| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一部分 转基因载体构建 | 第13-22页 |
| 材料与方法 | 第13-19页 |
| 1. 实验材料 | 第13-14页 |
| ·菌株、质粒和细胞 | 第13页 |
| ·主要试剂 | 第13页 |
| ·主要仪器 | 第13-14页 |
| 2. 实验方法 | 第14-19页 |
| ·PCR 扩增人的CUEDC2 基因 | 第14页 |
| ·重组质粒pF3×Flag-CUEDC2 的构建 | 第14-16页 |
| ·重组质粒pF43-3×Flag-CUEDC2 的构建 | 第16-17页 |
| ·重组质粒pF43-3×Flag-CUEDC2 的检测 | 第17-19页 |
| 实验结果与讨论 | 第19-21页 |
| 1. 质粒pF43-3×Flag-CUEDC2 的酶切鉴定 | 第19-20页 |
| 2 质粒pF43-3×Flag-CUEDC2 的表达检测 | 第20-21页 |
| 小结 | 第21-22页 |
| 第二部分 CUEDC2 转基因小鼠与MMTV-rtTA/CUEDC2 转基因小鼠的获得 | 第22-31页 |
| 材料与方法 | 第23-27页 |
| 1 仪器、材料及试剂 | 第23页 |
| ·质粒和菌种 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·实验动物及饲养环境 | 第23页 |
| 2 实验方法 | 第23-27页 |
| ·显微注射用线性DNA 的制备 | 第23-24页 |
| ·CUEDC2 转基因小鼠的制作 | 第24页 |
| ·转基因小鼠的PCR 筛选 | 第24-25页 |
| ·CUEDC2 转基因阳性小鼠的传代及MMTV-rtTA/CUEDC2 转基因小鼠的获得 | 第25-27页 |
| 实验结果与讨论 | 第27-30页 |
| 1 PCR 检测CUEDC2 转基因小鼠的基因型 | 第27页 |
| 2 CUEDC2 转基因阳性小鼠的传代及MMTV-rtTA/CUEDC2 转基因小鼠的获得 | 第27-30页 |
| 小结 | 第30-31页 |
| 第三部分 Doxycycline 诱导乳腺特异表达CUEDC2 的转基因小鼠模型的建立 | 第31-43页 |
| 材料与方法 | 第31-37页 |
| 1. 实验材料 | 第31-32页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·实验动物及饲养环境 | 第31-32页 |
| 2 实验方法 | 第32-37页 |
| ·MMTV-rtTA /CUEDC2 转基因小鼠的扩增 | 第32页 |
| ·RT-PCR 检测转录水平CUEDC2 在乳腺中的表达 | 第32-33页 |
| ·Western blot 检测蛋白水平CUEDC2 在乳腺中的表达 | 第33-34页 |
| ·免疫组化( immunohistochemistry, IHC)检测乳腺中CUEDC2 的表达 | 第34-37页 |
| 实验结果与讨论 | 第37-42页 |
| 1. RT-PCR 检测乳腺中CUEDC2 在转录水平的表达 | 第37-38页 |
| ·PCR 检测实验组与对照组小鼠基因型 | 第37页 |
| ·组织中总RNA 的提取 | 第37-38页 |
| ·逆转录PCR | 第38页 |
| 2 Western blot 检测蛋白水平CUEDC2 在乳腺中的表达 | 第38-40页 |
| 3 免疫组化检测乳腺中CUEDC2 的表达 | 第40-42页 |
| 小结 | 第42-43页 |
| 总结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| 缩略词表 | 第46-48页 |
| 综述 | 第48-52页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
| 个人简历 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
