摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第12-28页 |
1.1 脂肪酸糖酯概论 | 第12-14页 |
1.1.1 脂肪酸糖酯简介 | 第12页 |
1.1.2 脂肪酸糖酯的合成 | 第12-13页 |
1.1.3 酶催化合成脂肪酸糖酯 | 第13-14页 |
1.2 非水介质酶催化概论 | 第14-19页 |
1.2.1 离子液体(Ionic Liquids, IL) | 第14-18页 |
1.2.2 低共熔溶剂(Deep Eutectic Solvents, DES) | 第18-19页 |
1.3 脂肪酶概论 | 第19-21页 |
1.3.1 脂肪酶简介 | 第19-20页 |
1.3.2 脂肪酶催化机制 | 第20页 |
1.3.3 脂肪酶的应用 | 第20-21页 |
1.4 酶固定化概论 | 第21-23页 |
1.4.1 酶固定化简介 | 第21-22页 |
1.4.2 酶固定化的应用 | 第22-23页 |
1.5 响应面法(Response Surface Methodology, RSM) | 第23-26页 |
1.5.1 响应面法简介 | 第23页 |
1.5.2 响应面法的设计方法 | 第23-25页 |
1.5.2.1 中心组合实验设计(Central Composite Rotatable Design, CCRD) | 第24页 |
1.5.2.2 Box-Behnken试验设计(Box-Behnken Design, BBD) | 第24-25页 |
1.5.3 响应面法的应用 | 第25-26页 |
1.6 本论文工作的研究意义 | 第26-28页 |
1.6.1 研究的目的和内容 | 第26页 |
1.6.2 实验内容 | 第26-27页 |
1.6.3 创新性 | 第27-28页 |
第2章 实验仪器、材料及方法 | 第28-60页 |
2.1 仪器 | 第28-29页 |
2.2 材料和试剂 | 第29-35页 |
2.2.1 脂肪酶 | 第29页 |
2.2.2 离子液体(IL) | 第29-31页 |
2.2.3 低共熔溶剂(DES) | 第31-32页 |
2.2.3.1 本实验用到的胆碱盐和氢键供体 | 第31-32页 |
2.2.3.2 本实验用到的低共熔溶剂 | 第32页 |
2.2.4 本实验用到的主要化学药品 | 第32-35页 |
2.3 研究方法 | 第35-43页 |
2.3.1 低共熔溶剂物理性质测定 | 第35-36页 |
2.3.1.1 溶剂的水分含量 | 第35页 |
2.3.1.2 底物的溶解度 | 第35-36页 |
2.3.1.3 DES的粘度 | 第36页 |
2.3.2 反应物和产物的HPLC检测 | 第36-42页 |
2.3.2.1 检测条件 | 第36-37页 |
2.3.2.2 产物标准曲线的绘制 | 第37-42页 |
2.3.2.2.1 产物的制备 | 第37-38页 |
2.3.2.2.2 不同链长的脂肪酸葡萄糖酯的标准曲线 | 第38-40页 |
2.3.2.2.3 不同链长的脂肪酸葡萄糖苷酯的标准曲线 | 第40-42页 |
2.3.3 产物的结构分析 | 第42-43页 |
2.4 黑曲霉脂肪酶交联聚集体(ANL-CLEA)的制备及其催化性质的研究 | 第43-49页 |
2.4.1 ANL-CLEA的制备及表征 | 第43-47页 |
2.4.1.1 ANL-CLEA制备的单因素实验 | 第43-44页 |
2.4.1.2 响应面法优化ANL-CLEA的制备 | 第44-45页 |
2.4.1.3 ANL-CLEA蛋白含量的测定 | 第45-46页 |
2.4.1.4 ANL-CLEA的活性测定 | 第46-47页 |
2.4.1.5 扫描电镜观察 | 第47页 |
2.4.2 ANL-CLEA在水溶液中的催化性质 | 第47-48页 |
2.4.2.1 最适温度 | 第47页 |
2.4.2.2 最适p H | 第47页 |
2.4.2.3 热稳定性 | 第47-48页 |
2.4.3 ANL-CLEA在在叔戊醇中催化葡萄糖月桂酸酯的合成 | 第48-49页 |
2.5 Lipozyme TLIM催化转酯化反应合成月桂酸葡萄糖酯 | 第49-55页 |
2.5.1 溶剂的筛选 | 第49页 |
2.5.1.1 离子液体的筛选 | 第49页 |
2.5.1.2 低共熔溶剂的筛选 | 第49页 |
2.5.2 Lipozyme TLIM在双溶剂体系催化糖酯合成的各个单因素最优条件的确定 | 第49-51页 |
2.5.3 响应面法优化月桂酸葡萄糖酯的合成 | 第51-52页 |
2.5.4 以不同链长的脂肪酸乙烯酯作为底物进行脂肪酸葡萄糖酯的合成 | 第52-53页 |
2.5.5 酶固定化并用于催化脂肪酸葡萄糖酯的合成 | 第53-55页 |
2.5.5.1 改性硅藻土载体(OSC)的制备 | 第53-54页 |
2.5.5.2 嗜热丝孢菌脂肪酶(TLL)的OSC固定化 | 第54页 |
2.5.5.3 几种OSC固定化脂肪酶的活性比较 | 第54页 |
2.5.5.4 TLL-OSC用于催化月桂酸葡萄糖酯的合成 | 第54页 |
2.5.5.5 TLL-OSC固定化酶的重复利用性及扫描电镜观察 | 第54-55页 |
2.6 Novozym 435 催化酯化反应合成脂肪酸葡萄糖苷酯 | 第55-60页 |
2.6.1 甲基葡萄糖苷作为底物进行脂肪酸葡萄糖苷酯的合成 | 第55页 |
2.6.2 离子液体的筛选 | 第55-56页 |
2.6.3 脂肪酶的筛选 | 第56-57页 |
2.6.3.1 实验室现有六种脂肪酶用于催化葡萄糖苷酯合成的比较 | 第56页 |
2.6.3.2 Lipozyme TLIM和Novozym 435 催化葡萄糖苷酯合成的对比 | 第56-57页 |
2.6.4 以不同链长的脂肪酸作为底物酯化合成葡萄糖苷酯 | 第57-58页 |
2.6.5 Novozym 435 催化软脂酸葡萄糖苷酯合成反应的单因素优化 | 第58-60页 |
第3章 结果 | 第60-103页 |
3.1 黑曲霉脂肪酶交联聚集体(ANL-CLEA)的制备及其催化性质研究 | 第60-73页 |
3.1.1 ANL-CLEA的制备及表征 | 第60-68页 |
3.1.1.1 ANL-CLEA制备过程涉及的各种因素的优化 | 第60-62页 |
3.1.1.2 RSM法优化ANL-CLEA制备 | 第62-67页 |
3.1.1.2.1 确定实验因素及水平范围 | 第62-63页 |
3.1.1.2.2 实验设计及结果 | 第63页 |
3.1.1.2.3 统计学数据分析 | 第63-65页 |
3.1.1.2.4 各因素水平的优化 | 第65-66页 |
3.1.1.2.5 最优值验证 | 第66-67页 |
3.1.1.3 ANL-CLEA酶活力测定 | 第67-68页 |
3.1.2 扫描电子显微镜观察 | 第68页 |
3.1.3 ANL-CLEA在水溶液中的催化性质 | 第68-70页 |
3.1.4 ANL-CLEA非水介质中催化脂肪酸葡萄糖酯合成 | 第70-73页 |
3.2 Lipozyme TLIM催化转酯化反应合成脂肪酸葡萄糖酯 | 第73-94页 |
3.2.1 离子液体和低共熔溶剂的筛选 | 第73-76页 |
3.2.1.1 离子液体筛选 | 第73-74页 |
3.2.1.2 低共熔溶剂筛选 | 第74-76页 |
3.2.2 Lipozyme TLIM双溶剂体系催化糖酯合成各单因素的最优条件 | 第76-79页 |
3.2.3 采用响应面法对Lipozyme TLIM催化糖酯合成反应进行优化 | 第79-86页 |
3.2.3.1 确定实验单因素水平及范围 | 第79-80页 |
3.2.3.2 实验设计安排及实验结果 | 第80-81页 |
3.2.3.3 实验数据统计分析 | 第81-83页 |
3.2.3.4 因素水平的优化 | 第83-85页 |
3.2.3.5 响应面最优值的验证 | 第85-86页 |
3.2.4 以不同链长的脂肪酸乙烯酯作为反应物合成脂肪酸葡萄糖酯 | 第86-88页 |
3.2.4.1 所得转化率的比较 | 第86页 |
3.2.4.2 产物的结构分析 | 第86-88页 |
3.2.5 嗜热丝孢菌脂肪酶(TLL)的OSC固定化 | 第88-94页 |
3.2.5.1 脂肪酶的OSC固定化 | 第88-89页 |
3.2.5.2 TLL-OSC固定化酶催化月桂酸葡萄糖酯的合成 | 第89-93页 |
3.2.5.3 TLL-OSC固定化酶的重复利用性及扫描电镜观察 | 第93-94页 |
3.3 Novozym 435 催化酯化反应合成脂肪酸葡萄糖苷酯 | 第94-103页 |
3.3.1 葡萄糖苷作为底物进行脂肪酸葡萄糖苷酯的合成 | 第94-95页 |
3.3.2 离子液体的筛选 | 第95-96页 |
3.3.3 酶的筛选 | 第96-98页 |
3.3.4 以不同链长脂肪酸作为反应物通过酯化反应合成脂肪酸葡萄糖苷酯 | 第98页 |
3.3.5 Novozym 435 催化软脂酸葡萄糖苷酯合成 | 第98-103页 |
第4章 讨论 | 第103-115页 |
4.1 脂肪酶的固定化 | 第103-107页 |
4.1.1 黑曲霉脂肪酶CLEA固定化 | 第103-107页 |
4.1.1.1 ANL-CLEA的制备 | 第103-104页 |
4.1.1.2 水溶液中ANL-CLEA的催化性质 | 第104-105页 |
4.1.1.3 非水介质中ANL-CLEA催化糖酯的合成 | 第105-107页 |
4.1.2 TLL-OSC固定化 | 第107页 |
4.2 溶剂性质与脂肪酸糖酯合成之间的关系 | 第107-111页 |
4.2.1 离子液体性质对糖酯合成的影响 | 第107-110页 |
4.2.2 低共熔溶剂性质对糖酯合成的影响 | 第110-111页 |
4.3 离子液体体系中的糖酯合成 | 第111-115页 |
4.3.1 底物的选择 | 第111-113页 |
4.3.1.1 葡萄糖VS葡萄糖苷 | 第111-112页 |
4.3.1.2 脂肪酸VS脂肪酸乙烯酯 | 第112-113页 |
4.3.2 响应面法优化 | 第113-115页 |
第5章 结论 | 第115-117页 |
5.1 酶促脂肪酸糖酯合成 | 第115页 |
5.2 脂肪酶的固定化 | 第115-117页 |
参考文献 | 第117-123页 |
附录 | 第123-131页 |
致谢 | 第131-132页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第132页 |