| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-32页 |
| ·EMC 的研究现状 | 第10-20页 |
| ·EMCV 的病原生物学 | 第10-13页 |
| ·EMCV 的致病机理 | 第13-14页 |
| ·EMCV 的流行病学 | 第14-15页 |
| ·EMC 的临床症状及病理变化 | 第15-17页 |
| ·EMCV 的诊断技术 | 第17-19页 |
| ·疫苗研究进展 | 第19-20页 |
| ·环介导等温扩增技术（LAMP 技术） | 第20-29页 |
| ·LAMP 技术的概述 | 第20页 |
| ·LAMP 技术的特点 | 第20-21页 |
| ·LAMP 技术的基本原理 | 第21-26页 |
| ·RT-LAMP 产物的检测 | 第26-27页 |
| ·LAMP 技术的应用 | 第27-29页 |
| ·研究目的及意义 | 第29页 |
| ·研究内容及技术路线 | 第29-32页 |
| ·研究内容 | 第29-31页 |
| ·技术路线 | 第31-32页 |
| 2 材料 | 第32-37页 |
| ·病料及毒株 | 第32页 |
| ·细胞、菌种与质粒载体 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32-33页 |
| ·实验所需主要试剂 | 第33-34页 |
| ·试验所需主要溶液及其配制 | 第34-37页 |
| ·细胞培养所用溶液 | 第34-35页 |
| ·病毒RNA 提取所用溶液 | 第35页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所用溶液 | 第35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化所用试剂 | 第35-37页 |
| 3 方法 | 第37-47页 |
| ·猪脑心肌炎病毒的分离鉴定 | 第37-42页 |
| ·RT-PCR 引物设计 | 第37页 |
| ·病料处理 | 第37页 |
| ·病毒的细胞分离培养 | 第37页 |
| ·病毒的RT-PCR 鉴定 | 第37-38页 |
| ·PCR 产物的纯化与回收 | 第38-39页 |
| ·PCR 产物的克隆与序列测定 | 第39-41页 |
| ·分离毒株的毒力测定-TCID_(50) 的测定 | 第41页 |
| ·分离毒株的理化特性鉴定 | 第41-42页 |
| ·猪脑心肌炎病毒RT-LAMP 快速检测方法的建立 | 第42-47页 |
| ·总RNA 的提取 | 第42页 |
| ·RT-LAMP 引物设计 | 第42-44页 |
| ·RT-LAMP 扩增反应 | 第44页 |
| ·RT-LAMP 扩增产物的纯化及酶切鉴定 | 第44-45页 |
| ·RT-LAMP 扩增反应条件的优化 | 第45页 |
| ·RT-LAMP 扩增方法特异性的检测 | 第45-46页 |
| ·RT-LAMP 扩增方法灵敏度的检测 | 第46页 |
| ·RT-LAMP 扩增方法重复性和稳定性的检测 | 第46页 |
| ·RT-LAMP 检测方法的应用 | 第46-47页 |
| 4 结果 | 第47-56页 |
| ·猪脑心肌炎病毒的分离鉴定 | 第47-49页 |
| ·病毒的细胞分离培养 | 第47页 |
| ·细胞毒的RT-PCR 检测结果 | 第47-48页 |
| ·PCR 产物的克隆与序列测定 | 第48页 |
| ·分离毒株的毒力测定-TCID_(50) 的测定 | 第48页 |
| ·分离毒株的理化特性鉴定 | 第48-49页 |
| ·猪脑心肌炎病毒RT-LAMP 快速检测方法的建立 | 第49-56页 |
| ·RT-LAMP 扩增反应结果 | 第49-50页 |
| ·RT-LAMP 扩增产物的酶切鉴定 | 第50页 |
| ·RT-LAMP 扩增反应条件的优化 | 第50-54页 |
| ·RT-LAMP 扩增方法特异性的检测 | 第54页 |
| ·RT-LAMP 扩增方法灵敏度的检测 | 第54-55页 |
| ·RT-LAMP 扩增方法重复性和稳定性的检测 | 第55页 |
| ·RT-LAMP 检测方法的应用 | 第55-56页 |
| 5 讨论 | 第56-59页 |
| ·猪脑心肌炎病毒的分离鉴定 | 第56页 |
| ·疑似猪脑心肌炎病料的采集 | 第56页 |
| ·猪脑心肌炎病毒在BHK-21 细胞培养 | 第56页 |
| ·猪脑心肌炎病毒的鉴定 | 第56页 |
| ·猪脑心肌炎病毒RT-LAMP 快速检测方法的建立 | 第56-59页 |
| ·RT-LAMP 操作过程中假阳性问题 | 第56-57页 |
| ·RT-LAMP 反应体系的分析 | 第57-58页 |
| ·RT-LAMP 方法的进一步研究 | 第58-59页 |
| 6 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 附录A | 第68-69页 |
| 在读期间发表论文 | 第69-71页 |
| 作者简介 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
