摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 引言 | 第9-15页 |
1.1 苹果褪绿叶斑病毒研究进展 | 第9-11页 |
1.1.1 苹果褪绿叶斑病毒的发生及危害 | 第9-10页 |
1.1.2 苹果褪绿叶斑病症状特点 | 第10页 |
1.1.3 苹果褪绿叶斑病毒传播途径 | 第10页 |
1.1.4 苹果褪绿叶斑病毒病原性质 | 第10页 |
1.1.5 苹果褪绿叶斑病毒的检测 | 第10-11页 |
1.1.6 ACLSV 致病机制相关研究 | 第11页 |
1.2 酵母双杂交系统及其在植物病毒学研究中的应用 | 第11-13页 |
1.2.1 酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system,Y2H) | 第11-12页 |
1.2.2 酵母双杂交系统的优点和局限性 | 第12页 |
1.2.3 酵母双杂交系统在植物病毒学研究中的应用 | 第12-13页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第13-15页 |
第二章 苏俄苹果( Malus sylvestris cv. R12740-7A) cDNA 文库的构建 | 第15-24页 |
2.1 材料与方法 | 第15-19页 |
2.1.1 材料 | 第15页 |
2.1.2 方法 | 第15-19页 |
2.2 结果与分析 | 第19-22页 |
2.2.1 苏俄苹果组培苗的获得 | 第19页 |
2.2.2 苏俄苹果总 RNA 提取及质量测定 | 第19-20页 |
2.2.3 苏俄苹果 mRNA 模板 dscDNA 合成 | 第20-21页 |
2.2.4 苏俄苹果文库滴度的测定 | 第21-22页 |
2.2.5 cDNA 插入片段大小的检测 | 第22页 |
2.3 讨论 | 第22-24页 |
第三章 ACLSV CP、MP 诱饵载体的构建 | 第24-34页 |
3.1 材料与方法 | 第24-27页 |
3.1.1 材料 | 第24页 |
3.1.2 方法 | 第24-27页 |
3.2 重组诱饵载体毒性及自激活活性检测 | 第27-29页 |
3.2.1 酵母菌 Y2H gold 感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
3.2.2 诱饵载体转化酵母 Y2H gold | 第28页 |
3.2.3 诱饵载体的自激活与毒性检测 | 第28-29页 |
3.3. 结果与分析 | 第29-33页 |
3.3.1 ACLSV CP、MP 基因的扩增 | 第29页 |
3.3.2 ACLSV CP、MP 与 pMD18T-simple 重组质粒的构建 | 第29-30页 |
3.3.3 ACLSV CP 和 MP 诱饵载体的构建 | 第30-32页 |
3.3.4 重组诱饵载体的自激活及毒性检测 | 第32-33页 |
3.4 讨论 | 第33-34页 |
第四章 利用诱饵 ACLSV CP 和 MP 筛选苏俄苹果 cDNA 文库 | 第34-50页 |
4.1 材料与方法 | 第34-37页 |
4.1.1 材料 | 第34页 |
4.1.2 方法 | 第34-37页 |
4.2 结果与分析 | 第37-45页 |
4.2.1 ACLSV CP、MP 互作苏俄苹果因子阳性克隆的筛选 | 第37-38页 |
4.2.2 ACLSV CP、MP 互作苏俄苹果因子阳性克隆中 cDNA 片段大小的鉴定 | 第38-39页 |
4.2.3 酵母双杂交筛选 ACLSV CP、MP 互作寄主因子阳性克隆的测序及分析 | 第39-45页 |
4.3 讨论 | 第45-50页 |
4.3.1 与 ACLSV CP 互作寄主基因的分析 | 第46-48页 |
4.3.2 与 ACLSV MP 互作寄主基因的分析 | 第48-49页 |
4.3.3 酵母双杂交技术筛选阳性克隆的复杂性 | 第49-50页 |
第五章 全文总结与展望 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
附录 | 第56-62页 |
作者简介 | 第62-63页 |
在读期间发表的学术论文 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |