摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3页 |
缩略词表 | 第4-7页 |
引言 | 第7-9页 |
第一章 材料与方法 | 第9-20页 |
1.1 主要仪器设备 | 第9页 |
1.2 主要实验试剂及配制 | 第9-11页 |
1.2.1 主要实验试剂 | 第9-10页 |
1.2.2 主要实验试剂配制 | 第10-11页 |
1.3 细胞及病毒 | 第11页 |
1.3.1 主要细胞及培养 | 第11页 |
1.3.2 病毒来源 | 第11页 |
1.4 细胞培养 | 第11-12页 |
1.4.1 细胞的复苏 | 第11-12页 |
1.4.2 细胞的传代 | 第12页 |
1.5 细胞的冻存 | 第12-13页 |
1.6 HCMV AD169毒株的制备及定量 | 第13-14页 |
1.6.1 HCMV AD169毒株的制备 | 第13页 |
1.6.2 病毒空斑形成试验检测制备的HCMV的滴度 | 第13-14页 |
1.7 更昔洛韦浓度筛选 | 第14页 |
1.8 细胞总RNA提取 | 第14-15页 |
1.9 RNA反转录成cDNA | 第15-16页 |
1.10 Real-time RCR扩增目的片段 | 第16页 |
1.11 构建基因沉默ATF5稳定表达的细胞株LV-ATF5-RNAi U87 | 第16-18页 |
1.11.1 慢病毒感染预实验 | 第16-17页 |
1.11.2 慢病毒感染效率及Real-time PCR检测ATF5基因表达情况 | 第17页 |
1.11.3 Real time PCR测沉默ATF5联合GCV体外对低MOI值HCMV基因复制的影响 | 第17-18页 |
1.12 蛋白提取及western-blot分析 | 第18-19页 |
1.13 统计学方法 | 第19-20页 |
第二章 结果与分析 | 第20-28页 |
2.1 细胞培养 | 第20-21页 |
2.2 病毒空斑形成试验检测HCMV AD169毒株滴度 | 第21页 |
2.3 更昔洛韦浓度筛选 | 第21-22页 |
2.4 慢病毒感染效率检测 | 第22-23页 |
2.5 ATF5基因沉默效率的检测 | 第23页 |
2.6 基因沉默ATF5联合GCV对U87细胞的增殖的影响 | 第23-24页 |
2.7 Real-time PCR分析沉默ATF5联合GCV对低MOI值多循环复制的HCMV抑制作用 | 第24-26页 |
2.8 Western-blot分析沉默ATF5联合GCV对低MOI值多循环复制的HCMV抑制作用 | 第26-27页 |
2.9 沉默ATF5联合GCV对低MOI值多循环复制的HCMV子代病毒复制水平的抑制作用 | 第27-28页 |
第三章 讨论 | 第28-32页 |
第四章 结论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-36页 |
综述 | 第36-45页 |
综述参考文献 | 第41-45页 |
攻读学位期间研究成果 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |