| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第10-20页 |
| 1 洋桔梗及其病害 | 第10-11页 |
| 1.1 洋桔梗简介 | 第10页 |
| 1.2 洋桔梗病害 | 第10-11页 |
| 2 β-1,3-葡聚糖酶及其转基因研究 | 第11-14页 |
| 2.1 β-1,3-葡聚糖酶的分类及性质 | 第12页 |
| 2.2 β-1,3-葡聚糖酶的抗真菌作用机制 | 第12-13页 |
| 2.3 转β-1,3-葡聚糖酶基因植物在抗真菌病害中的应用研究 | 第13-14页 |
| 3 洋桔梗基因工程研究 | 第14-16页 |
| 3.1 洋桔梗转基因方法研究 | 第14-15页 |
| 3.2 洋桔梗转基因研究进展 | 第15-16页 |
| 3.3 洋桔梗转基因研究中存在的问题与展望 | 第16页 |
| 4 RT-PCR技术及其在转基因植物研究中的应用与发展 | 第16-19页 |
| 4.1 RT-PCR技术简介 | 第16-17页 |
| 4.2 RT-PCR技术中常见问题分析与对策 | 第17页 |
| 4.3 RT-PCR技术的优点与不足 | 第17-18页 |
| 4.4 RT-PCR技术在转基因植物检测中的应用 | 第18-19页 |
| 5 本研究的思路、目的及意义 | 第19-20页 |
| 第2章 农杆菌介导法对洋桔梗的转化和筛选 | 第20-31页 |
| 1 材料与方法 | 第20-25页 |
| 1.1 材料 | 第20-21页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 1.1.2 菌株和质粒 | 第20-21页 |
| 1.1.3 生化试剂 | 第21页 |
| 1.1.4 培养基 | 第21页 |
| 1.2 方法 | 第21-25页 |
| 1.2.1 含重组质粒pBI121-Glu大肠杆菌的活化、鉴定和培养 | 第21-22页 |
| 1.2.2 大肠杆菌重组质粒pBI121-Glu的提取和鉴定 | 第22-23页 |
| 1.2.3 重组质粒pBI121-Glu转化农杆菌 | 第23-24页 |
| 1.2.4 含重组质粒的农杆菌侵染液的制备 | 第24-25页 |
| 1.2.5 叶盘转化法转化洋桔梗 | 第25页 |
| 1.2.6 抗性芽的生根筛选培养 | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-29页 |
| 2.1 含重组质粒大肠杆菌的菌落PCR鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2 重组质粒pBI121-Glu的提取和PCR鉴定 | 第26页 |
| 2.3 重组质粒pBI121-Glu转化农杆菌及其鉴定 | 第26-27页 |
| 2.4 抗性芽的筛选和培养 | 第27-29页 |
| 2.5 抗性芽的生根筛选和培养 | 第29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 第3章 转化洋桔梗植株的分子检测 | 第31-42页 |
| 1 材料与方法 | 第31-35页 |
| 1.1 材料 | 第31页 |
| 1.2 方法 | 第31-35页 |
| 1.2.1 抗性苗的PCR检测 | 第31-33页 |
| 1.2.2 转化株的RT-PCR检测 | 第33-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-39页 |
| 2.1 抗性苗的PCR检测 | 第35-38页 |
| 2.1.1 洋桔梗基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.1.2 PCR检测 | 第36-38页 |
| 2.2 转化株的RT-PCR检测 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-42页 |
| 第4章 转基因洋桔梗的β-1,3-葡聚糖酶活性测定及对灰霉病抗性鉴定 | 第42-50页 |
| 1 材料与方法 | 第42-45页 |
| 1.1 材料 | 第42-43页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第42页 |
| 1.1.2 供试菌株 | 第42页 |
| 1.1.3 生化试剂 | 第42-43页 |
| 1.2 方法 | 第43-45页 |
| 1.2.1 β-1,3-葡聚糖酶的活性测定 | 第43-44页 |
| 1.2.2 转基因洋桔梗抗灰霉病的鉴定 | 第44-45页 |
| 1.3 试验数据的统计分析 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-48页 |
| 2.1 转基因洋桔梗粗酶液中β-1,3-葡聚糖酶活性分析 | 第45-46页 |
| 2.1.1 葡萄糖标准曲线的制作 | 第45-46页 |
| 2.1.2 酶活计算公式 | 第46页 |
| 2.1.3 DNS法测得的酶活结果 | 第46页 |
| 2.2 转基因洋桔梗的离体叶片抗灰霉病鉴定 | 第46-47页 |
| 2.3 转基因洋桔梗的出瓶活体抗灰霉病鉴定 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 附录 | 第59-66页 |
| 附录1 主要缩略词表 | 第59-60页 |
| 附录2 MS培养基的贮备液配方 | 第60-61页 |
| 附录3 主要试剂和培养基的配制方法 | 第61-64页 |
| 附录4 质粒小提试剂盒说明 | 第64-65页 |
| 附录5 植物基因组DNA快速抽提试剂盒说明 | 第65-66页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
