| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词 | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 红斑丹毒丝菌研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.1 微生物学特性 | 第13页 |
| 1.1.2 猪丹毒及其他动物的丹毒病 | 第13-15页 |
| 1.1.3 人类红斑丹毒丝菌感染 | 第15页 |
| 1.2 红斑丹毒丝菌毒力因子和致病机制 | 第15-21页 |
| 1.2.1 已知的毒力因子和致病机制 | 第15-17页 |
| 1.2.2 相关领域研究进展 | 第17-21页 |
| 1.3 丹毒疫苗研究进展 | 第21-23页 |
| 1.3.1 传统疫苗 | 第21-22页 |
| 1.3.2 弱毒疫苗和野生型菌株的鉴别诊断 | 第22-23页 |
| 1.3.3 新型疫苗研究进展 | 第23页 |
| 1.4 本研究的内容与目标 | 第23-24页 |
| 2 红斑丹毒丝菌致病性表型研究 | 第24-35页 |
| 2.1 材料与方法 | 第24-26页 |
| 2.1.1 菌株、细胞系及培养条件 | 第24页 |
| 2.1.2 小鼠致病性实验 | 第24页 |
| 2.1.3 细胞粘附实验 | 第24页 |
| 2.1.4 细胞毒性试验 | 第24-25页 |
| 2.1.5 血浆纤维蛋白溶解酶原招募活性检测 | 第25页 |
| 2.1.6 粘附促进实验 | 第25页 |
| 2.1.7 招募plasminogen和fibronectin能力比较 | 第25-26页 |
| 2.1.8 全血杀菌实验 | 第26页 |
| 2.1.9 血清制备和IgG1/IG2a类型检测 | 第26页 |
| 2.1.10 统计分析 | 第26页 |
| 2.2 结果 | 第26-32页 |
| 2.2.1 小鼠致病性实验 | 第26-27页 |
| 2.2.2 猪髋动脉血管内皮细胞粘附实验 | 第27页 |
| 2.2.3 细胞毒性实验 | 第27-28页 |
| 2.2.4 招募血浆纤维蛋白溶解酶原的活性检测 | 第28-29页 |
| 2.2.5 血浆纤维蛋白溶解酶原和纤维连接蛋白的粘附促进实验 | 第29-30页 |
| 2.2.6 招募血浆纤维蛋白溶解酶原和纤维连接蛋白能力的比较 | 第30页 |
| 2.2.7 全血杀菌实验 | 第30-31页 |
| 2.2.8 IgG1/IgG2a类型测定 | 第31-32页 |
| 2.3 讨论 | 第32-35页 |
| 3 GAPDH等红斑丹毒丝菌表面蛋白的致病作用研究 | 第35-48页 |
| 3.1 材料和方法 | 第35-37页 |
| 3.1.1 菌株、细胞系和培养条件 | 第35页 |
| 3.1.2 待研究的红斑丹毒丝菌表面蛋白的筛选 | 第35页 |
| 3.1.3 克隆、表达和纯化重组的红斑丹毒丝菌表面蛋白 | 第35-36页 |
| 3.1.4 重组GAPDH活性测定 | 第36页 |
| 3.1.5 制备多克隆血清 | 第36页 |
| 3.1.6 红斑丹毒丝菌表面蛋白分布测定 | 第36页 |
| 3.1.7 猪髋动脉血管内皮细胞粘附实验 | 第36-37页 |
| 3.1.8 竞争粘附抑制实验 | 第37页 |
| 3.1.9 血浆纤维蛋白溶解酶原和纤维连接蛋白绑定活性检测 | 第37页 |
| 3.2 结果 | 第37-44页 |
| 3.2.1 红斑丹毒丝菌致病性相关表面蛋白的筛选 | 第37页 |
| 3.2.2 蛋白的克隆、表达和纯化 | 第37-39页 |
| 3.2.3 rGAPDH的酶活性 | 第39页 |
| 3.2.4 表面定位检测 | 第39-41页 |
| 3.2.5 重组表面蛋白对猪血管内皮细胞的粘附 | 第41-42页 |
| 3.2.6 竞争粘附抑制实验 | 第42-43页 |
| 3.2.7 血浆纤维蛋白溶解酶原和纤维连接蛋白结合活性 | 第43-44页 |
| 3.3 讨论 | 第44-48页 |
| 3.3.1 SpaA的致病作用 | 第44页 |
| 3.3.2 CbpB的致病作用 | 第44-45页 |
| 3.3.3 GAPDH的致病作用 | 第45页 |
| 3.3.4 HP0728的致病作用 | 第45-46页 |
| 3.3.5 HP1472的致病作用 | 第46页 |
| 3.3.6 未来应该做的工作 | 第46页 |
| 3.3.7 小结 | 第46-48页 |
| 4 GAPDH等红斑丹毒丝菌表面蛋白的保护力研究 | 第48-61页 |
| 4.1 重组红斑丹毒丝菌表面蛋白的保护力 | 第48-57页 |
| 4.1.1 材料与方法 | 第48-50页 |
| 4.1.2 结果 | 第50-54页 |
| 4.1.3 讨论 | 第54-57页 |
| 4.2 对GAPDH作为广谱疫苗的评估 | 第57-61页 |
| 4.2.1 材料与方法 | 第57-58页 |
| 4.2.2 结果 | 第58-59页 |
| 4.2.3 讨论 | 第59-61页 |
| 5 红斑丹毒丝菌疫苗弱和野毒菌株鉴别诊断方法的建立 | 第61-72页 |
| 5.1 基于SNP区分猪丹毒疫苗株和野毒株的PCR方法的修正 | 第61-66页 |
| 5.1.1 材料与方法 | 第61-62页 |
| 5.1.2 结果 | 第62-64页 |
| 5.1.3 讨论 | 第64-66页 |
| 5.2 区分猪丹毒疫苗菌株和野生型菌株的双重PCR方法的建立 | 第66-72页 |
| 5.2.1 材料与方法 | 第66-67页 |
| 5.2.2 结果 | 第67-71页 |
| 5.2.3 讨论 | 第71-72页 |
| 6 总结 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-87页 |
| 附录 | 第87-94页 |
| 研究生期间的论文与专利 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
