传转化 | 第51-62页 |
| 4.1 引言 | 第51页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第51-52页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第51页 |
| 4.2.2 实验仪器与药品 | 第51-52页 |
| 4.3 实验方法 | 第52-54页 |
| 4.3.1 pCBM-MsCAMTA1和pYLCRISPR/Cas9-MsCAMTA1对农杆菌的转化 | 第52页 |
| 4.3.2 草铵膦筛选压力的确定 | 第52页 |
| 4.3.3 潮霉素筛选压力的确定 | 第52页 |
| 4.3.4 农杆菌介导的苜蓿遗传转化 | 第52-54页 |
| 4.4 实验结果 | 第54-61页 |
| 4.4.1 pCBM-MsCAMTA1和pYLCRISPR/Cas9-MsCAMTA1转化农杆菌 | 第54-55页 |
| 4.4.2 草铵膦筛选压力的确定 | 第55-57页 |
| 4.4.3 潮霉素筛选压力的确定 | 第57-59页 |
| 4.4.4 农杆菌介导的苜蓿遗传转化 | 第59-61页 |
| 4.4.5 苜蓿抗性植株的获得 | 第61页 |
| 4.5 本章小节 | 第61-62页 |
| 第5章 讨论 | 第62-65页 |
| 5.1 Ms CAMTA1基因的克隆与功能预测分析 | 第62页 |
| 5.2 基因敲除载体的选择 | 第62-63页 |
| 5.3 苜蓿转化体系的建立 | 第63-64页 |
| 5.3.1 转化受体的选择 | 第63-64页 |
| 5.3.2 影响转化率的因素 | 第64页 |
| 5.4 下一步工作及展望 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
