| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-31页 |
| 1.1 引言 | 第10-12页 |
| 1.2 CRISPR/Cas9技术的历史溯源 | 第12-17页 |
| 1.2.1 CRISPR/Cas的发现 | 第12-14页 |
| 1.2.2 CRISPR/Cas的功能 | 第14-16页 |
| 1.2.3 CRISPR/Cas9应用于基因编辑及原理 | 第16-17页 |
| 1.3 CRISPR/Cas9技术在植物中的应用 | 第17-30页 |
| 1.3.1 CRISPR/Cas9技术在植物应用中的研究进展概况 | 第17-18页 |
| 1.3.2 CRISPR/Cas9应用于植物基因编辑的技术路径 | 第18-25页 |
| 1.3.3 CRISPR/Cas9在植物基因编辑中的特异性 | 第25-27页 |
| 1.3.4 CRISPR/Cas9在靶基因转录组调控上的应用 | 第27-28页 |
| 1.3.5 CRISPR/Cas9在碱基编辑上的应用 | 第28-30页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第30-31页 |
| 第二章 材料与方法 | 第31-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第31页 |
| 2.1.2 菌株和质粒载体 | 第31页 |
| 2.1.3 酶和生化试剂 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-46页 |
| 2.2.1 常用试剂和培养基的配制 | 第32-34页 |
| 2.2.2 常规分子克隆操作 | 第34-40页 |
| 2.2.3 植物培养及根癌农杆菌介导的植物转化 | 第40-41页 |
| 2.2.4 离子含量测定 | 第41页 |
| 2.2.5 CRISPR/Cas9双元载体构建步骤及方法 | 第41-46页 |
| 第三章 植物CRISPR/Cas9基因组编辑工具箱的创制及功能验证 | 第46-61页 |
| 3.1 适用于单、双子叶植物的CRISPR/Cas9双元载体构建 | 第47-51页 |
| 3.1.1 CRISPR/Cas9双元载体的构建蓝图 | 第47-48页 |
| 3.1.2 CRISPR/Cas9双元载体的组装元件准备 | 第48-49页 |
| 3.1.3 适用于单、双子叶植物的CRISPR/Cas9双元载体的组装路径 | 第49-51页 |
| 3.2 CRISPR/Cas9工具箱在玉米中的功能验证 | 第51-57页 |
| 3.2.1 玉米zmHKT1基因的打靶载体构建 | 第51-52页 |
| 3.2.2 玉米zmHKT1基因的突变情况检测 | 第52-54页 |
| 3.2.3 玉米zmHKT1基因功能的初步探究 | 第54-57页 |
| 3.3 CRISPR/Cas9工具箱在拟南芥中的功能验证 | 第57-60页 |
| 3.3.1 拟南芥CHLI1、CHLI2基因的打靶载体构建 | 第57-58页 |
| 3.3.2 拟南芥CHLI1、CHLI2基因的突变情况检测 | 第58-60页 |
| 3.4 本章小结与讨论 | 第60-61页 |
| 第四章 卵细胞特异表达的CRISPR/Cas9系统的创制及功能验证 | 第61-83页 |
| 4.1 卵细胞特异表达的CRISPR/Cas9系统的创制 | 第62-64页 |
| 4.1.1 拟南芥T1代CRISPR/Cas9突变体存在的严重嵌合问题 | 第62页 |
| 4.1.2 卵细胞特异启动子EC1.2p驱动Cas9的双元载体构建 | 第62-64页 |
| 4.2 EPC CRISPR/Cas9系统在拟南芥中的功能验证 | 第64-76页 |
| 4.2.1 对拟南芥CHLI1、CHLI2基因的敲除尝试 | 第64-66页 |
| 4.2.2 对拟南芥TRY CPC、ETC2基因的敲除尝试 | 第66-76页 |
| 4.3 EPC CRISPR/Cas9系统的优化 | 第76-80页 |
| 4.3.1 采用卵细胞特异性启动子EC1.1p的优化尝试 | 第76-77页 |
| 4.3.2 采用35S增强子的优化尝试 | 第77-79页 |
| 4.3.3 采用卵细胞特异性增强子的优化尝试 | 第79-80页 |
| 4.4 本章小结与讨论 | 第80-83页 |
| 第五章 植物碱基编辑工具箱的创制及功能验证 | 第83-91页 |
| 5.1 基于胞嘧啶脱氨酶的植物碱基编辑工具箱的创制 | 第83-85页 |
| 5.1.1 碱基编辑双元载体的构建蓝图 | 第83页 |
| 5.1.2 适用于双子叶植物碱基编辑的双元载体的构建 | 第83页 |
| 5.1.3 适用于单子叶植物碱基编辑的双元载体的构建 | 第83-85页 |
| 5.2 基于胞嘧啶脱氨酶的植物碱基编辑工具箱的功能验证 | 第85-89页 |
| 5.2.1 拟南芥AtALS基因的打靶载体构建 | 第85-86页 |
| 5.2.2 拟南芥AtALS基因的突变情况检测 | 第86-89页 |
| 5.3 本章小结与讨论 | 第89-91页 |
| 第六章 结论和展望 | 第91-93页 |
| 6.1 结论 | 第91页 |
| 6.2 展望 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-107页 |
| 附录 | 第107-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 个人简介 | 第113页 |
