摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第1章 引言 | 第12-16页 |
第2章 材料与方法 | 第16-28页 |
2.1 实验材料 | 第16-18页 |
2.1.1 实验动物 | 第16页 |
2.1.2 实验细胞 | 第16页 |
2.1.3 主要实验试剂 | 第16-18页 |
2.1.4 主要仪器与设备 | 第18页 |
2.2 实验器材的准备 | 第18-21页 |
2.2.1 实验器材的灭菌去致热源、去RNA酶处理 | 第18-19页 |
2.2.2 Ham’s F-12K完全培养基的配制 | 第19页 |
2.2.3 LPS、RAPA和MCC950等主要试剂的配制 | 第19-20页 |
2.2.4 Western Blot相关试剂的配制 | 第20-21页 |
2.3 实验方法 | 第21-28页 |
2.3.1 细胞培养 | 第21-22页 |
2.3.2 细胞分组与处理 | 第22页 |
2.3.3 线粒体及MTDs提取 | 第22-23页 |
2.3.4 线粒体Janus Green B染色 | 第23页 |
2.3.5 ELISA检测上清液中炎症因子的含量 | 第23页 |
2.3.6 Western Blot检测蛋白的含量 | 第23-24页 |
2.3.7 RT-qPCR检测AM中NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA的表达 | 第24-26页 |
2.3.8 免疫荧光检测炎性体和自噬小体 | 第26-27页 |
2.3.9 电镜检测自噬小体 | 第27页 |
2.3.10 统计学分析 | 第27-28页 |
第3章 结果 | 第28-42页 |
3.1 MTDs诱导AM炎症反应 | 第28-30页 |
3.1.1 线粒体Janus Green B染色 | 第28页 |
3.1.2 MTDs诱导AM分泌炎症因子TNF-α、IL-1β 和IL-18 | 第28-29页 |
3.1.3 MTDs诱导AM NLRP3炎性体相关蛋白表达 | 第29-30页 |
3.2 调控自噬对MTDs诱导的AM炎症反应的影响 | 第30-33页 |
3.2.1 RAPA和 3-MA对AM自噬小体形成的影响 | 第30-32页 |
3.2.2 自噬对MTDs诱导AM分泌炎症因子的影响 | 第32-33页 |
3.3 探讨自噬减轻MTDs诱导AM炎症反应的机制 | 第33-42页 |
3.3.1 自噬对MTDs诱导AM NLRP3炎性体活化的影响 | 第33-38页 |
3.3.2 阻断NLRP3炎性体活化对MTDs诱导AM炎症反应的影响 | 第38-42页 |
第4章 讨论 | 第42-47页 |
4.1 MTDs诱导AM炎症反应 | 第42-43页 |
4.2 自噬减轻MTDs诱导的炎症反应 | 第43-44页 |
4.3 自噬促进活化NLRP3炎性体降解减轻MTDs致炎效应 | 第44-47页 |
第5章 结论与展望 | 第47-48页 |
5.1 结论 | 第47页 |
5.2 进一步工作的方向 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第54-55页 |
综述 | 第55-62页 |
参考文献 | 第59-62页 |